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本人刚接触单抗的糖型分析领域不久,导师最近让我建立单抗糖型分析的方法。我查阅了一些资料,感觉比较前沿,资料不多,还是有很多具体的问题不是很明白。希望论坛前辈赐教。
我查到的大概步骤是:PNGase F酶切,收集寡糖,2-AB荧光标记,除去多余标记,最后过HILIC分析。
其中酶切和荧光标记也许可以按买到的试剂说明书进行操作,但如何在酶切后收集寡糖以及除去多余标记的具体步骤就不知道了。
还有一个疑问就是有关寡糖标准品怎么用,如何对照。因为我们实验室没有质谱所以应该用标准品进行定性吧。
望不吝赐教。
我查到的大概步骤是:PNGase F酶切,收集寡糖,2-AB荧光标记,除去多余标记,最后过HILIC分析。
其中酶切和荧光标记也许可以按买到的试剂说明书进行操作,但如何在酶切后收集寡糖以及除去多余标记的具体步骤就不知道了。
还有一个疑问就是有关寡糖标准品怎么用,如何对照。因为我们实验室没有质谱所以应该用标准品进行定性吧。
望不吝赐教。
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2015-08-11
2018-07-16
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