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Signosis/p53 Luciferase Reporter RKO Stable Cell Line /SL-0007-FP/1 Ea

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Signosis/p53 Luciferase Reporter RKO Stable Cell Line /SL-0007-FP/1 Ea

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Signosis

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p53 ResponsiveLuciferaseReporterRKOStableCellLineisderivedfromhumancoloncancer,andstablyexpressfireflyluciferasereportergeneunderthecontrolofthep53responseelement.Thiscelllineisanidealcellularmodelformonitoringtheactivationofp53Pathwaytriggeredbystimulitreatment,enforcedgeneexpressionandgeneknockdown.

Principle:

Thep53pathwayplaysacrucialroleineffectivetumorsuppressionbecauseofitscentralfunctionincellcycleregulation,DNArepair,cellularsenescence,andapoptosis,whichcanbeusedforpotentiallydevelopnewdrugtherapiesagainstcancer.UponactivationbyDNAdamage,oncogeneactivation,orhypoxia,p53bindstoitsDNArecognitionsiteonthepromoterregionsofthetargetgenesandregulatethegeneexpression. Signosishasestablishedp53luciferasereporterstablecellline,inwhichluciferaseactivityisspecificallyassociatedwiththeactivityofp53.Therefore,thecelllinecanbeusedasareportersystemformonitoringtheactivationofp53triggeredbystimulitreatment,enforcedgeneexpressionandgeneknockdown.

Thecelllinewasestablishedbytransfectionofp53luciferasereportervectoralongwithG418expressionvectorfollowedbyG418selection.TheG418resistantclonesweresubsequentlyscreenedforetoposide-inducedluciferaseactivity.Theclonewiththehighestfoldinduction(35fold)wasselectedandexpandedtoproducethisstablecellline.

PrinciplebehindTFluciferasereporter. TFluciferasereporterstablecelllineutilizesartificialpromoterconstructstodriveluciferaseexpression. Thepromoterregioncanconsistsofmultiplerepeatsofacis-elementTFbindingsite,aDNAfragmentfromthepromoterregionofaknownTFdownstreamgene,oraDNAfragmentcontainingputative/knownTFbindingsites. ThereareseveralwaysthataTFcanbeactivated,suchasthroughextracellularstimuliorthroughintracellularsignalingpathways. Onceactivated,theTFtranslocatestothenucleusandofteninteractswithrelevantco-factorstodrivegeneexpression. Onceluciferaseisexpressed,itcangeneratelightinanenzymaticassayandtheamountoflightmeasuredispositivelycorrelatedwiththelevelofTFactivation.

Data:

Analysisofp53PathwayReporterRKO StableCellLineinresponsetostimuli. Thecellswereseededona96-wellplateforovernightwithDMEMincluding10%FBS.Thecellsthenweretreatedwithorwithout2ug/mlQuinacrinerespectivelyinDMEMand0.1%FBSfor16hours.

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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...

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小RNA引物设计软件及数据库开发取得新进展动物科学技术学院、...

2021-08-05

hl-60细胞是一种用于实验室研究某些血细胞如何形成的细胞株。在培养基中补充牛胎儿血清.HEPES，抗生素类化学物质，L-谷氨酰胺，通过悬浮培养，hl-60细胞能持续增殖。... 查看更多>

PlasdoneS630CopovidoneProductGuide_图文_

2021-09-10

上海麒盟生物科技有限公司在发布的基因敲减慢病毒稳转细胞株 (LentiKD-Stable)供应信息，浏览与基因敲减慢病毒稳转细胞株 (LentiKD-Stable)相关的产品或在搜索更多与基因敲减慢病毒稳转细胞株 (LentiKD-Stable)相关的内容。查看更多>

ZAMBON S.p.A.企业介绍寻医问药药品网

2021-07-24

北京英茂盛业生物科技有限公司在发布的线粒体定位EGFP稳转细胞系（Hela）供应信息，浏览与线粒体定位EGFP稳转细胞系（Hela）相关的产品或在搜索更多与线粒体定位EGFP稳转细胞系（Hela）相关的内容。查看更多>

DNA电泳技术

2021-07-22

实验周期太长？实验室条件受限，不准用病毒？夏季来临了，想去度假！别担心，都交给我们吧！过表达慢病毒稳转株促销大行动已开始。和元生物倾情回馈新老客户！还等什么，赶紧行动吧！活动时间： 2015年5月15日—2015年10月30日活动内容：针对同一基因、同一载体：1个稳转株12800元；2个稳转株15800元；3个稳转株17800元；服务流程：注：如果您提供的感染细胞的MOI值过高，价格和周期上会有变动哦！本次活动最终解释权归和元生... 查看更多>

LABVOLUTION/Biotechnica | INTEGRA

2021-08-25

Preparation of Copy Standards for PCR GenotypingPCR screens must be designed to detect transgene DNA at the single copy level. To demonstrate this level of sen 查看更多>

体内巨噬细胞清除剂(阴离子氯氟松)品牌:百奥莱博北京

2021-08-01

转染(transfection)专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的生命过程。从本质上讲，和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化，其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞，以提高细胞膜的通透性，从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上，人们往往也通称转染为广义的... 查看更多>

【加热型磁力搅拌器品牌】加热型磁力搅拌器什么牌子好_加热型...

