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(a)准备2个15cm培养皿,加人25ml预热的CCM。
(b)从液氮罐中取出所需的冻存管。将冻存管放人37℃水浴箱中解冻。此步骤需小心操作,戴好面罩。因为储存时出现问题,解冻的冻存管可能爆裂。
(c)细胞悬液融化后,取450μL加人每个培养皿中,在37℃,5%C02培养箱中至少培养18h。
(d)第二天,用30ml预热的PBSA润洗细胞,然后加人30ml预热的CCM。
(e)进行传代处理