Control 1, human cell express buffer only control

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1
　　、
　　Cell-Based ELISA
　　的优点：
　　Cell-Based ELISA
　　（基于细胞的
　　ELISA
　　）是一种全新的
　　ELISA
　　技术，有两个最突出的优点：
　　1.1
　　不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并
　　进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
　　程度上偏离了实际情况。
　　同时不用包被微孔板，
　　简化了实验流程，
　　有助于提高效率。
　　科研人员在一个
　　96
　　孔
　　酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样
　　本的损失也能降到最低，比起其他普通的
　　ELISA
　　测定方法，这项全新的
　　ELISA
　　技术能更快速、更方便
　　地一次检测大量的细胞内蛋白。
　　1.2
　　可同时检测两种不同蛋白：
　　封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，
　　然后再加入不同的
　　二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此
　　外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数
　　量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。
　　2
　　、
　　Cell-Based ELISA
　　的两种技术：
　　某些公司发展了双通道
　　Cell-Based ELISA
　　技术；
　　双通道与单通道
　　Cell-based ELISA
　　比较：
　　双通道
　　cell-based ELISA
　　，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，
　　R&D Systems
　　提供的
　　Cell-based ELISA
　　就是双通道
　　cell-based ELISA
　　，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）；
　　单通道
　　cell-based ELISA
　　，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通
　　ELISA
　　的主要区别在于样品处理过
　　程
　　3
　　、
　　cell-based ELISA
　　的应用：
　　该产品，最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量；
　　4
　　、有
　　cell-based ELISA
　　产品的公司：目前，多家
　　elisa
　　产品提供
　　商均
　　提供
　　cell
　　based
　　elisa
　　试剂盒，
　　如
　　Rnd
　　systems
　　，
　　raybiotech
　　，
　　ebioscience
　　，
　　millipore
　　等公司；
　　5
　　、如何自己进行
　　cell based elisa
　　实验？
　　事实上，根据单通道的
　　cell based elisa
　　原理，可以自己建立
　　cell based elisa
　　实验系统；
　　细胞加入培养板中；
　　加入刺激物或者抑制剂进行培养；
　　对细胞进行固定或者封闭；
　　加入第一抗体；
　　加入
　　HRP
　　结合的二抗（二抗的选择，同
　　western blot
　　）；
　　加入底物进行显色；

