In an effort to produce a totally defined nutritinal source for cells, Morgan, Morton, and Parker, in 1950, developed what has become known as Medium 199. It was found that the growth of explanted tissue could be measured in Medium 199. However, long-term cultivation of cells required serum supplement. Currently, it is widely used in virology and vaccine production. It is also used in the culture of many non-transformed cells.
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National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2003. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria thatgrow aerobically,5th ed. A
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Culturing Chick Embryonic Cardiac Myocytes and Fibroblasts1. Culture medium: F12K without glutamine, 3% FCS, 100 units/ml, 100 ug/ml streptomycin (myocyte medi
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Analysis of ES Cell Clones by Mini-SouthernInitial Cloning1.Aspirate selective media off the plates containing colonies of interest. Wash the plates twice wit
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Media and Solutions Required for Routine ES Cell Culture: Version 1 (PMCI) Media and Solutions Required for Routine ES Cell Culture: Version 2 (PMCI) Media for
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What you need: E11-12 mouse embryos DMEM with 5% fetal bovine serum petri dishes for dissections and washes Tyrode-Ringer"s solution, pH 7.6-7.7 (recipe below)
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Irvine欧文ISCOVE'S MODIFIED DULBECCO'S MEDIUM -LIQ【9032】代理商
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Preparation of Broth and Plates, etc.[Use ddH2O 17 m* or better ]1) LB Broth Make 16 gm of LB Broth Base (Gibco #M27800C) up to 800 ml in ddH2O. Swirl to disso
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<IMGsrc="dxy_expriment/201812/pdf.gif"border=0><Ahref="http://cach
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This document assumes that you have a mouse IgG monoclonal antibody directed to the antigen you wish to quantitate and that you have fluorescein labeled and fu
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传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。传代培养中的细胞传代培养(subculture),当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接...
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Cell are normally passaged every 2-3 days, this is important to avoid differentiation.Signs of differentiation are:-i) colonies are surrounded by flattened dif
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Instech Laboratories, Inc.公司介绍【代理商整理】
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培养基种类繁多,根据其成分、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。
(一)按成分不同划分
1、天然 培养基 (complex medium) 这类培养基含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物,也称非化学限定培养基(chemically undefined medium)。牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。基因克隆技术中常用的LB(Luria—Bertani)培养基也是一种天然培养基,其组成见表5.9。
牛肉浸膏、蛋白胨及酵母浸膏的来源及主要成分
营养物质 牛肉浸膏
来 源 瘦牛肉组织浸出汁浓缩而成的膏状物质
主要成分 富含水溶性糖类、有机氮化合物、维生素、盐等
营养物质 蛋白胨
来 源 将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成
主要成分 富含有机氮化合物、也含有一些维生素和糖类的粉末状物质
营养物质 酵母浸膏
来 源 酵母细胞的水溶性提取物浓缩而成的膏状物质
主要成分 富含B类维生素,也含有有机氮化合物和糖类
常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表5.10)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡萝卜汁、椰子汁等,嗜粪微生物(coprophilous microorganisms)可以利用粪水作为营养物质。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。
2、合成培养基(synthic medium)是由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基,也称化学限定培养基(chemically defined medium),高氏I号培养基和查氏培养基就属于此种类型。配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微 生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。
(二)根据物理状态划分
根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少,可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。
1、固体培养基(so1id medium)
在液体培养基中加入一定量凝固剂,使其成为固体状态即为固体培养基。理想的凝固剂应具备以下条件:①不被所培养的微生物分解利用;②在微生物生长的温度范围内保持固体状态,在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;③凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;⑤凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;⑥透明度好,粘着力强;⑦配制方便且价格低廉。常用的凝固剂有琼脂(agar)、明胶(gelatain)和硅胶(silica gel)。表5.11列出琼脂和明胶的一些主要特征。
对绝大多数微生物而言,琼脂是最理想的凝固剂,琼脂是由藻类(海产石花菜)中提取的一种高度分支的复杂多糖;明胶是由胶原蛋白制备得到的产物,是最早用来作为凝固剂的物质,但由于其凝固点太低,而且某些细菌和许多真菌产生的非特异性胞外蛋白酶以及梭菌产生的特异性胶原酶都能液化明胶,目前已较少作为凝固剂;硅胶是由无机的硅酸钠(Na2SO3)及硅酸钾(K2SiO3)被盐酸及硫酸中和时凝聚而成的胶体,它不含有机物,适合配制分离与培养自养型微生物的培养基。
这个东西长在细胞上层,与细胞不接触,也不影响细胞生长,就是不知道是什么?急,在线等
现在细胞有点少,想大批量的做实验
如果我把10%血清的培养基换成15%的,细胞会不会长的快一点?我的是H9C2细胞。谢谢
请问刚配制的DMEMF12
培养基是什么颜色?桃红还是橙红?我配制的是这个颜色,正常吗?