2021-09-14

稳定转染和瞬时转染，细胞转染的步骤基本相同，只是在转染后的细胞处理会不一样。由于瞬时转染只能维持几天，故在转染12～72后就可以在蛋白或基因水平进行相应的检测了。稳转细胞系通常需要通过一些选择性标记反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。通常构建的载体上有两个抗性基因，如，氨苄青霉素和新霉素。那么建立稳转细胞系时该用哪种抗生素来筛细胞呢？很多真核表达质粒上都有两个抗性基因，但一般其中只有一个抗性可以用来筛细胞。其中氨苄青霉素对细胞是没有筛选... 查看更多>

Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay 实验方法

2021-08-30

CAM ASSAYShell-less embryo cultureFertilized white leghorn chicken eggs (SPAFAS Inc., Norwich, CT) were received at day 0 andincubated for 3 days at 37°C with 查看更多>

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2021-09-16

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2021-07-20

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2021-07-26

江苏齐氏生物科技有限公司在发布的稳转细胞株构建服务供应信息，浏览与稳转细胞株构建服务相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建服务相关的内容。查看更多>

家居清洁用品,纺织品全球贸易商名单

2021-07-31

提供商：无锡菩禾生物医药技术有限公司查看更多>

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求嘌呤霉素筛选稳转细胞株的详细步骤分子生物综合其他...123

那那朱2021-07-20

有人有用过吉凯的GV248慢病毒吗，关于胃癌方面的，小弟在构建LncRNA干扰的稳转胃癌细胞SGC-7901株，转想请问这种细胞株嘌呤霉素的筛选浓度是多少，如何进行筛选？

【实验求助】抑癌基因功能研究一定要稳转的细胞株吗? 细胞生物...123

zph20042021-08-03

准备研究一抑癌基因在肿瘤细胞中的过表达的细胞学实验及动物实验，最近做稳转发现细胞不扩增，零星几个一直贴在皿里。对照的无抑癌基因的载体稳转效果就不错，药物筛选11天，发现有很多克隆出现了。试问：1)抑癌基因的研究一定要稳转的细胞吗？瞬转难道不也能说明一些问题吗？2）对于动物实验，稳转的细胞株是最好的，但是如果老是筛选不出稳转的细胞克隆有没有代替的方法？3）大家有什么好的经验来筛选抑癌基因的稳转细胞株克隆。
最近做这个实验感觉像是在和细胞较劲儿，呵呵。

siRNA干扰常见问题123

有恃无恐03502021-07-31

这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。

稳转株的制备_药物123

kahn922021-07-23

稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。

pcDNA3.1能做G418筛选,获得稳定转染株吗– 960问答123

閁錒0952么2017-10-02

不能，它有Neomycin基因，可以用新霉素进行稳定株筛选，获得稳定株。

逆转录聚合酶链反应(RTPCR,rtpcr)资讯123

qishi51142021-08-08

我用腺病毒感染稳转细胞株，用到50微升的量都感染不起来，荧光不表达，PCR验证不出来？求问如果用polybrene该怎么加，转染之前预处理还是加病毒的时候加进去？

【求助】请问质粒转染细胞后能够稳定表达多久？考研123

无聊7Ns2021-08-17

这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。

稳定细胞株筛选123

流苏紫光2021-07-22

转染人MGC803细胞，用嘌呤霉素筛选，已经筛选几个月了，每次都失败告终，时间有限，是在是着急。各位大神，有人做稳转的求指导。**！

筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选123

饼饼4912021-07-26

稳定细胞株筛选是一个长期的过程，稳定细胞株筛选优化，有许多条件需要摸索，而且是从源头开始①在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证②高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白表达量③细胞的选择，筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO，中国仓鼠细胞，由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株，而HEK293细胞则常用于瞬时转染④后期的筛选，双抗预防污染，筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验，而且转染的时候不能有抗生素，关于细胞转染稳定细胞系构建的相关理论

构建好的稳转过表达细胞株,为什么又不表达目的基因了 123

惊叹号7522021-07-24

转入目的基因但为什么不表达mRNA
先提取RNA,反转录成cDNA,然后根据目的基因设计PCR引物,通过半定量RT-PCR确定目的基因表达.
正因为检测的是mRNA,所以要先反转录成cDNA才能PCR.

【求助】瞬转、稳转? 细胞技术讨论版论坛123

zjliuzj2021-08-01

制备成功稳定转染 细胞株后，能否再用瞬时转染的方法转入其它质粒？

小白求助:shRNA质粒稳转细胞一般能转几个进去? 核酸基因技术讨论版...123

血魇DUV2021-08-16

两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。