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Cardolite企业机构组织图 The Official Board
来自 : mayitao
货号:CELLBANKER/2
供应商:ZENOAQ
寰宇安泰生物(Uante)提供干细胞冻存液
GMP等级干细胞冻存液STEM-CELLBANKER
 GMPGrade
特征:
STEM-CELLBANKER® GMPgrade是ZENOAQ公司针对冻存各类贵重的干细胞(胚胎干细胞、诱导多能干细胞、间充质干细胞等)而特别配制,完全按照GoodManufacturePractice(GMP)规范进行生产和质量管理的细胞・组织冻存液。
  • 有效提高各类干细胞的复苏存活率,而不影响其染色体组形、增殖能力和分化能力。
  • 不会对冻存细胞的DNA或RNA造成损伤,能用来冻存组织。
  • 完全使用日/美/欧药典等最高等级原料,所含成分明确。
  • 不含异源动物成分(Xeno-free)。
  • 完全配方的冻存液,无需调配即可使用。可直接存放于负80度冰箱(不须程序降温),省事省力省时间。
  • 本产品已取得美国FDA和日本PMDA的DrugMasterFile(DMF)登记号。
  • 本产品已经上市。
规格包装:
20ml,100ml/瓶
 
产品应用实例:

1.使用STEM-CELLBANKER®对人体胚胎干细胞(hESC)和诱导多能(iPS)干细胞进行实际冻存测试。

资料来源:瑞典卡罗林斯卡医学院附属医院妇产科临床科学部OutiHovatta教授

测试冻存液:STEM-CELLBANKER®冻存液vs常规细胞冻存液(细胞培养基+10%DMSO+血清代替品)
细胞存活率评估方法:TrypanBlue和Live/Deadassaykit试剂盒

結果:在没有对细胞的染色体组形、增殖能力和分化能力造成影响的情况下,STEM-CELLBANKER®冻存液明显提高了HS293、HS306和ChiPSA细胞的存活率。上图显示STEM-CELLBANKER®冻存细胞的复苏存活率获得明显提高。下图显示各复苏细胞的增殖能。

*鸣谢OutiHovatta教授和FridaHolm女士提供以上资料

2.使用STEM-CELLBANKER®对人体间质干细胞(HumanMesenchymalStemCells)和血管内皮前体细胞(EndothelialProgenitorCells)进行实际冻存测试。

筑波大学再生医疗讲座 大根田修教授提供

 MSCsEPCs
STEM-CELLBANKER®>95%>90%

细胞株:人体脐带血来源间质干细胞(MSCs)和血管内皮前体细胞(EPCs)
测试冻存液:STEM-CELLBANKER®细胞冻存液
细胞冻存方法:冻存细胞于-80度冰箱,3日后移至-192度液氮管,冻存72日后复苏。.
细胞存活率评估方法:TrypanBlue

测试结果:MSCs和EPCs的存活率分别高达95% 和 90%以上。结果也显示STEM-CELLBANKER®细胞冻存液没有对干细胞的增殖和分化能力造成影响。

欲知详细内容,请参考 MSCs 或 EPCs

*鸣谢 大根田修(OhnedaOsamu)教授和长野真澄(NaganoMasumi)博士提供以上资料

3.使用STEM-CELLBANKER®对小鼠胚胎干细胞(129SV)进行实际冻存测试。

ZENOAQ研究所 细胞工学组

细胞株:129SV(MouseEScell) 
测试冻存液:ZENOAQ产品(CELLBANKER® 1,1plus,2和STEM-CELLBANKER®

使用手册(适用于CELLBANKER®系列各产品):

细胞冷冻保存方法

选择冻存处于对数生长数的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

  1. 按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
  2. 按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。
    (参考:5×105至5×106cells/ml)。
  3. 取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000rpm,4°C,3至5分)。移去离心管中的上清液。
  4. 加入适量的CELLBANKER® 细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀,制成细胞混合液。
  5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
  6. 直接将含细胞混合液的冻存管放入-80°C冰箱,长期冷冻保存。
  7. 若研究者需要液氮保存时,可将完全冻结的冻存管(放入-80°C冰箱后至少一昼夜)移至-196°C液氮罐
细胞数仅作为参考数据,依据各自目的可有不同

Procedure for Use

冻存细胞复苏方法
  1. 从冰箱里取出细胞冷冻保存管,立即放入37°C振动水浴槽中快速解冻。
  2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合,再将细胞混合液从冻存管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中,混合均匀。
  3. 离心收集培养细胞((参考离心条件:1,000~2,000rpm,4°C,3至5分),移去上清液。
  4. 清洗细胞,充分洗净残留冻存液。
  5. 加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后,将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。
  6. 精检后,研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。

