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제품특징
□ 특징
● PCR억제물질에 대한 저항성을 강화
● 기본 프로토콜과 고속 프로토콜에 모두 사용가능
● 2× premix에 내열성 RNaseH 첨가 - 잔존 mRNA에 의한 PCR 저해반응 억제
□ 제품설명
Probe qPCR Mix는 Dual-LabeledProbe법을 이용한 Real Time PCR 전용 시약이다. Anti-Taq 항체를 이용한 hot start PCR 효소와 RealTime PCR용 buffer를 개량하여 일반적인 샘플의 증폭뿐만 아니라, PCR 억제물질이 포함되 샘플에서도 높은 특이성, 높은 증폭 효율, 높은 검출 감도의 증폭을 실현하고 있다. 2× 농도의 premix type시약으로 반응액 조제가간단하고, 내열성RNaseH인 Tli RNaseH 가 2× Premix 시약중에 첨가되어 있어 cDNA를 주형으로 한 경우 잔존 mRN에의한 PCR 반응 저해를 극한으로 억제 할 수 있다. 또 고속 프로토콜도 사용할 수 있으며, 폭넓은 범위에서 보다 정확한 타겟의 정량 및 검출을 재현성있게 진행할 수 있다.
□ 내용
Probe qPCR Mix (Code RR391A, 50 ㎕ 반응시 200회분량)
1. | Probe qPCR Mix (2×conc.)*1 | 1 ㎖× 5개 |
2. | ROX Reference Dye (50×conc.)*2 | 200 ㎕ |
3. | ROX Reference Dye II (50×conc.)*2 | 200 ㎕ |
*1 PCR효소, dNTPMixture, Mg2+, Tli RNase H를포함한다.*2 Life Technologies의 Real Time PCR 장치 등 well 간형광 신호를 보정하는 장치로 해석하는 경우에 사용한다.
● ROX ReferenceDye(50×)을 첨가하는 기종
AppliedBiosystems 7300 Real-Time PCR System (Life Technologies)StepOnePlusReal-Time PCR System (Life Technologies)
● ROX ReferenceDye II(50×)을 첨가하는 기종
AppliedBiosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Life Technologies)
● 첨가가 필요 없는 기종
ThermalCycler Dice Real Time System III (Code TP950/TP970/TP980)ThermalCycler Dice Real Time System II (Code TP900/TP960)ThermalCycler Dice Real Time System Single (Code TP850/TP870)ThermalCycler Dice Real Time System Lite (Code TP700/TP760)Smart CyclerSystem/Smart Cycler II System (Cepheid사)LightCycler96/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics사)CFX96Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad사)
□ 보존
4℃ 보존: 6개월 안정 ※ 오염에 주의하십시오.- 장기 보존의 경우는 -20 ℃에서보관하십시오. - 일단 용해 후에는 4℃ 보관하고, 6개월안에 사용할 것을 권장합니다.
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各位,最近几个月一直在帮着公司进口细胞株,我是新手,从来没有接触过这样的业务,摸着石头过河,遇到了很多问题,也得到了很多教训和经验,不敢独享,觉得还是分享一下吧,给有需要的指指道,希望能少走弯路。
先不多说,正文如下:
大家看好了,我写的是企业进口细胞株,不是针对高校或者别的什么科研机构,因为到目前为止国家还没有一个正式的文件去指导企业进口细胞株,只有一个过渡性文件,因此各地操作时也有些不同,除了北京、上海、广东等一些发达的地方有操作程序,其他地方由于企业进口细胞株的案例很少,因此很麻烦的(比如黑龙江,我们最后都找到省卫生厅厅长了)。
首先,你们公司如果选择购买一个国外的细胞株,最先考虑的是付款问题,你得找一家进出口代理公司,帮你操作,这个都是比较常规的,另外你最好再找一家在北京或者上海的公司帮助清关。这里有涉及到“进口代理协议”和“供货合同,我们当时是签了一个三方合同”,这里一定要注意和国外沟通好,需要进口的细胞株的名称、数量、价值等等,后期发货的时候千万不要不一致。
因为细胞株是特殊物品,需要从省卫生厅那里拿到一个“医用特殊物品准出入境证明”,这个东西很难搞的(高校或科研机构容易一些,基本上都有程序),尤其是一些没有先例的省份(领导不敢批,怕担事),我们公司就是黑龙江的先例,这个东西不知道怎么办的到时候可以找我私聊。搞这个东西的正常周期是2-3周,请注意,一定要把准出入境的有效时间尽量写长一点,还有就是主送单位一定要你所清关的口岸的检疫局,例如北京口岸入境,就写北京出入境检验检疫局。当时没人提醒我,这两个我都搞错过,结果多跑了几次,我们的国家服务人员态度一次比一次差,快气死了,不过后来还是搞到了。
拿到“医用特殊物品准出入境证明”以后,预付款也打了,国外准备要发货了,这之前还要一个“特殊物品入境审批单”,这个需要到你所清关的口岸的检疫局搞,下面以北京出入境检验检疫局为例,这个东西要是你是外地的(非清关所在口岸)是搞不到的,你得先去北京出入境检验检疫局备案(就是公司证照原件,情况说明,单位说明等等,比较好办),然后在你细胞株进口之前2-3周申请(1周能批,有效期3个月)。我当时是委托北京一家公司办的,因为你自己办是不方便的,到时候审批单还要亲自去取,外地的很麻烦。
箱单、发票就不说了
接下来是运输,细胞株一般都用干冰运输,当然也可以选择液氮,不过价钱不一样,液氮要比干冰贵40%左右。要计算好运输过程中干冰损失量,量要足够,最好放一个温度记录仪,如果你没有把握,在货物到港清关之前,也可以加干冰的,就比较贵,单次1000元左右。发货之前一定和发货方、运输公司沟通好,标签和数量一定要准入证明和审批单一致,要不然清关很麻烦的,我再次犯了一个错误。
最后就是清关了,这里一定要注意,你找的清关公司的清关能力一定强,一定是做过冷链清关的。
总结一下:
程序是:签合同,找进口代理和清关公司,办理相关证明文件,选择冷了运输公司,运输,清关。
文件:合同、代理协议、医用特殊物品准出入境证明、特殊物品入境审批单、发票、箱单等。
另外,这里面还有不少细节,我就不一一说了,如果真有这方面运输的,可以找我。
版主horizon801留言:
谢谢分享
目前想建立家系血标本的淋巴细胞的永生化细胞株,请问有哪些成熟的方法及protol,费用贵么?
G418浓度之前师兄已经摸索出来,这次筛选直接用师兄浓度。
1、6孔板转染后多长时间开始进行G418筛选?
2、G418筛选是在6孔板中继续筛选还是转到24/96孔?大皿?
3、G418浓度什么时候减量
4、?筛选过程中荧光观察一小部分克隆不错,如何挑选出来?
5、整个筛选过程大约需要多长时间?
lipo3000筛选
谢谢大家!
希望有大神赐教!谢谢!
病情描述(发病时间、主要症状等):
体检血常规中血小板计数343.血小板比积0.39.
尿检中白细胞计数26.2.上皮细胞计数10.30
心电图下写窦性心律,p-r间期偏短
想得到怎样的帮助:
有没有什么大问题

