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hypoxyprobe/Hypoxyprobe HRP 100 Kit/hp16-100kit
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Hypoxyprobe HRP 100 Kit
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2021-09-02
1．机械刮除法：是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝）、或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为：（1）标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位；（2）刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸 查看更多
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2021-08-30
1．取出生后1-3天内的大鼠脑组织后，先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍的Hanks液中，脑组织比较柔软，反复吹打即可制成细胞悬液。2．为排除脂肪成分和其它碎块，把悬液注入离心管中，在室温直立5～10分钟后，细胞或细胞团块自然下沉，脂肪等杂物易漂浮于悬 查看更多
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Making library DNA from the DNA we send youThe library is distributed as individual pools in the form of DNA. You will be sent about a microgram of each pool a 查看更多
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2021-08-17
ObjectiveTo observe the role sulfate plays in sea urchin gastrulation, and to replicate the findings of Karp and Solursh, that sea urchin embryos fail to gastr 查看更多
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2021-08-13
Zebrafish will mate and deposit fertilized eggs on the bottom of the tank at "dawn". They can be accustomed to lay at any convenient time by keeping the room d 查看更多
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2021-08-15
Objective: This experiment aims to discover if temperature has an effect on the rates of sea urchin embryonic development. By altering the external environment 查看更多
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2021-09-18
mTn-3xHA/lacZ TR Tn3 terminal inverted repeatsXaFactor Xa cleavage recognition siteloxRlox site, target for Cre recombinaselacZ5"-truncated lacZ gene encoding 查看更多
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2021-09-14
卵巢过度刺激综合征（OHSS）是辅助生殖技术中诱发排卵过程引起的常见并发症。以往对于卵巢过度刺激综合征的描述包括卵巢肿大、腹水，血液浓缩、高凝状态以及电解质紊乱。症状的轻重取决于疾病的严重程度和发病的时间长短。重度 OHSS 可以导致严重的并发症，包括胸腔积液、急性肾功能不全以及深静脉血栓。以下为 OHSS 症状的详细分类：OHSS 症状分类 OHSS 等级临床表现 查看更多
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2021-09-11
大豆因其蛋白含量高和氨基酸平衡性好而成为人和动物优秀的植物性蛋白质源。大豆营养丰富，除了含有优质蛋白质和8种人体必需氨基酸外，还含有脂肪、维生素、亚油酸、无机盐和卵磷脂等多种具有重要营养价值的成分。大豆中蛋白含量大约为40%，营养价值优于谷物蛋白，甚至要高于许多动物蛋白，... 查看更多
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2021-09-07
磁刺激有助语言网络的恢复 使用重复性经颅磁刺激（rTMS）调节语言网络的活动可能有助卒中后失语的恢复。病例系列报道及可行性研究提示可能的治疗效果，但是，还没有对临床效果与激活模式进行关联的随机空白对照原理验证研究。为此，加拿大 McGill 大学神经科的 AlexanderThiel 博士等人进行了一项研究，研究结果在线发表在 2013 年 6 月 27 日的 Stroke 杂志上。研究结果显示 查看更多
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2021-09-09
