
ProductDescription
PIK93isaphenylthiazole-basedinhibitorofPI4KIIIb(IC50=19nM)usedtoevaluatetheroleofPI4-Kisoformsincalciumsignaling.[1]Ataconcentrationof300nMPIK93inhibitedthep110gisoformofPI3K(ClassI)wasinhibitedatIC50of16nM,whileweaklyinhibitingPI3K-C2a(IC50=16uM).[2]PIK93isselectiveforPI4KIIIboverPI4KIIIa(EC90=250nMandEC50>10uM,respectively)andisinactivetowardtypeIIPI4Ks.[3]PIK93wasalsoidentifiedasapotentanti-poliovirusandanti-HCVagent,withEC50sof0.14and1.9uM,respectively.[4]
Technicalinformation:
ChemicalFormula: | C14H16ClN3O4S2 | |
CAS#: | 593960-11-3 | |
MolecularWeight: | 389.88 | |
Purity: | >98% | |
Appearance: | White | |
ChemicalName: | N-[5-[4-Chloro-3-[(2-hydroxyethyl)sulfamoyl]phenyl]-4-methylthiazol-2-yl]acetamide | |
Solubility: | Upto22mMinDMSO | |
Synonyms: | PIK-93,PIK93,PIK93 |
ShippingCondition:Theproductisshippedinaglassvialatambienttemperature.
Storagecondition:Forlongershelflife,storesolidpowderat4oCdesiccated,orstoreDMSOsolutionat-20oC.
Reference:
1. | Knightetal.,ApharmacologicalmapofthePI3-Kfamilydefinesaroleforp110alphaininsulinsignaling.Cell,2006,125(4),733-747.PubmedID:16647110 |
2. | Monetetal.,Involvementofphosphoinositide3-kinaseandPTENproteininmechanismofactivationofTRPC6proteininvascularsmoothmusclecells.J.Biol.Chem.2012,287(21),17672-17681.PubmedID:22493444 |
3. | Tothetal.,Phosphatidylinositol4-kinaseIIIbetaregulatesthetransportofceramidebetweentheendoplasmicreticulumandGolgi.J.Biol.Chem.2006,281(47),36369-36377.PubmedID:17003043 |
4. | Aritaetal.,Phosphatidylinositol4-kinaseIIIbetaisatargetofenviroxime-likecompoundsforantipoliovirusactivity.J.Virol.2011,85(5),2364-2372.PubmedID:22493444 |
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RMgX + RX = R-R + MgX2.
这个反应需要的能量比生成格氏试剂的高,
因此降低反应温度是第一个选择。
其次, 增加镁得摩尔比, 让 RX与镁有更多机会反应, 而不是与RMgX。
第三, 降低RX的浓度, 即用更多的溶剂, 因为溶剂和格氏试剂有很显著的溶剂络合。
第四, 缓慢滴加RX., 即降低RX.在反应体系的浓度。
第五, 增加搅拌速率, 即, 让RX.与镁有更好的接触。
、
Cell-Based ELISA
的优点:
Cell-Based ELISA
(基于细胞的
ELISA
)是一种全新的
ELISA
技术,有两个最突出的优点:
1.1
不需要抽提蛋白、包被微孔板:细胞直接在微孔板里培养,待检测的时候,将细胞固定在微孔板上并
进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时,由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
程度上偏离了实际情况。
同时不用包被微孔板,
简化了实验流程,
有助于提高效率。
科研人员在一个
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孔
酶联板上,便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤,样
本的损失也能降到最低,比起其他普通的
ELISA
测定方法,这项全新的
ELISA
技术能更快速、更方便
地一次检测大量的细胞内蛋白。
1.2
可同时检测两种不同蛋白:
封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗,
然后再加入不同的
二抗,加入两种荧光底物,检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的,可以减少工作量,此
外还可以满足一些特殊的实验需要,例如,需要测定某个蛋白的磷酸化比例,就需要测定磷酸化蛋白的数
量和总蛋白的数量,这两个测定在同一次实验进行,有助于消除实验误差,得到更为精确的实验结果。
2
、
Cell-Based ELISA
的两种技术:
某些公司发展了双通道
Cell-Based ELISA
技术;
双通道与单通道
Cell-based ELISA
比较:
双通道
cell-based ELISA
,顾名思义,即一次可以同时检测两种目的蛋白,
R&D Systems
提供的
Cell-based ELISA
就是双通道
cell-based ELISA
,原理略:(需要荧光检测方式和相应仪器);
单通道
cell-based ELISA
,即一次只能检测一种目的蛋白,他和普通
ELISA
的主要区别在于样品处理过
程
3
、
cell-based ELISA
的应用:
该产品,最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量;
4
、有
cell-based ELISA
产品的公司:目前,多家
elisa
产品提供
商均
提供
cell
based
elisa
试剂盒,
如
Rnd
systems
,
raybiotech
,
ebioscience
,
millipore
等公司;
5
、如何自己进行
cell based elisa
实验?
事实上,根据单通道的
cell based elisa
原理,可以自己建立
cell based elisa
实验系统;
细胞加入培养板中;
加入刺激物或者抑制剂进行培养;
对细胞进行固定或者封闭;
加入第一抗体;
加入
HRP
结合的二抗(二抗的选择,同
western blot
);
加入底物进行显色;
天然产物,大多都有颜色,
存在干扰,多数情况下需要做样品的阴性对照,
尽量能用荧光的方法,
之前我们做过,将两个试剂盒的方法合并后,做的,
效果还可以
1. 姜黄素是一个典型的HAT抑制剂。
2. 针对P300: 在大约10年前,Cole和他的同事设计出了一种p300/CBP抑制剂,发表在nature杂志上。
希望能帮到你,望采纳!