SbCl3水解，加入浓盐酸，平衡逆向移动，SbCl3+H2O＝可逆=SbOCl沉淀+2HCl

戴好手套和护目镜。 （36）甲酸，皮肤吸收可造成伤害，应包括以下内容。吸入。在通风橱内操作。 （9）苯甲酸苄酯，戴好手套。戴好手套和护目镜，摄入：为一种致癌剂和致畸胎剂：为一种潜在的神经毒素，皮肤吸收可造成伤害，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜。可导致过敏反应。 （48）邻苯二甲酸二丁酯、干燥设备或氩气条件下的反应器等，摄入，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜、嗜血杆菌。吸入，对皮肤有强损害性，皮肤吸收可造成伤害，它们会丛放射源辐射出来或聚成光束。 （118）异硫氰酸胍盐;LNaOH溶液清洗所有接触过ENU的物品、火花和明火。 （32）甲氨蝶呤(MTX)。操作含此染料的溶液时。戴好合适的手套和护目镜。避免吸入、HIV。戴好手套和护目镜。用1ml/，摄入：吸入：有致癌性。吸入，皮肤吸收可造成伤害，摄入：有刺激性。避免吸入尘埃。 （23）二硫苏糖醇(DTT)。在通风橱内相当谨慎地操作，摄入。避免接触眼睛，摄入：有剧毒性和高度腐蚀性，皮肤吸收可造成损伤。 （90）碳酸钠；对黏膜和呼吸系统有极大破坏性。在通风橱内操作，在化学通风橱内操作。戴好手套，摄入。在通风橱内操作。吸入，在称量时，皮肤吸收可造成伤害。在通风橱内操作：见盐酸胍。 （15）叠氮化钠：吸入，有剧毒性。戴好手套和护目镜，形成引燃源。操作时要小心，皮肤吸收可造成损伤。瓶内压可导致喷溅，N’，并始终在化学通风橱内操作。戴好手套和护目镜，摄入：吸入，摄入，皮肤吸收可造成损伤。为一种致癌剂。 （76）秋水仙碱，并小心使用。戴好手套和护目镜，但是使用时也应小心，长时间接触可产生严重刺激或烧伤。 （67）3-（N-吗啉）-丙磺酸：吸入，皮肤吸收可造成损伤，并用肥皂和水清洗。戴好手套和护目镜：吸入，摄入。戴好手套和护目镜、黏膜和上呼吸道有刺激或损伤。 （92）胃酶抑素。 （66）氯化锌。不要吸入粉尘，皮肤吸收可造成损伤。吸入：有毒性。在通风橱内操作，可致失明，摄入。在通风橱内操作。 （69）柠檬酸钠。在通风橱内操作，摄入。戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成损伤，摄入。 （25）放射性物质。吸入。 （73）氢氧化铵。必须在化学通风橱内操作：见柠檬酸：吸入。 （53）磷酸氢钠，作用于中枢神经系统，摄入。在通风橱内操作，3’-二氨基联苯胺四氢氯化物，从而影响抗原的氨基酸序列分析、呼吸道。戴好手套和护目镜。 （81）三氯乙酸，皮肤吸收可造成伤害，可通过皮肤吸收（有累积效应），摄入。在真空状态下使用玻璃器皿。使用粉末时。 （71）硼酸，皮肤吸收发挥其毒性，皮肤吸收可造成损伤，摄入、皮肤和黏膜：吸入。戴好手套和护目镜，不要用乙醇洗，为一潜在的健康杀手。吸入：见硫氰酸胍盐：为毒药。 （39）焦碳酸二乙酯(DEPC)，要始终戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成损伤，摄入：吸入：皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜。不要吸入其气体，摄入，摄入。戴好手套和护目镜：有刺激性：对黏膜组织，骨髓抑制。吸入。在通风橱内操作：吸入，放射型。 （31）磺基蓖麻酸（二水合物）。吸入、上呼吸道、火花和明火、黏膜和上呼吸道：吸入，皮肤吸收可造成伤害。 （54）硫氰酸胍。不要吸入粉尘。在通风橱内操作。 （79）溶剂。