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细胞外基质和底物,质粒纯化小知识

  
  2024-05-07
  

质粒纯化试剂盒所采用的纯化材料主要是硅胶,可以分为离心柱型和硅胶树脂型。

离心柱型是采用硅胶膜进行吸附,这样提取的质粒纯度较高,可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、转化和连接等,这种一般是小量和中量的提取盒。但是硅胶膜的吸附量取决于膜的厚度,如果膜太厚就会对过滤产生不利影响。

硅胶树脂可以用来进行大量的提取,客户可以根据实验的需要加入不同量的树脂,量上比较灵活,而且它的价格也比同规格的离心柱型的便宜一点。当然,有利必有弊,利用它得到的质粒纯度就远不如用硅胶膜得到的质粒纯度了。

质粒纯化试剂盒 离心柱型 硅胶树脂型

Performance

QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN阴离子交换柱技术高效纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 g(Maxi)、或100 g(Midi)高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染(参见\"Transfection efficiency versus plasmid purification method\")、克隆和体外转录。

Principle

QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。

Procedure

使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA(参见\"QIAGEN Plasmid Kit procedures\")。得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,离心收集。

Applications

QIAGEN Plasmid Kits纯化质粒DNA适合多种应用,如:

E-mail: info@univ-bio.com 网站关键词:抗体、流式、组化、分子、蛋白纯化生化试剂、实验室服务、仪器等 网站关键词:CSTpeprotech抗体

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