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Cygnus technologies/A549 HCP WB Kit (F235)/1 kit/F235
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This kit is intended for use in identifying A549 host cell proteins by western blot analysis.
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Anti-A549:HRP Conjugate
A549 HCP Control Antigen
Block/Wash 20x Concentrate
TMB Substrate for WB
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Anti-A549:HRP ConjugateCatalog #: F236-50
A549 HCP ELISA KitCatalog #: F230
A549 HCP Control AntigenCatalog #: F237
Block/Wash 20x ConcentrateCatalog #: F062
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2021-08-14
陕西脉元生物科技有限公司是稳转细胞株筛选技术服务商之一，从事稳转细胞株筛选已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业稳转细胞株筛选技术服务，您可以搜索更多相关的稳转细胞株筛选实验技术服务，以便挑选到性价比高，合适的稳转细胞株筛选产品。而生物在线将会为您在稳转细胞株筛选方面提供全方位的解决方案。 查看更多
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2021-09-09
上海钰博生物科技有限公司在发布的TLR4 Stable Cell Line、TLR4 稳转细胞株、TLR4 Stably Transfected HEK 293 Cells、TLR4 稳转HEK 293细胞株供应信息，浏览与TLR4 Stable Cell Line、TLR4 稳转细胞株、TLR4 Stably Transfected HEK 293 Cells、TLR4 稳转HEK 293细胞株相关的产品或在搜索更多与TLR4 Stable Cell Line、TLR4 稳转细胞株、TLR4 Stabl 查看更多
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2021-08-10
海拉细胞系是源自一位美国黑人妇女海瑞塔‧拉克斯（Henrietta Lacks）的宫颈癌细胞的细胞系。一位外科医生从她的肿瘤上取下组织样本，并在实验室中进行培养，至今仍被不间断的培养。这名美国妇女在1951年死于该癌症。 不同于其他一般的人类细胞，此细胞株不会衰老致死，并可以无限分裂下去。此... 查看更多
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2021-09-21
★服务描述 shRNA稳转株是指能持续稳定表达干扰特定基因shRNA的细胞。RNA干扰是基因功能研究中最常用的手段之一。我公司利用慢病毒将shRNA序列整合入细胞基因组，并通过慢病毒载体携带的抗性基因（通常为新霉素，嘌呤霉素，潮霉素）筛选出稳定转染shRNA的细胞，使其成为shRNA稳定转染细胞系。★服务内容 1：shRNA干扰靶点序列的设计； 2：shRNA 慢病毒质粒的构建； 3：shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定； 4... 查看更多
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实验原理 稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。 瞬时转染/感染的特点：外源DNA不整合到宿主的染色体中，一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数，产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天)；外源基因的表达水平不... 查看更多
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2021-08-31
PREPARING CELLSBring up HUVEC and fibroblasts in M199/10% FBS/Pen-Strep (1:100) 1-2 days before beading. Switch medium to EGM-2 (Clonetics) the day before bead 查看更多
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2021-06-03
慢病毒/稳转株酷爽套餐！----锐赛生物夏日活动 来源：上海锐赛生物技术有限公司2013-7-1 访问量：2688评论(0)标签： R&S/锐赛生物 慢病毒 稳转株 构建 细胞 上海锐赛夏季慢病毒-稳转株酷爽套餐！活动期间，将同一基因的干扰慢病毒包装与稳转株构建同时委托给锐赛生物，即可享受6.7折的稳转株酷爽套餐，预期完成时间可缩短至9周。 ... 查看更多
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2021-07-31
提供商：无锡菩禾生物医药技术有限公司 查看更多
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2021-07-19
简介： 【HEL细胞】，细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师们提供放心科研细胞。具体详情请致电咨询：4000-520-616详细说明： 【HEL细胞】产品特点：细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后， 查看更多
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2021-09-10