动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长，动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。... 查看更多
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2021-09-04
自 1950 年代以来，电磁场刺激便时常被用于促进骨折愈合。一般认为该方法可抑制破骨细胞的活性，刺激血管形成，促进骨形成。甚至曾有双盲随机对照研究证实脉冲式电磁场刺激对于胫骨干骨折延迟愈合具有促进作用 [1]。然而，JBJS 最新的一项多中心双盲随机对照研究显示，脉冲式电磁场刺激对于新鲜胫骨干骨折的愈合并没有明显的促进作用。 该研究共纳入了 6 个医院的 2 查看更多
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【实验求助】急求STAT4特异性抑制剂,用来刺激淋巴细胞 细胞生物...123
linrucq2021-08-03
急求STAT4特异性抑制剂，用来刺激细胞
怎么用fret测量camp的浓度123
改密死10482017-09-28
1.检测原理：
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
2.保存条件
避光2~4℃保存，过期时间见外包装。
3.盒内试剂
cAMP标准品：1管，1ml。（50μM）
生物素标记的cAMP（b-cAMP）：1管，25μl。
铕标的抗生物素蛋白链菌素：1管，25μl。
荧光标记的cAMP抗体：1管，40μl。
检测缓冲液：1瓶，25ml。
4.需要自配的其他溶液
l Hank’s balanced salt solution (HBSS): NaCl 8.0g、CaCl2 0.14g、KCl 0.4g、 KH2PO4 0.06g、Na2HPO4?7H2O0.09g、MgCl2.6H2O0.10 g、MgSO4.7H2O0.10 g、NaHCO30.35g、葡萄糖1.0g，加H2O至 1000ml (用7.5%NaHCO调节PH值=7.4)
l Versene消化液（1L）：EDTA 0.372 g，NaCl 8.0g，KCl 0.20 g，KH2PO40.20g，Na2HPO4 1.15 g，D-glucouse 0.2 g，pH 7.4
l HEPES缓冲液(1mol/L)：取2.383gHEPES溶于10ml去离子水中。
l 7.5%BSA溶液：取0.75gBSA溶于10ml去离子水中
l 0.5M IBMX溶液：11.11mg IBMX溶于100μl DMSO中，-20℃冻存。
l 刺激缓冲液（SB）：14 ml HBSS(1×)+75μlHEPES(1mol/L)+200μlBSA (7.5%)。(注：在测定细胞cAMP时，反应缓冲液中要加入IBMX 0.5mmol/L)
l 吗啡贮存液(10mM)：盐酸吗啡37.585mg溶于10ml生理盐水中，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
l 纳络酮母液(100mM)：纳络酮4mg溶于100μl 生理盐水中，用时工作液按照1:500稀释，溶剂为含有IBMX的反应缓冲液。
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
2.保存条件
避光2~4℃保存，过期时间见外包装。
3.盒内试剂
cAMP标准品：1管，1ml。（50μM）
生物素标记的cAMP（b-cAMP）：1管，25μl。
铕标的抗生物素蛋白链菌素：1管，25μl。
荧光标记的cAMP抗体：1管，40μl。
检测缓冲液：1瓶，25ml。
4.需要自配的其他溶液
l Hank’s balanced salt solution (HBSS): NaCl 8.0g、CaCl2 0.14g、KCl 0.4g、 KH2PO4 0.06g、Na2HPO4?7H2O0.09g、MgCl2.6H2O0.10 g、MgSO4.7H2O0.10 g、NaHCO30.35g、葡萄糖1.0g，加H2O至 1000ml (用7.5%NaHCO调节PH值=7.4)
l Versene消化液（1L）：EDTA 0.372 g，NaCl 8.0g，KCl 0.20 g，KH2PO40.20g，Na2HPO4 1.15 g，D-glucouse 0.2 g，pH 7.4
l HEPES缓冲液(1mol/L)：取2.383gHEPES溶于10ml去离子水中。
l 7.5%BSA溶液：取0.75gBSA溶于10ml去离子水中
l 0.5M IBMX溶液：11.11mg IBMX溶于100μl DMSO中，-20℃冻存。
l 刺激缓冲液（SB）：14 ml HBSS(1×)+75μlHEPES(1mol/L)+200μlBSA (7.5%)。(注：在测定细胞cAMP时，反应缓冲液中要加入IBMX 0.5mmol/L)
l 吗啡贮存液(10mM)：盐酸吗啡37.585mg溶于10ml生理盐水中，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
l 纳络酮母液(100mM)：纳络酮4mg溶于100μl 生理盐水中，用时工作液按照1:500稀释，溶剂为含有IBMX的反应缓冲液。
【medicalnews】【资讯翻译】蛆虫应用于清创术中能够抑制感染并...123
shumufeng2021-07-20
http://www.medscape.com/viewarticle/755763?src=rss
认领翻译的战友请跟帖注明“认领本文翻译，48小时内未完成，请其他站友认领”
MaggotsFasterThanScalpelinWoundDebridement
December19,2011—Maggotdebridementtherapy(MDT)appearstobemoreeffectiveforwounddebridementcomparedwithconventionaltherapy,butonlyat1week;afterthattime,anothertypeofdressingshouldbeused,newresearchsuggests.
