Cellsinculturerequireasourceofnutrition,typicallyprovidedbycellculturemedia.Themajorityofthesemediarequiretheadditionofanimalserumforcellstoobtainthepropernutrientstogrowadequately.Serumisanimportantsourceofproteins,lipids,vitamins,aminoacids,salts,minerals,attachmentfactors,growthfactors,hormones,andothercomponentsessentialforcellgrowth.
Bovinecalfserum(BCS,CalfSerum)isobtainedfromhealthy,inspectedcalves20days to12monthsofage.AlthoughBovineCalfSerumhasalowernutritionalvaluethanFetalBovineSerumorNewbornBovineCalfSerum,itcanbeusedforavarietyoflessdemandingcelllines.
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各位大神，本人实验室小白一枚，现在要保存乙肝病人的血清，以后用来做实验感染细胞。为了最大限度保持病毒的感染活力，应该怎么保存呢？直接-80度冷冻可以吗？需要加甘油吗？
前段时间有个同学因为细胞状态不好，培养基里有小黑点，怀疑是支原体污染。于是检测了一下，果真是的，就买了支原体清除剂。别说效果还真好，3天后细胞状态就好了。
既然细胞状态好了，就停用了，没想到一停用，细胞状态就又差了。把培养箱、细胞房都清理一遍还是不行，就问到了我，既然这些因素都排除了，最后只有一个可能了，刚买的Gibco的胎牛血清，本来心里还想，同学实验室真是土豪啊，我就问了价格，南美胎牛1500……澳州胎牛血清3000……，简直惊讶到了，现在Gibco的血清简直是一货难求，澳州胎牛血清已经炒到了8000+了。
就断定这个血清肯定是假的，用检测试剂盒检测了一下，果然是这个问题，假血清真是害人啊，这些无良奸商……由于支原体比较小，滤器过滤不掉，所以大家买血清的时候一定要先试用，检测一下支原体（现在好多大牌子都会有支原体检测报告）
这里来分享一下支原体检测方法：
1，PCR检测法。
2支原体检测跑胶图-20084539882.jpg
这个Primers是依据支原体基因组中高度保守的16SrRNA编码域而设计的，只需简单的PCR反应就可检测M.Arginini,M.Fermentans,M.Hyorhinis,M.Orale,M.Salivarium,M.Hominis,M.Pneumonia等常见的支原体。
2，DNA萤光染色法
利用萤光染剂（bisbenzimide,Hoechst33258）侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich区域，因为支原体之DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后，在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点，即为支原体之DNA，证明有支原体之污染。
Cell+细胞卫士__MycoTestKit(支原体检测试剂盒)：
支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。
MycoTestKit是利用降落聚合酶链式反应技术（TD-PCR）对支原体16SrRNA基因高度保守区域特异性片段进行扩增检测。该方法灵敏度高，特异性强，可用于各种生物材料（如细胞培养基、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。
Cell+细胞卫士__NocardTreatment(支原体清除剂)：
（1）推荐NocardTreatment的稀释比例为1:1000，例如：1mL培养基加入1μL的NocardTreatment；
（2）弃去旧的培养基，用PBS将细胞清洗干净，再加入新鲜的含有NocardTreatment的培养基，1天1次，连续处理3-6天。
本人科研小白，研究新生！
课题准备检测血清中骨桥蛋白（OPN）含量
现在计划是先将所有血标本离心取血清先冻存，待所有标本收集齐后再统一做
大概要收集2个月，约70个病例。
现在我的问题就是：1、离心后的血清，如何分装、冻存？（具体条件、流程、用什么管子冻存，是否需要买冻存液等）
2、冻存后如何复苏？（最好有具体流程，具体复苏条件，是否需要买什么复苏液、培养基什么的）
刚来读书，一下子拿到这个题目有点懵，网上搜了一些，比较杂，比较乱，没有底，想请教各位哥哥姐姐给我提供点帮助，先谢谢了！
谁的答案详细、真实分就给谁...(勿灌水，否则必究之)
本人做动物实验，每组设7只，需要测定小鼠的相关指标，初次接触有几点不明白
1、测定指标时，是否可以每组7只，每只测定一次，一共测定7次？
2、是否可以每组选择3只，每只测定一次，共3次？
3、是否可以每组选择3只，每只自身平行测定3次，共9次？
4、测定指标时，是否可以前3只鼠测定A指标，后4只鼠测定B指标吗？
请问1、2、3中的三个方法哪种方法是否具有可行性？4中的测定方法是否可以？
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