上海麒盟生物科技有限公司在发布的基因敲减慢病毒稳转细胞株 (LentiKD-Stable)供应信息，浏览与基因敲减慢病毒稳转细胞株 (LentiKD-Stable)相关的产品或在搜索更多与基因敲减慢病毒稳转细胞株 (LentiKD-Stable)相关的内容。 查看更多
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2021-07-28
沃登医学在发布的稳转细胞株构建供应信息，浏览与稳转细胞株构建相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建相关的内容。 查看更多
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2021-07-17
简介：【HeLa/DDP 拜力细胞】，细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师们提供放心科研细胞。详细说明： 【HeLa/DDP 拜力细胞】产品特点：【HeLa/DDP 拜力细胞】，细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞 查看更多
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利用慢病毒载体快速建立表达外源基因的哺乳动物细胞系【论文分享...123
zhiyun_10892017-10-02
真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体，在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。 腺病毒载体携带外源基因较大，可瞬时高表达。 慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法
6.获得稳转株
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法
6.获得稳转株
siRNA干扰常见问题123
有恃无恐03502021-07-31
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
【求助】逆转录病毒载体不带GFP,如何进行构建稳转细胞株?谢谢 ...123
drjasionzl2012-12-11
把质粒转入细胞的方法步骤是什么啊请教一下_问答详情_细胞转染_...123
泽田27丶TA傹2017-10-02
要看你是什么细胞，是想过表达还是knock down一个基因，稳转还是瞬转。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
[求助]转染带有GFP的目的基因载体后,观察不到荧光 经验共享...123
寞比sln2021-08-20
之前转染了带GFP的质粒，冻存估计有半年了拿来复苏，想做后续实验，结果稳转的细胞荧光少还很弱，请问怎么办？急急急！
Semak MU9776 status penerbangan & tiket penerbangan trip.com123
一戦成神marsking2021-08-09
最近因工作需要，欲购进一些生产用的细胞株和瞬转、稳转质粒，大家有什么推荐的品系和公司或网站，谢谢！！！
主要需求：
1.生产或生物制药用的，稳定细胞株如CHO-K1、GS和HEK293/HEK293T，以及与之对应的瞬转、稳转（重组整合）质粒（需详细图谱）。
2.原始或改造细胞株，以及对应质粒，改造细胞株请详述细节，原因，优缺点，安全性等。
3.希望大家积极推荐，实验用、生产用均可，原核、真核都行，网站或品系名称也行，只要大家觉得常用、稳定、安全、高产就行。
4.请有意向的同仁回帖或将详细资料发至我163邮箱：wangqiang23mars@163.com，万分感谢。
行阶梯形矩阵_123
zf30272021-08-07
如题，我用PIRES2-EGFP（带/不带目的基因）转染HCT-116，G418筛选，筛选浓度为800µg/ml,两周后发现克隆要么不带荧光，要么荧光很淡，几乎看不出细胞的轮廓，估计挑出来也没用，请问这是什么原因，我下一步该怎么办？
转染细胞的稳定筛选 实验方法123
流年ノ01072017-10-02
基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选123
饼饼4912021-07-26
稳定细胞株筛选是一个长期的过程，稳定细胞株筛选优化，有许多条件需要摸索，而且是从源头开始①在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证②高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白表达量③细胞的选择，筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO，中国仓鼠细胞，由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株，而HEK293细胞则常用于瞬时转染④后期的筛选，双抗预防污染，筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验，而且转染的时候不能有抗生素，关于细胞转染稳定细胞系构建的相关理论
四种转染试剂对H9C2细胞转染效率的比较 道客巴巴123
银妈E07GG2021-07-21
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做，操作是否稳定。
然后你得确定，这个细胞株对于你得研究来说不可或缺，具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话，祝你顺利。
然后你得确定，这个细胞株对于你得研究来说不可或缺，具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话，祝你顺利。
如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术? 实验方法123
xsssaber3112017-10-02
可以，除了单靶点外，该技术也可以进行多靶点基因敲除。
稳定细胞株筛选123
流苏紫光2021-07-22
转染人MGC803细胞，用嘌呤霉素筛选，已经筛选几个月了，每次都失败告终，时间有限，是在是着急。各位大神，有人做稳转的求指导。**！
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