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Genemay>>>细胞表面免疫荧光染色方案
1,收集所需细胞并在PBS / BSA中将细胞悬浮液的浓度调整为1x10 6细胞/ ml。也可以使用全血样本。
2.将100ul细胞悬液/全血分装到所需数量的试管中。
3.加入适量的预稀释的荧光染料偶联抗体。充分混合并在室温下孵育20分钟。
4.如果使用分离的细胞,请执行步骤
5。5 .如果使用全血样品,请加入2毫升新鲜制备的Genemay RBC裂解液(目录号GMH801)并充分混合。在室温下孵育10分钟。以300g离心5分钟。丢弃上清液。
6.用2 ml PBS / BSA洗涤,以300g离心5分钟。丢弃上清液。
7.如果需要,将细胞重悬于0.5 ml PBS / BSA或0.5 ml 1%多聚甲醛的PBS / BSA中。
8.在流式细胞仪上获取数据
>>>细胞内细胞因子免疫荧光染色方案1.
收获所需的细胞,并将细胞悬浮液在PBS / BSA中的浓度调整为1x10 6细胞/ ml。也可以使用全血样本。
2.将100ul细胞悬液/全血分装到所需数量的试管中。
3.如果同时进行细胞表面抗原染色,请先添加适当体积的预稀释的荧光染料偶联抗体。充分混合并在室温下孵育20分钟。
4.如果使用分开的单元格,请执行步骤5。
5.如果使用全血样品,请加入2毫升新鲜制备的Genemay RBC裂解液(目录号GMH801)并充分混合。在室温下孵育10分钟。以300g离心5分钟。丢弃上清液。
6.用2 ml PBS / BSA洗涤,以300g离心5分钟。丢弃上清液。
7,加入0.5 ml /管的固定缓冲液(目录号GMH808),充分混合并在室温下于黑暗中孵育20分钟。
8.添加2 ml /管的通透溶液(Cat.GMH809),并以300g离心5分钟。丢弃上清液。
9.重复第8步。
10.将细胞重悬于残留的通透溶液中,并在室温下黑暗中添加适当体积的荧光染料偶联的抗细胞因子抗体或适当的同种型对照,持续20分钟。
11.用2 ml渗透溶液洗涤两次,然后在300g离心5分钟。丢弃上清液。
12.将细胞重悬于0.5 ml PBS / BSA中。
13.在流式细胞仪上获取数据。

