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Description
Details
RACTIVITY | Human |
SENSITIVITY | 6.5 pg/mL |
ASSAY RANGE | 15.6 - 500 pg/mL |
REAGENTS PROVIDED | Human Abeta 42 Standard Standard/Sample Diluent Tissue Homogenization Buffer Wash Buffer (20x) Substrate A Substrate B Stop Solution |
INTENDED USE
This human Aß42 ELISA kit is to be used for the in vitro quantitative determination of human Aß42 concentrations in cell culture supernatant and other biological fluids. This kit is intended for LABORATORY RESEARCH USE ONLY.
INTRODUCTION
Alzheimer’s disease (AD) is a neurodegenerative disease that affects about 6% senior people worldwide. It is characterized by the formation of extracellular amyloid plaques, the accumulation of neurofibrillary tangles in neurons, and loss of neurons in some area of the brain. Amyloid beta peptide 42 (Aß42) has a tendency toward forming beta pleated structure and precipitation. It constituents the initial and key component of the insoluble amyloid fibril in the plaque. Aß42, like other amyloid peptides, is formed by the sequential cleavage of amyloid precursor protein by beta-secretase and gamma-secretase. Aß40, Aß42 and Aß43 are different only at the few C-end amino acids. Aß42 is believed to contribute to the pathogenesis of AD. One hypothetical mechanism is that the deposition of amyloid fibril onto the brain tissue results in AD. Another hypothesis is that the neurotoxicity of Aß42 oligomer is the cause of the disease.
Study suggested that lower than normal Aß42/ Aß40 ratio in cerebrospinal fluid could predicate development of AD. In blood and cerebrospinal fluid, the concentration of Aß40 is about 10 times higher than that of Aß42.
Hyper-phosphorylated Tau protein forms neurofibrillary tangles inside neurons. Study found that Aß42 level is lower and phosphorylated Tau protein level is higher in the cerebrospinal fluid of AD patients comparing with normal control and other dementia conditions.
This Aß42 ELISA kit can be used for measuring Aß42 in tissue homogenate, cell culture supernatant, and other biological fluids. The kit is for research use only, therefore, should not be used in any diagnostic or therapeutic procedures.
CITATIONS
1. Zhao A, Li Y, Qiu Y, Li B, Xu W, Wang Y, Liu J, Deng Y.Increased prediction value of biomarker combinations for the conversion of mild cognitive impairment to Alzheimer"s dementia. Transl Neurodegener 2020; 9(1):30.
Additional
Additional Information
| Product Specificity | Human Amyloid Beta Peptide 42 ELISA Kit |
|---|---|
| Application | Refer to Insert |
| Size | 96 wells |
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比利时研究人员发现了一个在癌症转移中的关键步骤。他们的研究显示，可以通过调节巨噬细胞的代谢来阻止癌细胞扩散，而这种调节的关键在于诱导巨噬细胞从形成癌细胞血管的细胞中"偷取"糖分。造成癌细胞周围血管结构更加紧密，由此阻挡癌细胞向其他器官扩散。
这项研究结果发表在了国际顶尖学术期刊《细胞代谢》（CellMetabolism）上。
巨噬细胞属于白细胞的一种，负责清除入侵机体的微生物和有害物质，是免疫系统的重要组成结构。然而，巨噬细胞在癌症发展中却具有一定的推动作用。肿瘤组织具有一群特异性巨噬细胞，在肿瘤血管的形成中起到决定性的作用。通过这种特异性巨噬细胞的作用，导致肿瘤血管通常结构混乱，癌细胞更容易穿过血管间隙逃逸，进入血液，最终入侵其他器官。
研究人员阻断了巨噬细胞中REDD1基因的表达，刺激细胞的糖酵解作用，使得细胞内更多的糖被转化为能量。"肿瘤的葡萄糖供给对人体会形成危害。具体来说，形成血管的细胞由于葡萄糖供应过剩导致生长失控，最终形成一个混乱且不规则的典型肿瘤血管网络。"文章的作者之一MassimilianoMazzone教授说。
"通过改变巨噬细胞的代谢，我们建立起了巨噬细胞和肿瘤血管之间的葡萄糖竞争。最终，肿瘤血管因为失去了葡萄糖过剩的刺激，在肿瘤周围形成更加架构化的屏障，阻挡肿瘤细胞扩散。"
此外，研究人员还试图将这项研究拓展到其他抗癌药物的应用中。"在小鼠中，能抑制癌细胞生长的药物mTOR抑制剂有时会因为阻断了巨噬细胞的糖酵解作用而加速癌细胞扩散。我们希望能利用我们的研究结果来准确预测那些患者对mTOR抑制剂具有抗性。"MassimilianoMazzone教授说。
做一个药物对细胞增殖和迁移的抑制的研究，已知药物对细胞增殖有影响，想要继续做迁移实验，怎么排除药物对细胞的抑制作用对细胞迁移产生的影响？谢谢大家！
1，如果加入的药物中含有金属，是否会有影响？
金属对CCK-8显色有影响。当终浓度为1Mm的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10Mm的话，将会100%抑制。
2，CCK-8试剂的保存条件？
在避光条件下CCK-8试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话，推荐在-20℃下保存。但是CCK-8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收，从而影响检测结果，若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。
3，预培养后，更换培养基需要细胞计数吗？
一般情况下用胰蛋白酶处理对数增长期的细胞，用血球计数盘计数，制备成一定浓度的细胞悬液即可。如果想要精密计数细胞的话，可以预培养后取培养基用血球计数盘进行计数。
4，CCK-8对于不同的细胞，灵敏度是否一样？
不一样，悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于贴壁细胞，一般加入CCK-8培养1-4小时吸光度已经很高，但对于悬浮细胞则可能吸光度较低，可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决。
5，悬浮细胞和贴壁细胞在数量上有何区别？
悬浮细胞由于染色比较困那，一般需要增加细胞数量和延长培养时间。贴壁细胞染色比较容易，若细胞数量过大，有时吸光度会超过酶标仪的读数。
6，应该每次做标准曲线吗？
建议每次做。虽然细胞是一样的，但是细胞的状态不一定一样，对于状态不一样的细胞，建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样，灵敏度可能会有轻微的差异，对于不同的批号建议分别做标准曲线。
7，有时在药物作用情况下，细胞已经死亡，但是脱氢酶的活性还在，是否能计算细胞数量？
不能。由于CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量，如果细胞已经死亡，但脱氢酶的活性还在，则试剂测定的细胞数量将会比真实值高，不能真实反映活细胞数量，建议采用别的方法测定。
8，实验之前，是否需要先检测一下培养基和CCK-8是否会反应？
需要，可用一个孔检测一下，因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质，在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK-8是否反应。一般正常在的OD值应该在0.4以下。
9，如果OD值太低，可以采取什么办法？
可以采取2个办法：①适当增加细胞数量。②延长加入CCK-8试剂后的染色时间。
以上内容来自英格恩生物CCK8试剂盒
酶的作用是催化剂,促进或抑制反应的进行.加热主要是通过升高温度加快反应速率,无机催化剂和酶的原理相同,都是通过降低反应的活化能加快反应速率
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹入内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。
如题。以及下面问题：
要检测转基因小鼠（不知道）和正常鼠细胞免疫的改变（T细胞）需要做那些实验？