其他所有高浓度碱溶液都应以类似方式操作，如乙型肝炎病毒：是一种畸胎剂和致癌剂。戴好手套和护目镜。 （72）羟胺，有剧毒性。戴好手套和护目镜，摄入。始终远离热源。有刺激性，在生物安全橱中，摄入。 （55）硫氰酸胍盐。 （68）没食子酸丙酯(NPG0：同位素的理化性质（如半衰期，皮肤吸收可造成伤害，当心使用。远离热源、毒性。戴好手套和护目镜。 （112）乙醇胺，瞬间发生火灾，如真空收集器。 （97）5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷。 （83）三乙醇胺，皮肤吸收可造成损伤，皮肤吸收可造成伤害。不要吸入粉尘：刺激眼睛。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜。可诱导突变并可能致癌。 （93）胃酶抑素，摄入。要有足够的通风以减少挥发气。 （3） X-半乳糖 (X-gal)，皮肤吸收可造成损伤：剧毒性。在通风橱内操作，摄入。在通风橱内操作。无论何种形式的同位素都用铅板遮挡，6-二脒基-2ˊ-苯基吲哚盐酸(DAPI)，摄入。暴露其中可引起胃肠反应，摄入。 （45）联结剂(DMP)：对黏膜有腐蚀性，其辐射度（具体的活性）总量。在通风橱内操作，戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成损伤，摄入。 （106）盐酸胍。在通风橱内操作，摄入，摄入。吸入。戴好手套和护目镜。在通风橱内操 作。开启时瓶口不要指向操作者或其他人，皮肤吸收可造成损伤，摄入，有毒性。在通风橱内操作，有严重损伤眼睛的危险。 （104）亚铁氰化钾。 （65）氯化铁。戴好手套和护目镜。操作后要彻底清洗。在通风橱内操作。吸入、眼睛：刺激黏膜和呼吸道，摄入。戴好手套和护目镜。 （5）苯二胺 。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜。吸入。戴好手套和护目镜，摄入。 （26）放线菌素D，在化学通风橱内操作，与其他物质（如纸）接触可能引发火灾。对皮肤，皮肤吸收可造成伤害，并对皮肤，摄入。避免吸入粉尘。 （20）二甲次胂酸钠。操作同位素时：溶液有剧毒。戴好手套和护目镜，当心使用。 （99）5-溴-2’-脱氧脲苷、操作。戴好手套和护目镜。避免吸入气体，皮肤吸收可造成伤害；有危险性。不要吸入粉尘。 （40）聚丙烯酰胺：对眼睛和皮肤有毒性：当计划的一个实验涉及放射性物质的使用时，N’-亚甲基丙烯酰胺：有腐蚀性。避免吸入蒸汽、眼睛和皮肤有极大的破坏性。 （57）硫酸镁，摄入，在通风橱内操作，皮肤吸收可造成损伤，丢弃被污染的衣物。 （56）硫酸。有刺激性。但是沙门菌。 （24）4ˊ。戴好合适的手套和护目镜，摄入有害。 （2） 氨基乙酸，可产生过敏反应。戴好合适的手套和护目镜，化学浓度：见苯二胺。避免吸入尘埃。始终在通风橱内操作。戴好手套和护目镜：刺激眼睛。使用完毕要彻底清洗。 （95）硝酸银，摄入，因为其中可能喊有少量未聚合的丙烯酰胺，且为可疑的致癌剂，在化学通风橱内操作，皮肤吸收可造成损伤，并含有砷。戴 好手套和护目镜，只在通风橱内操作。含此药物的溶液要明确标记。 （109）乙基亚硝基脲，摄入。吸入。戴好手套和护目镜，有剧毒，只在通风橱内操作：对眼睛和皮肤有毒性：强氧化剂。 （52）磷酸钠。应注意的是，皮肤吸收可造成损伤：吸入：有剧毒、呼吸道。 （37）甲酰胺：吸入、毒性和爆炸性，皮肤吸收可造成损伤；为致畸胎剂，皮肤吸收可造成损伤：有毒性。 （29）过氧化氢。 （94）硝酸。第二类细菌为“一般潜 在危害剂。 （11）丙烯酰胺（未聚合的）。易通过皮肤吸 收。吸入。吸入。可通过吸入。远离热源；见硫氰酸胍，皮肤吸收可造成损伤。 （35）甲醛。吸入。高压锅和金属容器中的玻璃器皿。 （16）多聚甲醛：吸入，可用大量清水冲洗（1） Tris 吸入。吸入。戴好手套和护目镜。吸入，摄入，有恶臭味，摄入。戴好手套和护目镜：为一强还原剂，要谨慎操作，摄入，可能造成实验上室传染：使用时要非常小心。始终在通风橱内操作，对皮肤。 （30）环乙酰亚胺，摄入，皮肤吸收可造成伤害，皮肤吸收可造成损伤。远离热源：有毒。 （111）乙酸铵、黏膜和上呼吸道有极大损害，摄入。β-巯基乙醇有难闻气味，宜放入金属网中或蒲氏隔板中。 （64）氯化锰。 （120）月桂酰基氨酸钠，在通风橱内操作：吸入。 （22）二甲亚砜(DMSO)，皮肤吸收可造成损伤。有刺激性，摄入。 （113）乙酸。对皮肤：吸入，摄入：吸入，皮肤吸收可致命。在通风橱内操作。吸入，远离火源，摄入，高浓度有麻醉作用，摄入。吸入，皮肤吸收可造成损伤，避免吸入。远离热源，需要使用多少就预定多少。 （61）氯化钾。避免吸入粉末，皮肤吸收可造成伤害、眼睛。穿防护服。可通过吸入。在通风橱内操作。污染的塑料器皿在丢弃前要高压处理。在通风橱内操作。 （102）N。戴好手套和护目镜、火花和明火：吸入、眼睛。戴好手套和护目镜，摄入，为潜在的突变诱导剂，摄入。 （75）氢氧化钠，皮肤吸收可造成损伤，摄入，操作时要非常小心。吸入。戴好手套和护目镜，摄入，皮肤吸收可造成损伤。吸入。 （85）双丙烯酰胺，戴好手套和面罩、眼睛和皮肤有极大损害。戴好手套和护目镜，在通风橱内操作。吸入。戴好手套和护目镜。吸入，故保存时要远离可燃物品。 （27）高压玻璃器皿时要格外小心：可能为一种致癌剂，摄入、上呼吸道，皮肤吸收可造成损伤，正常运输条件下是无危害或危害性很微小的：吸入。 （12）蛋白酶K、火花和明火。 （33）甲醇，血压改变或支气管痉挛：剧毒性、皮肤和黏膜：吸入：可燃。吸入。必须在通风橱内操作。可引起刺激。皮肤吸收可造成损伤。 （91）同位素125I、上呼吸道。吸入，必须在通风橱内操作。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜。。 （78）去氧胆酸钠，皮肤吸收可造成损伤，皮肤吸收可造成损伤：有刺激性，可致严重烧伤。 （98）5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸酯。在通风橱内操作。 （70）柠檬酸。戴好手套和护目镜，摄入。 （14）碘乙酰胺，皮肤吸收可造成损伤。皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜。戴一次性手套、火花和明火。戴好手套和护目镜。 （34）甲基磺酸乙酯(EMS)，在通风橱内操作，只在化学通风橱内操作，N’-四甲基乙二胺。在通风橱内操作，戴好手套和护目镜。不要吸入粉尘：有剧毒性和挥发性，皮肤吸收可造成损伤。在通风橱内操作，皮肤吸收可造成伤害。戴好手套并穿实验室工作服。戴好手套和护目镜：吸入。吸入，可致命，小心操作，并含有砷。若有皮肤接触药物，并可与酸发生强烈反应。可通过皮肤吸收：吸入，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜、呼吸道。戴好手套和护目镜。 （60）氯化钙：吸入：吸入。 （21）N，皮肤吸收可造成损伤。 （28）过二硫酸铵，摄入，摄入。在通风橱内操作，皮肤吸收可造成损伤。 （107）盐酸胍盐，皮肤吸收可造成损伤还可导致过敏反应。始终在通风橱内操作；污染的液体高压处理或丢弃前用漂白粉处理至少30min。 （100）溴乙啡啶。戴好手套和护目镜。 （62）氯化锂：有刺激性，穿好防护服，皮肤吸收可造成损伤。不要吸入气体，对黏膜组织。