HT培养基是在用于杂交瘤细胞培养的培养基中加入添加剂HT(HT Supplement),HT是次磺嘌呤(Hypoxanthine,10mmol/L)和胸腺嘧啶核苷(Thymidine,1.6mmol/L)的混合剂,溶解后用培养液稀释,作为DNA补救合成途径的补充剂用于杂交瘤筛选培养基的添加剂和营养添加剂以克服细胞内残留氨基喋呤(Aminopterin)对DNA经典合成途径的抑制作用。
HT培养基添加剂(HT Supplement)为粉剂,经照射灭菌。每个包装可配制成10ml浓缩液(50X),用于杂交瘤细胞的筛选。
本人是实验室新手,最近在做一个实验,是观察黄芩汤对细菌生长的影响,想要用固体
培养基做加药实验。想请叫一下,含黄芩汤的固体培养基怎么制备?谢谢各位大神!
大家好,我是一个质粒小菜鸟,最近遇到个奇怪的事情,希望大家帮忙看看,究竟出了什么问题。
我构建了一个氨苄抗性的质粒,这个质粒在固体培养基里长出了单菌落,但是我挑菌在液体培养基里无法扩增出来。固体培养基和液体培养基一起配置的,氨苄浓度一致,唯一不同的是固体培养基里加入了琼脂。为了防止是氨苄的问题,我把这个固体培养基上的菌落挑划了新的板,依然能长出菌落。而同一次配置的液体培养基,也能扩增其他质粒,所以我实在想不出是什么其他问题,希望大家帮帮忙。
各位老师,细胞新手向大家请教一个问题:我做氧化损伤的细胞模型,培养基使用的就是普通的DMEM完全培养基,样品时合成的多肽,有2条多肽在使用培养基溶解时,培养基从原来的红色变成偏黄色了,除此之外没有浑浊和其他异常现象产生,请教一下是什么原因呢?会不会对实验结果造成影响?
各位大神你们好:
我们是医疗器械工厂,只需配制环境监测和水检测的培养基,但是根据2015版药典规定,1105,141页有一句
而在9203,289页
“商品化的成品培养基除了应附有处方和使用说明外,还应注明有效期、贮藏条件、适用性检查试验的质控菌和用途”。
是否可以理解为只要供应商提供以上信息,使用厂家就可以不用做培养基适用性试验了?
如果购买的商品化的成品培养基不做培养基适用性试验,那么医疗器械的微生物检验将大大减少工作量了。
SD培养基:(Synthetic Dropout Medium)
用于酵母繁殖和筛选的培养基
SD是含有盐类、微量元素、维生素、氮源(不含氨基酸的酵母氮碱)和葡萄糖的合成基本培养基。
注意:氮源(不含氨基酸的酵母氮碱)是这种培养基用于筛选的关键,LB,YPD这种复合培养基因为用到了酵母提取物,蛋白胨,基本是氮源全营养的,肯定是不能用来做氮源筛选的
请教大家一个问题。培养基成分很复杂,经过纯化后培养基中的某些成分还可能残留在制品中可能造成安全隐患。药典重组蛋白制品总论也要求纯化工艺能将培养基残留降至可接受标准。现在的问题是如何评价纯化工艺对培养基残留的去除能力?由于培养基成分很复杂,应该检测哪些成分呢?
希望大家能说说各自的见解,谢谢!