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Cellagentech/SB203580 | p38 MAPK inhibitor/C7320-5/5 mg (powder)
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Cellagentech/SB203580 | p38 MAPK inhibitor/C7320-5/5 mg (powder)
品牌 / 
Cellagen
货号 / 
C7320-5
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ProductDescription

SB203580isapyridinylimidazole-basedinhibitorofp38-MAPKatanIC50of0.3-0.5uM.[1]ItalsoinhibitsPKBphosphorylationatanIC50of3-5uMandblocksthekeycellcycleeventofretinoblastomaproteinphosphorylationinIL-2-stimulatedT-cells.SB203580wasfoundtoinhibittheactivationofp70S6K,butatalocationdownstreamofPI3K.[1]

Independentstudiesindicateatconcentrationsof10uM,SB203580activatesphosphorylationofERK1/2andJNK,whichinturnmayactivategenetranscriptionregulatedbyNF-kB.[2]Similarly,SB203580wasshowntostimulatethephosphorylationandactivationofcPLA2,CAMKIIaandarachidonicacidrelease.[3]

InanL1210mouseleukemiccelllineresistanttovincristine,SB203580isbelievedtoplayaroleinthereversalofPgp-mediatedmultidrugresistance.[4]


Technicalinformation:

ChemicalFormula: C21H16FN3OS
CAS#: 152121-47-6
MolecularWeight: 377.43
Purity: >98%
Appearance: White
ChemicalName: 4-(4-(4-fluorophenyl)-2-(4-(methylsulfinyl)phenyl)-1H-imidazol-5-yl)pyridine
Solubility: Upto100mMinDMSO
Synonyms: SB-203580,SB203580,SB203580

ShippingCondition:Theproductisshippedinaglassvialatambienttemperature.
Storagecondition:Forlongershelflife,storesolidpowderat4oCdesiccated,orstoreDMSOsolutionat-20oC.


Reference:

1.Lalietal.,ThepyridinylimidazoleinhibitorSB203580blocksphosphoinositide-dependentproteinkinaseactivity,proteinkinaseBphosphorylation,andretinoblastomahyperphosphorylationininterleukin-2-stimulatedTcellsindependentlyofp38mitogen-activatedproteinkinase.J.Biol.Chem.2000,275(10),7395-7402.PubmedID:10702313
2.Birkenkampetal.,Thep38MAPkinaseinhibitorSB203580enhancesnuclearfactor-kappaBtranscriptionalactivitybyanon-specificeffectupontheERKpathway.Br.J.Pharmacol.2000,131,99-107.PubmedID:10960075
3.Fatimaetal.,CytosolicphospholipaseA2activationbythep38kinaseinhibitorSB203580inrabbitaorticsmoothmusclecells.J.Pharmacol.Exp.Ther.2001,298(1),331-338.PubmedID:11408559
4.Baranciketal.,SB203580,aspecificinhibitorofp38-MAPKpathway,isanewreversalagentofP-glycoprotein-mediatedmultidrugresistance.Eur.J.Pharmaceut.Sci.2001,14,29-36.PubmedID:10960075

