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单抗药物血药浓度测定_北京百普赛斯生物科技股份有限公司
2025-06-15
在过去的数十年间，单克隆抗体 (mAb) 作为一类药物应用在疾病的治疗中发挥了重要作用。随着人们对疾病相关生物分子理解的增加，单抗生产技术的进步，越来越多的分子靶点被鉴定出来用于药物治疗，促进了众多单抗应用的肿瘤免疫靶向治疗时代的到来。随着\"精准医疗”的不断推进，以治疗性单抗血药浓度检测作为患者个体化治疗的用药参考将是一个趋势。 目前，用于单抗浓度测定的方法包括固相酶联免疫吸附测定 (ELISA)，流体液相放射免疫测定，流体液相移动性测定和报告基因测定，最常用的技术是ELISA。下面介绍三种有代表性的用于定量治疗性抗体的免疫实验方法。 Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Human IgG, Fcγ Fragment Specific (Jackson, Cat.No. 109-035-098) 简要流程： 1. 将human PD-1 (ACROBiosystems, Cat.No. PD1-H5221) 以0.1ug/well的浓度包被到板上； 检测结果：为避免非特异背景干扰，该方法血清样本进行了1000倍稀释，因此血清样本检测范围0.19-6.25ug/ml，检测灵敏度0.19ug/ml（见图1）。 图1. 间接法测定PD-1抗体药血药浓度标准曲线 相关产品： ELISA Assay Kit for Anti-PD-1 h-mAb in Human Serum (ACROBiosystems, Cat.No. EPH-V1)； 简要流程： EPH-V1(ELISA Assay Kit for Anti-PD-1 h-mAb in Human Serum) 1. 将human PD-L1 (ACROBiosystems, Cat.No. PD1-H5258) 以0.2ug/well的浓度包被到板上； 检测结果：该方法血清样本检测线性范围1.565-6.25ug/ml，检测灵敏度1.565ug/ml（见图3）。 图3. 配体竞争法测定PD-1抗体药血药浓度标准曲线 相关产品： 比较上文三个案例，案例三配体竞争法线性范围较窄，导致样本稀释过于繁琐，且准确性较低。案例一间接法和案例二抗体竞争法相比，线性范围接近，灵敏度接近。但是，案例一间接法所用二抗为Goat anti-human IgG，在血清中会有非特异性背景干扰，而案例二抗体竞争法使用和生物素结合的Streptavidin Protein, HRP作为检测二抗，避免背景干扰（见图4）。 为了支持上述研究，ACROBiosystems公司采用案例二的抗体竞争法，开发了一系列ELISA血药浓度定量检测试剂盒，用于测定临床前和临床血液样本中的抗体药浓度。该系列产品经证实具有低背景、通用快速、高批间一致性等卓越的实验表现。
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