KristinaOpletalovà,MD,fromtheDepartmentofDermatology,UniversityofCaen,France,andcolleaguespublishedonlineDecember19intheArchivesofDermatology.
MedicalmaggotswereapprovedbytheUSFoodandDrugAdmiNISTrationasamedicaldeviceforwounddebridementin2004.Accordingtotheresearchers,useofmaggotsintreatingwoundsisassociatedwitheffectivewounddebridement,antibacterialeffects,andstimulationofwoundhealing.
However,theypointout,"[r]elativelyfewclinicalstudieshavebeenconductedandtheresultsarenotclear,partlyowingtomethodologicassessmentproblems."
InthecurrentProspective,randomizedcontrolled,phase3clinicaltrial,theresearcherssoughttodeterminetheefficacyofbaggedlarvaeonwounddebridementincomparisonwithconventionaltreatment.
TheprimaryobjectivewastocomparethemeanpercentageofsloughinwoundstreatedwithMDTwiththatofconventionaltreatmentatday15.Thestudyincluded119patientswithanonhealing,sloughywoundthatwas40cm2orsmallerandlessthan2cmdeep.Patientsalsohadananklebrachialindexof0.8orhigher.
Treatmentwasadministeredduringa2-weekhospitalstay.Conventionaltreatmentconsistedofsurgicaldebridement3timesaweekwithascalpel,withuseoftopicalanesthesia.TheMDTwasadministeredusinganencloseddressing(Vitapad,BioMondeLaboratories)containing80sterilemaggots.Atdischarge,aconventionaldressingwasapplied,andpatientswerefollowed-upatday30.
DebridementbyMDTwassignificantlyfasterthansurgicaldebridementduringthefirstweekoftreatment,reachingthesamelevelthecontrolgroupreachedatday15.NobenefitforMDTcomparedwithconventionaltreatmentinhealingrateswasobserved.Atday8,54.5%intheMDTgroupvs66.5%inthecontrolgroup(P=.04)hadevidenceofsloughandwoundhealing.However,byday15,themeanpercentageofsloughwas55.4%intheMDTgroupand53.8%inthecontrolgroup(P=.78).
"AthoughMDTshowsnosignificantbenefitatday15comparedwithconventionaltreatment,debridementbyMDTissignificantlyfasterandoccursduringthefirstweekoftreatment,"theresearchersconclude."Becausethereisnobenefitincontinuingthetreatmentafter1week,anothertypeofdressingshouldbeusedafter2or3applicationsofMDT."
Painscoresweresimilarandmildinbothgroups,althoughincontrasttoconventionaltreatment,MDTwasperformedwithouttopicalanesthesia.
Accordingtotheresearchers,noneofthepatientswerereticentaboutundergoingMDT."[A]crawlingsensationonthewoundwasrarelyandalmostequallynotedinbothgroups,revealingthatthesensationwassubjective,"Dr.Opletalovàandcolleaguespointout.
TwoquestionsregardingMDTremainunanswered,theauthorsnote."Candebridementbeimprovedusingmoremaggotsperdressing?Ifso,wouldthesedressingsbemorepainful?Furtherstudiesareneededtoanswerthesequestions."
ThestudywassupportedbygrantsfromtheClinicalResearchHospitalProgramandfromtheFrenchSocietyofDermatology.Theauthorshavedisclosednorelevantfinancialrelationships.
认领翻译的战友请跟帖注明“认领本文翻译，48小时内未完成，请其他站友认领”
MaggotsFasterThanScalpelinWoundDebridement
December19,2011—Maggotdebridementtherapy(MDT)appearstobemoreeffectiveforwounddebridementcomparedwithconventionaltherapy,butonlyat1week;afterthattime,anothertypeofdressingshouldbeused,newresearchsuggests.
