重组抗体表达纯化
1.成熟的序列优化技术,配合HEK293T改良细胞系,最大程度激发表达潜能,常规瞬时转染小试产量在10~200mg/L。
2.经过优化的稳定表达株,产量高达4.5g/L,可提供,亦提供50L以内的发酵生产服务。
产品编号
载体名称
载体骨架说明
纯化方案
AVH-1101
pAZ-V5-hCH-IgG1
HumanIgG1重链恒定区
ProteinA/G
AVH-1102
pAZ-V5-hCH-IgG2
HumanIgG2重链恒定区
ProteinA/G
AVH-1103
pAZ-V5-hCH-IgG3
HumanIgG3重链恒定区
ProteinA/G
AVH-1201
pAZ-V5-hCH-IgM*3
HumanIgM(allele3)重链恒定区
ProteinG
AVH-2101
pAZ-V5-hCL-IgGκ
HumanIgGκ轻链恒定区
*
AVH-2102
pAZ-V5-hCL-IgGλ1
HumanIgGλ1轻链恒定区
*
AVH-3106
pAZ-V5-h-IgG1Fc
HumanIgG1Fc片段
ProteinA
AVM-1101
pAZ-V5-mCH-IgG1
MouseIgG1重链恒定区
ProteinA/G
AVM-1102A
pAZ-V5-mCH-IgG2A
MouseIgG2重链恒定区
ProteinA/G
AVM-2101
pAZ-V5-mCL-IgGκ
MouseIgGκ轻链恒定区
*
AVM-2102
pAZ-V5-mCL-IgGλ1
MouseIgGλ1轻链恒定区
*
AVM-3108
pAZ-V5-m-IgG1Fc
MouseIgG1Fc片段
ProteinA
在获得了抗体轻(重)链可变区的前体下,为了获得高产量的,高特异性的重组抗体蛋白,我们会在多个方面进行资源调配和合理优化。
●根据抗体亚型和应用要求,选择恰当的恒定区骨架质粒。目前,我们可以提供小鼠、人、兔等物种的的恒定区骨架质粒,通过重组无缝克隆方式将可变区基因连入表达载体,无需客户重新基因合成或调取。可变区测序时,尽可能挑取多个阳性克隆,确认序列无误。
● 我们筛选出来有多条高效率的抗体分泌信号肽,一般情况下我们使用来自于利钠肽V5高效信号肽进行分泌表达,当抗体部分泌或产量偏低时,我们可能会设计并构建多种信号肽的表达质粒平行试验,筛选最佳的信号肽方案。
● 配合我们的抗体表达质粒,我们会有针对性的选择293和CHO相关细胞系,并摸索最佳的细胞转染条件,实现转染试剂品牌与用量、细胞培养成本、表达量的最佳配比,以期达到最经济科学的实验条件。
● 常规实验设计中,我们根据FC的信息会选择ProteinA/G对重组抗体进行纯化,不会添加额外的融合标签,对于高纯度要求的抗体,使用AKATA进一步纯化,根据纯度和量的要求额外加收费用。
● 常规的科研级别抗体表达订单中,客户可免费使用我们的表达体系,但我们最终只交付抗体终产物,不赠送表达体系及关键的技术信息。(合作开发项目另议)
补充说明
1.正常情况下,抗体蛋白的表达量都比较可观,但是某些突变序列产量会偏低,因此我们蛋白交付量跨度较大。
2.一般我们使用还原性和非还原性电泳检测重组抗体,如果客户需要验证抗体的特异性,需提供额外抗原使用WB检测。
3.我们使用哺乳动物细胞表达获得重组抗体,我们只承诺蛋白序列与设计相符,不承诺重组抗体具有客户预期的生理活性。
4.即使蛋白不表达或表达量极低,我们无法获得目的蛋白,我们也会提供全套的实验流程和原始照片。
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