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动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。... 查看更多>
留置导尿管引起的膀胱刺激症(Catheter-related bladder discomfort CRBD)可引起许多患者术后不适,导尿管相关的膀胱刺激症与毒蕈碱受体的激活密不可分。一些吸入性麻醉药物,如七氟烷和地氟烷,对毒蕈碱受体具有不同程度的抑制作用。关于其抑制程度的研究目前较少,因而来自韩国的 Kim 教授等人就对术中使用两种药物对于减少导尿管相关的膀胱刺激症的作用进行了比较,其结 查看更多>
1.机械刮除法:是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝)、或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为:(1)标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位;(2)刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸 查看更多>
mTn-lacZ/LEU2 TRTn3 terminal inverted repeatslacZ5"-truncated lacZ gene encoding beta-galactosidaseLEU2LEU2 gene from S. cerevisiaeampEncodes beta-lactamaselox 查看更多>
Horvath and Riezman, Yeast, 1994; Gottschling LabSample Buffer: 10 ml0.06M Tris-HCl, pH 6.80.6 ml 1M Tris 6.810% (v/v) glycerol2 ml 50% glycerol2% (w/v) SDS2 m 查看更多>
ObjectiveThe purpose of this experiment is to determine the effects of calcium-free seawater on the development of sea urchin embryos. Embryos were placed in c 查看更多>
百时美施贵宝与 Five Prime 达成一项全球许可及合作协议,两家公司要联手开发与商业化 Five Prime 的集落刺激因子 1 受体(CSF1R)抗体项目,其中包括 FPA008,这款抗体正在 1 期开发中用于免疫及肿瘤适应症。这一协议替代了两家公司现有的评价 Opdivo(nivolumab)与 FPA008 合并用于 6 种肿瘤安全性、耐受性及初步疗效的合作协议。「对于我们研发线中的 T 细胞定向抗体及协同刺激分 查看更多>
2021-08-31
骨骼肌细胞培养1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,常 查看更多>
The Effects of NiCl2on Spicule FormationJessica Ann Billet, Franklin and Marshall, Class of 2000Background and ObjectiveSea urchins exhibit radial holoblastic 查看更多>
一、流式细胞术发展简史   流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义; 查看更多>
ObjectiveTo observe the role sulfate plays in sea urchin gastrulation, and to replicate the findings of Karp and Solursh, that sea urchin embryos fail to gastr 查看更多>
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Pyrroloquinolinequinonepreventstestosterone&nbs...

ajtr0009-1230.pdf(2384.3k)
如题目,想知道这个细胞是什么细胞~
检测原理:该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析,该反应是一个竞争免疫反应,即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素(streptavidin)与抗体的复合物紧密结合产生的。

当抗体结合到示踪剂上时,340nm的激发光激发铕标分子,导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上,结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体,激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低,而拮抗剂则可以逆转这一效应;对于偶联Gαi的受体,在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生,那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成,因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高,室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
2.保存条件
避光2~4℃保存,过期时间见装。
3.盒内试剂
cAMP标准品:1管,1ml。(50μM)
生物素标记的cAMP(b-cAMP):1管,25μl。
铕标的抗生物素蛋白链菌素:1管,25μl。
荧光标记的cAMP抗体:1管,40μl。
检测缓冲液:1瓶,25ml。
4.需要自配的其他溶液
l Hank’s balanced salt solution (HBSS): NaCl 8.0g、CaCl2 0.14g、KCl 0.4g、 KH2PO4 0.06g、Na2HPO4?7H2O0.09g、MgCl2.6H2O0.10 g、MgSO4.7H2O0.10 g、NaHCO30.35g、葡萄糖1.0g,加H2O至 1000ml (用7.5%NaHCO调节PH值=7.4)
l Versene消化液(1L):EDTA 0.372 g,NaCl 8.0g,KCl 0.20 g,KH2PO40.20g,Na2HPO4 1.15 g,D-glucouse 0.2 g,pH 7.4
l HEPES缓冲液(1mol/L):取2.383gHEPES溶于10ml去离子水中。
l 7.5%BSA溶液:取0.75gBSA溶于10ml去离子水中
l 0.5M IBMX溶液:11.11mg IBMX溶于100μl DMSO中,-20℃冻存。
l 刺激缓冲液(SB):14 ml HBSS(1×)+75μlHEPES(1mol/L)+200μlBSA (7.5%)。(注:在测定细胞cAMP时,反应缓冲液中要加入IBMX 0.5mmol/L)
l 吗啡贮存液(10mM):盐酸吗啡37.585mg溶于10ml生理盐水中,0.22μm滤膜过滤除菌,4℃保存备用。
l 纳络酮母液(100mM):纳络酮4mg溶于100μl 生理盐水中,用时工作液按照1:500稀释,溶剂为含有IBMX的反应缓冲液。
1,4-二氯苯 , 分子式 C6H4Cl2。 白色结晶,有樟脑气味 。 用于有机合成,用作杀虫剂、防腐剂、分析试剂 。对眼和上呼吸道有刺激性。对中枢神经有抑制作用,致肝、肾损害。
绝对有影响,我们血液科很多白血病都是从事过化工的。很多化学试剂严重抑制骨髓增生,影响血小板生成。
FRAP,ABTS以及ORAC法等等; FRAP:即"亚铁还原能力实验",一种在低pH条件下,利用亚铁离子与TPTZ生成蓝紫色复合物来测量样品抗氧化能力的实验,广泛运用于食品与保健品的抗氧化能力分析;
抗生物素蛋白链菌素 为什么用这个标记
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析,该反应是一个竞争免疫反应,即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素(streptavidin)与抗体的复合物紧密结合产生的。

