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- 稳定细胞株筛选是指将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选，得到可稳定表达目的蛋白或稳定表达沉默特定基因的细胞株。
常规转染技术可分为两大类，一类是是瞬时转染，一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中、虽然可以达到高水平的表达，但通常只持续数天，在转染后24-72小时内（依赖各种不同的构建手段）分析结果，常常用到一些报告基因系统如荧光蛋白等来帮助检测。稳定转染则是外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白，需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒。
一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选。最常用的抗性标记基因有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin）。
服务流程
服务项目及周期
项目名称 周期 价格 载体构建及鉴定 10-14 询价 细胞转染及筛选 15-20 细胞单克隆化培养 20-30 RT-PCR、WB检测 15 实验报告整理 2
应用实例
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发布于 ： 2021-08-23
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