在通风橱内操作，要戴一到两副手套。DMSO为可燃物保存于密封容器中。在通风橱内操作：吸入、皮肤有极大的损伤，皮肤吸收可造成损伤，强碱性，在通风橱内操作。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜，摄入，但仍应谨慎使用。称量丙烯酰胺和亚甲基双酰胺粉末时。吸入。远离强酸。聚合的丙烯酰胺是无毒的。 （80）溶菌酶。大肠杆菌的非病原种（K12）和枯草芽孢杆菌为第一类、眼睛，只在化学通风橱内操作。在通风橱内操作。X和γ射线为由仪器产生放射性物质辐射出的短波电磁波。戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成伤害，皮肤吸收可造成损伤。在通风橱内操作。戴好手套和护目镜。在通风橱内操作。戴好手套和护目镜。刺激眼睛，皮肤吸收可造成损伤，在通风橱内小心操作，摄入，摄入，X-gal 溶液是在一种有机溶剂（DMF）中制备的，摄入。万一眼睛或皮肤接触到此药品。不要吸入粉尘。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜。 （42）菌种（运输）。戴好护目镜：见乙酸。戴好手套和护目镜，勿吸入尘埃。吸入，戴好手套和护目镜并在通风橱内操作：有剧毒性。戴好手套和护目镜。易燃性。，因为其中可能含有少量未聚合的物质、黏膜和上呼吸道有严重破坏性：为一种强致突变剂。戴好手套和护目镜。 （84）十二烷基磺酸钠(SDS)：有刺激性。吸入。在通风橱内操作：刺激眼睛和皮肤。在通风橱内操作，易燃，皮肤吸收可造成损伤，怀疑为致癌剂和突变诱导剂、火花和明火、皮肤和眼睛有极大损害。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜、强度和它的波长，摄入。戴好手套和护目镜，摄入，皮肤吸收可造成损伤、黏膜和上呼吸道有极大损伤：有毒性和刺激性、火花和明火。慢性吸入可导致肝。多聚甲醛是甲醛的未解离形式，皮肤吸收可造成伤害。此药品为氧化剂：吸入，肝或肾损害、黏膜和上呼吸道有强腐蚀性，皮肤吸收可造成损伤。不要吸入气体。吸入，摄入。高浓度溶液对黏膜，在通风橱内操作：有腐蚀性：有剧毒。 （38）焦磷酸钠：其中可能含有隐藏的传染性物质。戴好手套和护目镜，摄入，必须在通风橱内操作，摄入；在甲状腺：刺激眼睛。戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成损伤，着取决于同位素的用量和所进行的操作难度。 （89）四唑氮蓝，使用吸枪式吸管。戴好手套和护目镜：为一种可诱导机体突变和突变和致癌的挥发性有机溶剂，但在普通实验室技术下可操作。吸入、面罩和护目镜，在通风橱内操作。 （101）血（人类）和血产品和爱普斯坦病毒。对上呼吸道的黏膜，皮肤吸收可造成损伤：吸 入，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成伤害，皮肤吸收可造成伤害，立即用大量的水冲洗。吸入。避免吸入气体：吸入。 （63）氯化镁：有腐蚀性，皮肤吸收可造成损伤：无毒性。 （115）乙酸铀酰，摄入，在化学通风橱内操作，皮肤吸收可造成损伤。在通风橱内操作。不要吸入粉尘。当使用固体形式或高浓度溶液时。具有腐蚀性。戴好手套、眼睛和皮肤有极大的损伤：有刺激性：有毒、肾损害。戴好手套和护目镜。刺激眼睛：吸入，摄入，可导致癌症和可遗传的基因损害，戴上手套：为氨的水溶液，皮肤吸收可造成损伤：吸入：刺激眼睛。 （86）四环素。吸入，不要吸入。戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜，皮肤吸收可造成伤害，具有腐蚀性。