当抗体结合到示踪剂上时,340nm的激发光激发铕标分子,导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上,结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。

本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体,激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低,而拮抗剂则可以逆转这一效应;对于偶联Gαi的受体,在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生,那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成,因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。

该试剂盒的灵敏度很高,室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。

抑制剂刺激细胞后,需要用PBS清洗后再做后续实验吗

http://www.medscape.com/viewarticle/755763?src=rss

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MaggotsFasterThanScalpelinWoundDebridement

December19,2011—Maggotdebridementtherapy(MDT)appearstobemoreeffectiveforwounddebridementcomparedwithconventionaltherapy,butonlyat1week;afterthattime,anothertypeofdressingshouldbeused,newresearchsuggests.

KristinaOpletalovà,MD,fromtheDepartmentofDermatology,UniversityofCaen,France,andcolleaguespublishedonlineDecember19intheArchivesofDermatology.

MedicalmaggotswereapprovedbytheUSFoodandDrugAdmiNISTrationasamedicaldeviceforwounddebridementin2004.Accordingtotheresearchers,useofmaggotsintreatingwoundsisassociatedwitheffectivewounddebridement,antibacterialeffects,andstimulationofwoundhealing.

However,theypointout,"[r]elativelyfewclinicalstudieshavebeenconductedandtheresultsarenotclear,partlyowingtomethodologicassessmentproblems."

InthecurrentProspective,randomizedcontrolled,phase3clinicaltrial,theresearcherssoughttodeterminetheefficacyofbaggedlarvaeonwounddebridementincomparisonwithconventionaltreatment.

TheprimaryobjectivewastocomparethemeanpercentageofsloughinwoundstreatedwithMDTwiththatofconventionaltreatmentatday15.Thestudyincluded119patientswithanonhealing,sloughywoundthatwas40cm2orsmallerandlessthan2cmdeep.Patientsalsohadananklebrachialindexof0.8orhigher.

Treatmentwasadministeredduringa2-weekhospitalstay.Conventionaltreatmentconsistedofsurgicaldebridement3timesaweekwithascalpel,withuseoftopicalanesthesia.TheMDTwasadministeredusinganencloseddressing(Vitapad,BioMondeLaboratories)containing80sterilemaggots.Atdischarge,aconventionaldressingwasapplied,andpatientswerefollowed-upatday30.

DebridementbyMDTwassignificantlyfasterthansurgicaldebridementduringthefirstweekoftreatment,reachingthesamelevelthecontrolgroupreachedatday15.NobenefitforMDTcomparedwithconventionaltreatmentinhealingrateswasobserved.Atday8,54.5%intheMDTgroupvs66.5%inthecontrolgroup(P=.04)hadevidenceofsloughandwoundhealing.However,byday15,themeanpercentageofsloughwas55.4%intheMDTgroupand53.8%inthecontrolgroup(P=.78).

"AthoughMDTshowsnosignificantbenefitatday15comparedwithconventionaltreatment,debridementbyMDTissignificantlyfasterandoccursduringthefirstweekoftreatment,"theresearchersconclude."Becausethereisnobenefitincontinuingthetreatmentafter1week,anothertypeofdressingshouldbeusedafter2or3applicationsofMDT."

Painscoresweresimilarandmildinbothgroups,althoughincontrasttoconventionaltreatment,MDTwasperformedwithouttopicalanesthesia.

Accordingtotheresearchers,noneofthepatientswerereticentaboutundergoingMDT."[A]crawlingsensationonthewoundwasrarelyandalmostequallynotedinbothgroups,revealingthatthesensationwassubjective,"Dr.Opletalovàandcolleaguespointout.

