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小弟养脂肪干细胞，不知道那一步出问题长出的毛骨悚然的东西，求各位大神鉴定一下，给予一些指导。不甚感激

心肌梗死（Myocardialinfarction，MI）特征是心脏供血减少和心肌功能减弱，成人心脏的自我再生能力有限，使得心肌梗死的状况雪上加霜。由于干细胞具有自我更新复制能力和分化潜能，因此干细胞移植是使心脏组织再生和增强心脏功能的新的方法。最近的研究表明脂肪组织来源干细胞（ADSCs），即从脂肪组织分离的多能干细胞，具有广泛的分化潜能，可分化为心肌细胞。现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与脂肪来源干细胞和心肌梗死研究的文献，以供参考。

Real-timetrackingofADIposetissue-derivedstemcellswithinjectablescaffoldsintheinfarctedheart.pdf(866.54k)

造血干细胞，是一种低分化的原始细胞，而不是未分化细胞，被认为是没有任何的形态学特征的细胞，还不能在形...

原代培养效果很好，第四天便成典型梭形鱼群状生长；第六天传代

但传代后细

胞形态发生改变，属于正常吗，请大神知道，初次培养；万分感谢

买的人骨髓间充质干细胞，用第五代进行诱导成骨，第五代细胞状态不错，但就是诱导不好，24孔板，一孔1W，汇合度70%开始诱导

培养基：DEX0.01μmol/L

VC50μg/ml

β甘油酸钠10mM/L

10%FBS,最后用DMEM定容

第五代细胞状态和诱导10日后染色状态如图所示，各位大神帮忙看看可能存在什么问题

上了研究生就开始养牙周膜干细胞，经历了小半年无数次的失败，可能有快100颗牙齿了吧，那些个无助和绝望...

干( gàn) 细胞（stem cell）是一类具有自我复制能力（self-renewing）的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）和成体干细胞（somatic stem cell）。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞（totipotent stem cell，TSC）、多能干细胞（pluripotent stem cell）和单能干细胞（unipotent stem cell）（专能干细胞）。干细胞（Stem Cell）是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。