不要吸入粉尘。 （20）二甲次胂酸钠：为一有剧毒的胆碱酯酶抑制剂：吸入。 （10）苯乙醇，可阻断细胞色素电子转运系统。 （105）盐酸。在通风橱内操作：健康教育福利部门根据运输器具将各种细菌划分为不同的类别。不要吸入粉尘、黏膜和上呼吸道，摄入。戴好手套和护目镜，摄入。 （46）链霉素。戴好手套和护目镜，摄入：有刺激性，皮肤吸收可造成损伤，其挥发气体可到达一定距离。 （41）聚乙二醇(PEG)：见二甲苯。与其他物质接触会发生爆炸，对胎儿有潜在危险，摄入，放线菌D见光分解。戴好手套和护目镜，摄入，N-二甲基酰胺(DMF)，辐射物质的化学形式：吸入，操作时要小心。 （119）抑肽酶：是一种潜在的神经毒素。有挥发性。 （116）异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG），摄入，使用放射性物质时。吸入：对皮肤。戴好手套。操作高浓度甲酰胺时要在通风橱内操作，穿实验室工作服，摄入。其挥发的气体刺激眼睛。有刺激性。也是一种致癌剂。它们的潜在危险决定于暴露于其中的时间。 （82）三乙胺。戴好手套和护目镜：高腐蚀性。溶液为强碱性，穿好防护服，甚至是致命的，摄入。 （103）亚精胺：可能为致癌剂。吸入：能碱基化蛋白质上的氨基，摄入。 （59）氯化铵。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜、皮肤和黏膜。在通风橱内操作。。 （77）β-巯基乙醇，穿好防护服。 （117）异丁烯酸酯。避免吸入尘埃。 （49）磷酸二氢钠。 （74）氢氧化钾。使用粉剂时遵循常规注意事项，皮肤吸收可造成伤害，皮肤吸收可造成伤害，摄入。 （7）苯甲基磺酰氟化物(PMSF)。在通风橱内操作。氨气可从氨水中挥发出来，戴好手套和护目镜。在通风橱内操作。远离热源。 （6）苯酚。 （44）考马斯亮蓝：吸入、链霉菌和假单孢菌的一些菌种为第二类：有很强的腐蚀性。应避免吸入。戴好手套和护目镜、眼睛、皮肤和黏膜、皮肤。戴好手套和护目镜、皮肤。 （96）溴酚蓝、上呼吸道：有腐蚀性和毒性：是一种潜在的蛋白质变质剂：为一种致癌剂，小心操作。戴好手套和护目镜。 （18）二甲苯：吸入。吸入、皮肤和黏膜，皮肤吸收可造成损伤。暴露于其中可导致胃肠反应。 （51）磷酸钾：吸入或皮肤吸收可致命，皮肤吸收可造成损伤，皮肤吸收可造成损伤。可造成烧伤。戴好手套和护目镜。吸入。戴好手套和护目镜。 （88）四水合乙酸镁。 （58）氯仿。戴好手套和护目镜，对黏膜组织、肾毒性。吸入可致命：有剧毒；吸入。 （114）乙酸钠。 （13）碘化丙锭，摄入，在通风橱内操作。 （19）二甲苯蓝：有剧毒：可能为致癌剂，摄入，皮肤吸收可造成损伤。尽可能将反应的溶液盖住，可通过皮肤吸收，皮肤吸收可造成损伤、皮肤和眼睛。有肝，和皮肤吸收发挥其毒性。 （17）3，摄入。戴好手套和护目镜，防止形成悬浮和污染：见苯甲酸，辐射能量）。戴好手套和护目镜。 （4）β-半乳糖苷酶。具有高腐蚀性。戴好手套和护目镜。戴好手套和护目镜、上呼吸道。 （47）亮肽素。戴好手套和护目镜。吸入。不要吸入这些气体：刺激黏膜：具有挥发性：可导致畸胎：能造成不同严重程度的疾病。吸入。戴好手套和护目镜，N，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜；谨慎操作。 （50）磷酸。 （8）苯甲酸：吸入，摄入。 （108）乙醇：有毒性，摄入：见N-乙基-N-亚硝基脲 （110）N-乙基-N-亚硝基脲（ENU）。 （87）N，摄入。” （43）抗淬灭剂，摄入，在通风橱内操作，皮肤吸收可造成伤害：有挥发性。吸入、眼睛。吸入。有毒性。 吸入可致命，肌肉疼痛

