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人肺细胞HLF-a细胞株1.酶标抗体的制备2.取材 将培养细胞或悬浮细胞用0.1Mol/L PBS液冲洗,离心沉淀后,立即转入固定液(2%甲醛液或2%戊二醛液均可)pH 7.2,4℃固定5min~30min(依抗原性质所定)。如病料为组织块,则取适当大小,先固定1h然后取出,以新的双面刀片切成50~100μm的薄组织再行固定1h~2h。3.漂洗 以PBS液漂洗夜,换液3~4次。4.血清孵育,25℃1h或4℃夜,孵育的标本放置于加盖 查看更多>
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普通细胞,特殊细胞、特殊培养方式另计 查看更多>
MSC是指间充质干细胞,是干细胞的一种,能分化为间质组织。... 查看更多>
based on splitting onto on plateWarm collagenase media to 37°C in a water bath.Aspirate media off of cell culture plate.Add the following amount of collagenase 查看更多>
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实验原理       稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。        瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天);外源基因的表达水平不... 查看更多>
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人诱导的多能干细胞(hiPSC)和胚胎干细胞(hESC)作为再生医学的细胞来源获得了极大的关注。hiPSC 和 hESC 具有永久生长(自我更新)和分化成包含人体(多能性)的任何类型的细胞的能力,甚至少数细胞可在受体内形成畸胎瘤。  干细胞质量监控决定着干细胞研究的进展。为了解决这个问题,我们都集中在诱导的多能干细胞和胚胎干细胞细胞表面的糖链结构研究。在 2007 年,刚开发 hiPSCs 后,对来自不同来源的 hiPSCs 进行了... 查看更多>
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原代细胞细胞株的区别

