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稳定转染VS瞬时转染
发布人 qydsmile   发布时间 2021-08-21
可以做了 又不用表达个几十天的
[求助]转染带有GFP的目的基因载体后,观察不到荧光 经验共享...
发布人 寞比sln   发布时间 2021-08-20
之前转染了带GFP的质粒，冻存估计有半年了拿来复苏，想做后续实验，结果稳转的细胞荧光少还很弱，请问怎么办？急急急！
【求助】稳转细胞株进行细胞增殖和周期时是否还需要加G418_问答...
发布人 lifengna   发布时间 2021-08-19
稳转细胞株进行细胞增殖和周期时是否还需要加G418
实验Q&A:如何用慢病毒转染构建稳转细胞系 实验方法
发布人 耳语仏   发布时间 2021-08-18
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选，前者操作简单，但是成功率很低，费时，假阳性高，最后可能导致几个月的工作白干了，慢病毒稳定株筛选方法比较简单，并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性，没有假阳性，慢病毒。
【求助】请问质粒转染细胞后能够稳定表达多久？ 考研
发布人 无聊7Ns   发布时间 2021-08-17
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
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发布人 安卓2006   发布时间 2021-08-17
准备养细胞，原代培养，刚刚取下来的组织块怎么保存吗几小时内用的可以放在冰盒里，一个月左右的可以放在-20度冰箱，更长时间的就要放-80度冰箱了。
小白求助:shRNA质粒稳转细胞一般能转几个进去? 核酸基因技术讨论版...
发布人 血魇DUV   发布时间 2021-08-16
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
细胞培养中出现的小黑点到底是什么那?
发布人 RaySunE8YN   发布时间 2021-08-16
实验室培养的原代猪肺微血管内皮细胞出现了图中黑色线状类似虫子一样的东西的污染，培养基无明显浑浊变化，细胞形态也正常，更换培养基后这种情况仍然存在，求大神告知这些小东西到底是什么，是否会对细胞造成影响
磷酸钙细胞转染技术
发布人 肥沙褐匀001   发布时间 2021-08-15
转染的话一般是以克数来规范转染的质粒数量,所以会有很多质粒.一般转染的质粒除了带有需要过表达的基因以外,还需要带有标记基因.标记基因可以被特定的抗体检测,从而判断是否有效表达.如果你要过表达的是某种蛋白,也可以直接通过该蛋白的抗体检测,对照是没有转染的同种细胞,这样表达效果就可以通过WESTERN BLOT看见了.过表达倒没什么标准,每种蛋白表达量也不一致,选择适合自己的浓度就好. 顺转的话,我们实验室采用lipo2000,具体步骤百度文库有,英文的protocol在lipo2000的说明书上也...
原代细胞检测与鉴定 细胞技术讨论版论坛
发布人 快乐一点点   发布时间 2021-08-15
各位专家们大家好，最近在做一些原代细胞相关实验。细胞是自己分离提取的，老板说直接用就行。我想问问大家一般都会做鉴定吗？如果做鉴定是什么方法？普通的鉴定与检测一般都会做，我想咨询的是大家有没有一整套完整的原代细胞检测及鉴定方案。小小10蚁豆敬上，求大神解答！
指南|单克隆抗体生产的细胞工程学_基因
发布人 戴蒙久兆18   发布时间 2021-08-14
应该是通过病毒载体质粒上的标记基因比如说荧光的eGFP或者带嘌呤霉素抗性基因的用嘌呤霉素筛选吧!
[求助]原代大鼠皮层神经元培养为什么总活不过4天 经验共享...
发布人 佳佳加   发布时间 2021-08-14
我是用24孔板做的，换液后第二天细胞就成这样了，第一张是孔中间的细胞状态，第二张是孔边缘的细胞状态，中间的细胞状态很差，几乎成活的可能性很小了。同样的操作，为什么会有这样的结果，加液量是1ml/孔，是不是加的液体量太多了，导致孔中间的细胞缺氧？还是其他的什么原因？
细胞系和原代细胞
发布人 农师兄   发布时间 2021-08-13
A、从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞，A错误；B、原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株，但遗传物质并没有发生改变，B错误；C、细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系，C正确；D、胚胎细胞的分裂能力强，一般增殖50-60次，不能无限繁殖，D错误．故选：C．
细胞转染筛选问题 生物科学
发布人 面忻   发布时间 2021-08-13
请问细胞转染质粒后想获得稳定细胞系，是先用流式细胞仪筛选后再用抗性培养基筛选吗？一般是转染后多久开始进行筛选
【专题讨论】慢病毒转染后筛选稳定株 细胞技术讨论版
发布人 最爱hi11   发布时间 2021-08-12
帮同学问：最近要筛选一个人肺癌细胞稳定转染株，用什么方法比较好呢？目的细胞是人肺癌细胞，在其他地方看到有的用质粒，有的用慢病毒进行稳定株筛选，两种方法有什么区别呢，具体操作是什么呢？望有大神告知
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