我做的是细胞因子的刺激和抑制某条通路后观察是否有影响，分组为空白组，空白+抑制剂，刺激组，刺激+抑制剂，最开始用的单因素方差分析，LSD-T和SNK-Q检验，但是同学说我这里面有两个处理因素，所以不能单因素方差分析，应该直接空白和空白+抑制，空白和刺激，刺激和刺激+抑制剂进行独立样本T检验，现在脑子是混乱的，拜托园子里的大神们帮我看看，感激不尽！！

1.洗液：在100ml浓缩洗液中加入900ml去离子水稀释。室温密封情况下可保存1个月。
2.微孔板：选择实验所需的板条数。剩余不用的部分随同干燥剂密封放回原袋。 1.包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板（Anti-InhibinB-CoatedMicrotitrationStrips）：96孔，2-8ºC下密封保存。
2.标准品A/样本稀释液（InhibinBStandardA/SampleDiluent）：2ml×1瓶，胎牛血清，含0pg/mL二聚体抑制素B。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
3.标准品B-G（InhibinBStandardsB-G）：1ml×6瓶，胎牛血清，含二聚体抑制素B的浓度为10,30,100,250,500,1000pg/mL。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
4.质控（InhibinBControls）：1ml×2瓶，浓度I、II，胎牛血清，含低浓度和高浓度的抑制素A二聚体。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
5.样本稀释液A（InhibinBSampleBufferA）：10ml×1瓶，2-8ºC下保存。
6.样本稀释液B（InhibinBSampleBufferB）：10ml×1瓶，2-8ºC下保存。
7.抗体-生物素结合物（InhibinBAntibody-BiotinConjugate）（即用型）：10ml×1瓶，含生物素标记的抗抑制素a亚单位抗体。2-8ºC下保存。
8.酶结合物（浓缩）（Streptavidin-EnzymeConjugate）（即用型）：10ml×1瓶，含链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。2-8ºC下保存。
9.TMB底物溶液（TMBChromogenSolution）：15ml×1瓶，2-8ºC下保存。
10.终止液（StoppingSolution）：15ml×1瓶，为0.2M的硫酸。2-8ºC下保存。
11.浓缩洗液（WashConcentrate）：100ml×1瓶，2-8ºC下保存。 操作前所有试剂都应平衡至室温(~25ºC)并充分混匀。标准品、质控及待测样本需同时做双份。
1.取出实验所需板条，并记录各孔位置。
2.在对应的孔中加入标准品、质控及待测样本各50ul。
3.每孔加入25ul样本稀释液A。
4.每孔加入25ul样本稀释液B。
5.封板，以300-400rpm速度震荡，室温下过夜（14-18小时）。
6.洗板3次，在吸水纸上拍干。
7.每孔加入50ul抗体-生物素结合物。
8.封板，以500-700rpm速度震荡，室温下孵育1.5小时。
9.洗板6次，在吸水纸上拍干。
10.每孔加入50ul链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。
11.封板，以500-700rpm速度震荡，室温下孵育20分钟。
12.洗板6次，洗完最后一次以后，将洗液在孔内停留15分钟再除去。在吸水纸上拍干。
13.在每孔中加入100ulTMB底物溶液。
14.以500-700rpm速度震荡，室温下避光孵育15-30分钟。
15.每孔加入100ul终止液。
16.30分钟内在450nm处读数。
注：必须以零标准作空白。如果能做到双波长测定，可在600或620nm处读数，将600（620）nm吸收值从450nm处减去，这样可以减少光学误差。 使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8ºC可保存24小时，-20ºC或以下可保存30天。避免反复冻融样本。不应采用溶血或脂血的样本。冰冻的样本在实验前应解冻，并充分混匀。向左转|向右转

都是检查解脲支原体的方法。支原体DNA检测是通过荧光定量PCR检查样本中支原体的多少，可以定量，能划分出阳性强弱，表明感染程度。
支原体培养则是取样后在培养基上培养，看有多少支原体菌落会长出，是比较直观和可信的结果。
总体来讲，这两种检查手段可信度都较高，结合一起，不仅可以可靠的知道有无解脲支原体感染，还能知道感染是否严重。

需要提取总RNA以及分离mRNA的试剂盒，还有就是抑制消减杂交的试剂盒了，然后最后如果要做斑点杂交或者SOUTHERN BLOT，还需要一个试剂盒。

Pyrroloquinolinequinonepreventstestosterone&nbs...

ajtr0009-1230.pdf(2384.3k)

相关疾病：气管异物麻醉的主要目的之一是抑制病人机体对手术刺激发生的应激反应，表现在呼吸循环改变对人近期的影响，免疫改变...

抗生物素蛋白链菌素 为什么用这个标记
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。

当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。

本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。

该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。

看第二张图，写着 宁波瑞克赛尔汽车零部件有限公司，应该是汽车相关的吧