KristinaOpletalovà,MD,fromtheDepartmentofDermatology,UniversityofCaen,France,andcolleaguespublishedonlineDecember19intheArchivesofDermatology.
MedicalmaggotswereapprovedbytheUSFoodandDrugAdmiNISTrationasamedicaldeviceforwounddebridementin2004.Accordingtotheresearchers,useofmaggotsintreatingwoundsisassociatedwitheffectivewounddebridement,antibacterialeffects,andstimulationofwoundhealing.
However,theypointout,"[r]elativelyfewclinicalstudieshavebeenconductedandtheresultsarenotclear,partlyowingtomethodologicassessmentproblems."
InthecurrentProspective,randomizedcontrolled,phase3clinicaltrial,theresearcherssoughttodeterminetheefficacyofbaggedlarvaeonwounddebridementincomparisonwithconventionaltreatment.
TheprimaryobjectivewastocomparethemeanpercentageofsloughinwoundstreatedwithMDTwiththatofconventionaltreatmentatday15.Thestudyincluded119patientswithanonhealing,sloughywoundthatwas40cm2orsmallerandlessthan2cmdeep.Patientsalsohadananklebrachialindexof0.8orhigher.
Treatmentwasadministeredduringa2-weekhospitalstay.Conventionaltreatmentconsistedofsurgicaldebridement3timesaweekwithascalpel,withuseoftopicalanesthesia.TheMDTwasadministeredusinganencloseddressing(Vitapad,BioMondeLaboratories)containing80sterilemaggots.Atdischarge,aconventionaldressingwasapplied,andpatientswerefollowed-upatday30.
DebridementbyMDTwassignificantlyfasterthansurgicaldebridementduringthefirstweekoftreatment,reachingthesamelevelthecontrolgroupreachedatday15.NobenefitforMDTcomparedwithconventionaltreatmentinhealingrateswasobserved.Atday8,54.5%intheMDTgroupvs66.5%inthecontrolgroup(P=.04)hadevidenceofsloughandwoundhealing.However,byday15,themeanpercentageofsloughwas55.4%intheMDTgroupand53.8%inthecontrolgroup(P=.78).
"AthoughMDTshowsnosignificantbenefitatday15comparedwithconventionaltreatment,debridementbyMDTissignificantlyfasterandoccursduringthefirstweekoftreatment,"theresearchersconclude."Becausethereisnobenefitincontinuingthetreatmentafter1week,anothertypeofdressingshouldbeusedafter2or3applicationsofMDT."
Painscoresweresimilarandmildinbothgroups,althoughincontrasttoconventionaltreatment,MDTwasperformedwithouttopicalanesthesia.
Accordingtotheresearchers,noneofthepatientswerereticentaboutundergoingMDT."[A]crawlingsensationonthewoundwasrarelyandalmostequallynotedinbothgroups,revealingthatthesensationwassubjective,"Dr.Opletalovàandcolleaguespointout.
TwoquestionsregardingMDTremainunanswered,theauthorsnote."Candebridementbeimprovedusingmoremaggotsperdressing?Ifso,wouldthesedressingsbemorepainful?Furtherstudiesareneededtoanswerthesequestions."
ThestudywassupportedbygrantsfromtheClinicalResearchHospitalProgramandfromtheFrenchSocietyofDermatology.Theauthorshavedisclosednorelevantfinancialrelationships.
抗生物素蛋白链菌素为什么用这个标记123
★撒比☆7172017-09-28
抗生物素蛋白链菌素 为什么用这个标记
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
流式胞内染色—刺激剂与蛋白转运抑制剂的选择 爱必信(上海)生物...123
jxzm2017-03-02
抑制剂刺激细胞后，需要用PBS清洗后再做后续实验吗
自闭症与癌症:刺激还是抑制? 心理学与精神病学专业讨论版...123
killer-dong2021-07-26
相关疾病：自闭症肿瘤癌症高血压湿疹爱荷华大学的研究人员发现，自闭症患者有更多的肿瘤相关基因变异，他们发生肿瘤的几率更低。这项报告发表在...