4.使用STEM-CELLBANKER®对小鼠正常肾脏组织进行冻存测试

资料来源:ZENOAQ中央研究所

STEM-CELLBANKER® →-80℃
HE染色標本Caspase3免疫染色標本
取材后立刻以福尔马林固定
HE染色標本Caspase3免疫染色標本

从小鼠取出5mm3大小的肾脏组织,投入1ml的STEM-CELLBANKER®冻存液后直接放置于负80度冰箱进行冻结。之后,对经解冻、清洗、福尔马林固定和石蜡包埋的组织块进行HE染色和Caspase3染色。组织学检查结果发现,与未经冻结的组织状态(对照)相比,STEM-CELLBANKER®冻存组织块没有受到明显的损伤,证明STEM-CELLBANKER®能够应用于冻结组织块。此外,Caspase3染色结果呈阴性反応,表示没有细胞凋亡发生。

5.利用微阵列芯片(Microarray)对STEM-CELLBANKER®冻存细胞展开基因表达分析

从未经冻存的培养细胞和经STEM-CELLBANKER®冻存的细胞抽出totalRNA,以微阵列解析进行遗传基因的平行对比分析。结果发现两组细胞的大多数基因之间的表达变化小于1.6倍。

测试细胞:小鼠肺纤维芽细胞

参考文献

  • Shimazuetal.(2015)Serum-andxeno-freecryopreservationofhumanumbilicalcordtissueasmesenchymalstromalcellsource.Cytotherapy,2015;17:593-600.
  • NakagawaMetal.(2014)Anovelefficientfeeder-freeculturesystemforthederivationofhumaninducedpluripotentstemcells.ScientificReports4Article,number:359.
  • MiyamotoYetal.(2012)CryopreservationofInducedPluripotentStemCells.CellMedicine.,Vol.3,pp.89-95,2012.
  • SaliemMetal.(2012)Improvedcryopreservationofhumanhepatocytesusinganewxenofreecryoprotectantsolution.WorldJHepatol.May27;4(5):176-83.
  • Holmetal.(2010)Aneffectiveserum-andxeno-freechemicallydefinedfreezingprocedureforhumanembryonicandinducedpluripotentstemcells.HumReprod.25(5):1271-9.Epub2010Mar5.
  • NakamuraAetal.(2010)Humanprimaryculturedhepaticstellatecellscanbecryopreserved.MedMolMorphol.43:107-115.
产品成分说明:
限定化学成分细胞冻存液,含有DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分、pH调节剂等国际药典[美、欧、日本药方局级]成分。
储存方法
储存于4度以下。质量保障期从产品的生产日期起算,为期3年。3个月以上没有使用CELLBANKER®冻存液的计划时,尽可能冷冻保存。为避免重复冻结-解冻过程可能导致的CELLBANKER®品质下降和性能降低,推荐将100mL产品分装小瓶后,再存放于4°C以下或-20°C冰箱冻存。
质量保障承诺
  1. STEM-CELLBANKER® GMPgrade细胞冻存液经过严格内毒素、pH、渗透压和微生物检查,确保产品不含细菌、霉菌以及支原体。
  2. 使用小鼠胚胎干细胞(MouseESCells)、Jurkat 和SK-007细胞验证性能测试冻存细保存活率达80%以上.

 

注意事项
  1. CELLBANKER®系列产品只供实验室研究使用,是试剂级产品。
  2. 我们推荐用户在使用本产品之前,事先对所使用的细胞进行至少为期1周的
    试验性细胞冷冻保存培养。确认性能后再进行正式冻存。
  3. 免责声明:本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。
温馨提示:不可用于临床治疗。
寰宇安泰生物(Uante)
    重庆市寰宇安泰生物科技有限公司【ChongqingUanteBiologicalTechnologyCo.,Ltd.】专注于生命科学科研试剂、耗材、仪器仪表等销售与科研技术服务。主营产品覆盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物制药、诊断试剂研发、干细胞研究、美容抗衰等众多领域。代理或经销数十家知名品牌产品,诸如:SarePro、GEB、PALL、Sigma、ThermoFisher、Lonza、StemCell、CST、Biolegend、BD等。将为广大科研用户在生命科学研究领域,提供高品质科研产品服务。公司秉承“诚信为本、服务至上”的管理理念,在未来的工作中,不断努力,奋发进取,力争成为您的科研物资战略合作优选伙伴!为生命科学领域的一线工作者提供最强有力的基础与支撑。
温馨提示:不可用于临床治疗。
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