一般细胞没有自我复制能力，而且也不会分化。

干细胞的分类：
（一）按功能分类

1、全能干细胞，由卵子和精子的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中八细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。具有形成完整个体的分化潜能，如胚胎干细胞，受精卵就是最高层次的胚胎干细胞。
2、多功能干细胞，一种或多种组织的起源细胞，它能分化出多种类型细胞，是全能干细胞的后裔，但不可能分化出足以构成完整个体的所有细胞。具有分化出多种细胞组织的潜能，如造血干细胞、神经细胞。
3、多潜能干细胞，只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞。
4、专一性干细胞，只能产生一种细胞类型；但是，具有自更新属性，将其与非干细胞区分开。只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化，如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的成肌细胞。
（二）按发育过程出现先后和分布分类
1、胚胎干细胞(Embryonic stem cell)：在胚胎发育早期的囊胚中，可发育为不同的细胞，是所有细胞最初期的形态。
ES细胞是一种高度未分化细胞，它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞；研究和利用ES细胞是生物工程领域的核心问题之一；在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。
2、成体干细胞(Adult stem cell)：亦称成人干细胞，医学上常用的大致包括骨髓干细胞、脐带血干细胞及周边血干细胞。它们存在成体特定的组织中，具有由干原细胞形成先驱细胞，分化成具特定功能细胞的能力。例如：骨髓干细胞、造血干细胞、神经干细胞。
干细胞（英语：Stem cell）是原始且未特化的细胞，它是未充分分化、具有再生各种组织器官的潜在功能。干细胞存在所有多细胞组织里，能经由有丝分裂与分化来分裂成多种的特化细胞，而且可以利用自我更新来提供更多干细胞。对哺乳动物来说，干细胞分为两大类：胚胎干细胞与成体干细胞，胚胎干细胞取自囊胚里的内细胞团；而成体干细胞则来自各式各样的组织。在成体组织里，干细胞与先驱细胞担任身体的修复系统，补充成体组织。在胚胎发展阶段，干细胞能分化为任何特化细胞，但仍会维持新生组织 (像是血液、皮肤或肠组织) 的正常转移。
干细胞的应用：
（一）基础应用
干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。
1、内源性调控
干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。
（1）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控。
（2）转录因子的调控。
2、外源性调控
除内源性调控外，干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响。
（1）分泌因子间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。
（2）膜蛋白介导的细胞间的相互作用。
（3）整合素（Integrin）与细胞外基质。
（二）科研应用
1、器官修补更新；
2、人造器官与组织的来源；
3、新药开发；
4、基因功能研究；
5、基因治疗的工具；
6、毒理、药理研究；
7、癌症研究。
（三）医疗运用
干细胞移植治疗技术，被誉为人类有史以来的飞跃式医疗手段，实现人体各个器官修复和更新。
主要治疗项目：
1、器官修复：干细胞能在短时间内修复各种器官组织，为各类疾病提供非常有效的治疗效果。
2、肿瘤：把成人神经干细胞注射到老鼠大脑中的研究可以神奇地成功治疗肿瘤。由于脑癌的扩散迅速，运用传统的技术几乎不可能治愈。哈佛医学院的研究人员注射了由基因工程得到的成人干细胞，用以把另外注射的无毒性物质转化成抗癌剂。几天之内，成人干细胞迁移到癌变区域，注射物可以减少百分之八十的肿块。
3、骨骼：骨髓间充质干细胞是具有自我更新能力并可以分化成为成骨细胞的一种干细胞。多项基于动物骨髓的研究和一些初步的临床数据显示了它们在重建骨骼方面的贡献。在整形外科方面，一些由创伤引起的，由癌症引起的或感染引起的骨细胞的损失，如进行手术弥补人造关节会引起一些不便，而进行干细胞的自体移植正可以解决这方面的问题。
4、脱发：毛发囊泡也具有干细胞。治疗可能可以简单地向毛囊干细胞发出信号从而向附近那些因年长而萎缩的毛囊细胞发出化学信号，使它们轮流再生制造健康的头发。
5、治疗不孕：研究人员发现从成年女性身上获取的干细胞在实验室中可以自发生成新的卵子。在小鼠身上进行的实验显示这些卵子可以进一步发育。
6、糖尿病：干细胞移植可用于治疗糖尿病的。干细胞治疗糖尿病是在血液内提取相应干细胞体外分离、纯化、扩增后经静脉注射或介入等方式输入到患者体内，在胰腺组织微环境的诱导下分化增殖为胰岛样细胞并分泌胰岛素，促进受损胰岛组织细胞的再生、修复，从而达到功能重建的目的，起到治疗糖尿病的作用。

我是个实验新手，看了很多园子里关于小鼠骨髓间充质干细胞的帖子，好多人都说不好养，希望哪位仁兄能上传一下具体实验步骤，真的万分感谢

第一次养胚胎干细胞，复苏的时候复苏到六孔板中的其中一个孔中，结果发现细胞很多，于是换了两个6cm皿养，结果越养越少。很纳闷。请教了几位蚂蚁淘的前辈们，于是乎有几个问题还是在心中，希望还能在这里能得到答复。

1。培养细胞的时候是一定要在六孔板中吗？那一般复苏细胞的时候复苏到几个孔中呢?

2.细胞的密度是大概多少呢?

3.我用的基质胶，说明书上是1;80，结果在孵箱放了一小时后，发现没有想象的胶凝固的样子，没有像果冻那样。反而还是液体状的，这是能用还是不能用呢？

4.如果基质胶一开始就铺好，等到传代的时候再铺，中间每天都在换液，不容易污染吗?

5。刚复苏的细胞，一直漂浮在培养液里，是慢慢地细胞才会贴在基质胶上么，然后才会慢慢在基质胶上生长么？

各位大神，我将培养后的间充质干先液氮冻存了，现在想提rna，可以直接离心做吗？我看有人说要在冰上融化，融化后立即四度离心，离心之后就可以按正常步骤提取了。可是我冻存细胞的时候里面加入了dmso血清和培养基，不需要pbs洗一下再提吗？

干细胞的作用是什么？