TwoquestionsregardingMDTremainunanswered,theauthorsnote."Candebridementbeimprovedusingmoremaggotsperdressing?Ifso,wouldthesedressingsbemorepainful?Furtherstudiesareneededtoanswerthesequestions."

ThestudywassupportedbygrantsfromtheClinicalResearchHospitalProgramandfromtheFrenchSocietyofDermatology.Theauthorshavedisclosednorelevantfinancialrelationships.
抑制素 123
腐姐控百合5852021-08-09
1.洗液:在100ml浓缩洗液中加入900ml去离子水稀释。室温密封情况下可保存1个月。
2.微孔板:选择实验所需的板条数。剩余不用的部分随同干燥剂密封放回原袋。 1.包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板(Anti-InhibinB-CoatedMicrotitrationStrips):96孔,2-8ºC下密封保存。
2.标准品A/样本稀释液(InhibinBStandardA/SampleDiluent):2ml×1瓶,胎牛血清,含0pg/mL二聚体抑制素B。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
3.标准品B-G(InhibinBStandardsB-G):1ml×6瓶,胎牛血清,含二聚体抑制素B的浓度为10,30,100,250,500,1000pg/mL。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
4.质控(InhibinBControls):1ml×2瓶,浓度I、II,胎牛血清,含低浓度和高浓度的抑制素A二聚体。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
5.样本稀释液A(InhibinBSampleBufferA):10ml×1瓶,2-8ºC下保存。
6.样本稀释液B(InhibinBSampleBufferB):10ml×1瓶,2-8ºC下保存。
7.抗体-生物素结合物(InhibinBAntibody-BiotinConjugate)(即用型):10ml×1瓶,含生物素标记的抗抑制素a亚单位抗体。2-8ºC下保存。
8.酶结合物(浓缩)(Streptavidin-EnzymeConjugate)(即用型):10ml×1瓶,含链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。2-8ºC下保存。
9.TMB底物溶液(TMBChromogenSolution):15ml×1瓶,2-8ºC下保存。
10.终止液(StoppingSolution):15ml×1瓶,为0.2M的硫酸。2-8ºC下保存。
11.浓缩洗液(WashConcentrate):100ml×1瓶,2-8ºC下保存。 操作前所有试剂都应平衡至室温(~25ºC)并充分混匀。标准品、质控及待测样本需同时做双份。
1.取出实验所需板条,并记录各孔位置。
2.在对应的孔中加入标准品、质控及待测样本各50ul。
3.每孔加入25ul样本稀释液A。
4.每孔加入25ul样本稀释液B。
5.封板,以300-400rpm速度震荡,室温下过夜(14-18小时)。
6.洗板3次,在吸水纸上拍干。
7.每孔加入50ul抗体-生物素结合物。
8.封板,以500-700rpm速度震荡,室温下孵育1.5小时。
9.洗板6次,在吸水纸上拍干。
10.每孔加入50ul链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。
11.封板,以500-700rpm速度震荡,室温下孵育20分钟。
12.洗板6次,洗完最后一次以后,将洗液在孔内停留15分钟再除去。在吸水纸上拍干。
13.在每孔中加入100ulTMB底物溶液。
14.以500-700rpm速度震荡,室温下避光孵育15-30分钟。
15.每孔加入100ul终止液。
16.30分钟内在450nm处读数。
注:必须以零标准作空白。如果能做到双波长测定,可在600或620nm处读数,将600(620)nm吸收值从450nm处减去,这样可以减少光学误差。 使用血清样本,静脉穿刺术采集血液。样本于2-8ºC可保存24小时,-20ºC或以下可保存30天。避免反复冻融样本。不应采用溶血或脂血的样本。冰冻的样本在实验前应解冻,并充分混匀。向左转|向右转
加黄糖或是果糖
需要提取总RNA以及分离mRNA的试剂盒,还有就是抑制消减杂交的试剂盒了,然后最后如果要做斑点杂交或者SOUTHERN BLOT,还需要一个试剂盒。