作者:PriCells原生原代

1.原代细胞培养最大优点是:细胞直接来源于机体组织,生物性状尚未发生大的变化,在一定程度上能够反映体内的状态。

2.细胞株和原代细胞不是完全一样。

3.并非每一种组织源性细胞都有相应的细胞株,有些细胞必须养原代,

4.细胞株是来源于原代细胞,原代细胞导入了病毒增殖基因并转变为细胞株,细胞株带有癌变细胞的特点。

5.细胞株的遗传物质已经发生改变,并不再具有接触生长抑制现象。

6.细胞株形态及状态不如原代细胞,相对长时间传代;而原代细胞生长是有限性。

7.细胞株在传代过程中可能发生形态的改变及变异,细胞株没有用原代细胞稳定性。

8.原代细胞的受体能够正确反映体内的生理和病理状态。

9.原代细胞的信号传导信号系统能够正确反映体内的生理和病理状态。

10.原代细胞的蛋白质生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。

11.原代细胞的RNA生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。

12.原代细胞的DNA生物学和遗传学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。

13.原代细胞对外界反应能够正确反映体内的生理和病理状态。

14.原代细胞对体外检测能够正确反映体内的生理和病理状态。

15.原代细胞对毒理和致畸反应能够正确反映体内的生理和病理状态。

16.原代细胞对药物筛选能够正确反映体内的生理和病理状态。

17.原代细胞对个体化药物治疗能够正确反映体内的生理和病理状态。

18.原代细胞培养与体内原组织在形态结构和功能活动上一样,绝对是检测判断、药物治疗最好的实验对象。

19.如在中国进行体外检测和药物研发进行细胞培养,请要用中国人组织源性原代细胞。


请问细胞转染质粒后想获得稳定细胞系,是先用流式细胞仪筛选后再用抗性培养基筛选吗?一般是转染后多久开始进行筛选
潜血表示分解的红细胞,不作为诊断疾病的标准。有些潜血是因为长时间激烈运动引起的,当然多数是由泌尿系统疾病引起,2%的血尿由全身性疾病或泌尿系统邻近器官病变所致。病因非常之多。所以尿检潜血必须做一个镜检,就是在显微镜下对尿液中的红细胞进行观观查。主要是数目和形态。镜检红细胞的个数,如不超过3个/HP,即是正常的。平时多饮水,注意休息,就行了。如果超过3个就要看形态。如果是多形型,也就是说,尿中红细胞不是球型的而是扁的,长的,而且,变形红细胞80%以上,常提示为肾小球性血尿,就是说肾脏有问题了。若结果为均一型,变形红细胞20%以下,常提示为非肾小球性血尿。也就是说即使尿中红细胞数多于8个,一般是肾下泌尿系损害引起的。潜血的情况比较复杂,尽快做个镜检。
所谓生物工程,一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础,结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术,充分运用分子生物学的最新成就,自觉地操纵遗传物质,定向地改造生物或其功能,短期内创造出具有超 远缘性状的新物种,再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养,以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术。
生物工程包括五大工程,即遗传工程(基因工程)、细胞工程、微生物工程(发酵工程)、酶工程(生化工程)和生物反应器工程。在这五大领域中,前两者作用是将常规菌(或动植物细胞株)作为特定遗传物质受体,使它们获得外来基因,成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”。后三者的作用则是这一有巨大潜在价值的新物种创造良好的生长与繁殖条件,进行大规模的培养,以充分发挥其内在潜力,为人们提供巨大的经济效益 和社会效益。
生物工程的应用领域非常广泛,包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响,为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
一个瓶子中的细胞,如果可以培养到50代,怎么分原代培养的和传代培养的
帮同学问:最近要筛选一个人肺癌细胞稳定转染株,用什么方法比较好呢?目的细胞是人肺癌细胞,在其他地方看到有的用质粒,有的用慢病毒进行稳定株筛选,两种方法有什么区别呢,具体操作是什么呢?望有大神告知
正常的尿液中有很少的上皮细胞,来自脱落的输尿管,膀胱,尿道的上皮上,一般在尿检中,这个数值没有太大意义.但是如果这个数值特别高的时候,就要考虑是否有局部炎症或者肿瘤侵袭引起的上皮细胞脱落.但是诊断炎症或者肿瘤时不能单独依赖一项尿检结果.如果没有全身其它症状或者临床指标时,诊断还是不成立的.同时,女性有自己的特殊生理结构:尿道和阴道距离特别近.正是因为两者挨得比较近,所以阴道分泌物很容易混入尿液中.而阴道分泌物大部分都是上皮细胞(阴道上皮脱落的很多).所以,在得到解雇后,要回顾一下自己的分泌物有没有混入尿液中.
指导意见:
毕竟阴道上皮是鳞状上皮,而输尿管,膀胱,尿道的上皮是柱状上皮,形态上是不一样的.所以您要是对您的结果出怀疑态度,首先:重新留尿,做一个复检(留尿时注意防止阴道分泌物污染);或者让值班医生分析一下是那种类型的上皮(鳞状还是柱状).所以不要担心这个结果.一般情况下污染的比较多.
干细胞有以下特点:
1. 干细胞本身不是终末分化细胞(即干细胞不是处于分化途径的终端);
2. 干细胞能无限增殖分裂;
3. 干细胞可连续分裂几代,也可在较长时间内处于静止状态;
4. 干细胞分裂产生的于细胞只能在两种途径中迭择其一或保持亲代特征,仍作为干细胞;或不可逆地向终末分化。

于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配,使得一个子细胞不可逆地走向分化的终端成为功能专一的分化细胞;另一个保持亲代的特征,仍作为干细胞保留下来。分
化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数的控制,可以说,干细胞是具多向潜能和自我更新特点的增殖速度较缓慢的细胞
上皮细胞2是什么意思_有问必答_123
蓝天静海的鱼儿2021-07-21
患者信息:女28岁江西南昌病情描述(发病时间、主要症状等):怀孕34周加四天,检查白细胞镜检是2—5,上皮细胞是2+,请问正常吗?想得到怎样的帮助:怀孕34周加四天,检查白细胞镜检是2—5,上皮细胞是2+,请问正常吗?曾经治疗情况及是否有过敏、遗...
磷酸钙细胞转染技术 123
肥沙褐匀0012021-08-15
转染的话一般是以克数来规范转染的质粒数量,所以会有很多质粒.一般转染的质粒除了带有需要过表达的基因以外,还需要带有标记基因.标记基因可以被特定的抗体检测,从而判断是否有效表达.如果你要过表达的是某种蛋白,也可以直接通过该蛋白的抗体检测,对照是没有转染的同种细胞,这样表达效果就可以通过WESTERN BLOT看见了.过表达倒没什么标准,每种蛋白表达量也不一致,选择适合自己的浓度就好. 顺转的话,我们实验室采用lipo2000,具体步骤百度文库有,英文的protocol在lipo2000的说明书上也能看到. 稳转的话一般需要在质粒上构建某个抗性基因,如嘌呤霉素抗性.这样用抗性培养基多次筛选就可以筛选出稳转的细胞株,但是比较难.
稳定转染VS瞬时转染123
qydsmile2021-08-21
可以做了 又不用表达个几十天的
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