[新版]对二氯苯123
cici一葵2017-09-28
除虫剂白色的晶体状是什么物质？我查了一下百度说是对二氯苯请问对二氯苯有挥发性吗？要是沾在吃饭的碗上了了可怎么办？
电厂化学水、油分析题库 123
2021-08-10
望好找一点
【求助】5羟色胺到底是刺激食欲还是抑制食欲啊?_问答详情_刺激/...123
智爱生活2021-07-27
5-羟色胺到底是刺激食欲还是抑制食欲啊？有点乱
...为什么细胞增殖会明显受到抑制?_问答详情_刺激/抑制试剂_细胞...123
2017-09-28
绝对有影响，我们血液科很多白血病都是从事过化工的。很多化学试剂严重抑制骨髓增生，影响血小板生成。
检验血液的试剂检验血液的试剂批发、促销价格、产地货源 123
2017-09-28
鲁米诺试剂为什么可用作检验血液？即使微量的血液也是可以检验出来的么？为什么？还有为什么有血液时会出现蓝光？
【求助】raybiotech ELISA试剂盒怎么样?? 蛋白质和糖学技术讨论...123
K斐狗RGa12017-09-28
1
、
Cell-Based ELISA
的优点：
Cell-Based ELISA
（基于细胞的
ELISA
）是一种全新的
ELISA
技术，有两个最突出的优点：
1.1
不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并
进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
程度上偏离了实际情况。
同时不用包被微孔板，
简化了实验流程，
有助于提高效率。
科研人员在一个
96
孔
酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样
本的损失也能降到最低，比起其他普通的
ELISA
测定方法，这项全新的
ELISA
技术能更快速、更方便
地一次检测大量的细胞内蛋白。
1.2
可同时检测两种不同蛋白：
封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，
然后再加入不同的
二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此
外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数
量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。
2
、
Cell-Based ELISA
的两种技术：
某些公司发展了双通道
Cell-Based ELISA
技术；
双通道与单通道
Cell-based ELISA
比较：
双通道
cell-based ELISA
，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，
R&D Systems
提供的
Cell-based ELISA
就是双通道
cell-based ELISA
，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）；
单通道
cell-based ELISA
，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通
ELISA
的主要区别在于样品处理过
程
3
、
cell-based ELISA
的应用：
该产品，最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量；
4
、有
cell-based ELISA
产品的公司：目前，多家
elisa
产品提供
商均
提供
cell
based
elisa
试剂盒，
如
Rnd
systems
，
raybiotech
，
ebioscience
，
millipore
等公司；
5
、如何自己进行
cell based elisa
实验？
事实上，根据单通道的
cell based elisa
原理，可以自己建立
cell based elisa
实验系统；
细胞加入培养板中；
加入刺激物或者抑制剂进行培养；
对细胞进行固定或者封闭；
加入第一抗体；
加入
HRP
结合的二抗（二抗的选择，同
western blot
）；
加入底物进行显色；
、
Cell-Based ELISA
的优点：
Cell-Based ELISA
（基于细胞的
ELISA
）是一种全新的
ELISA
技术，有两个最突出的优点：
1.1
不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并
进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
程度上偏离了实际情况。
同时不用包被微孔板，
简化了实验流程，
有助于提高效率。
科研人员在一个
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孔
酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样
本的损失也能降到最低，比起其他普通的
ELISA
测定方法，这项全新的
ELISA
技术能更快速、更方便
地一次检测大量的细胞内蛋白。
1.2
可同时检测两种不同蛋白：
封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，
然后再加入不同的
二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此
外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数
量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。
2
、
Cell-Based ELISA
的两种技术：
某些公司发展了双通道
Cell-Based ELISA
技术；
双通道与单通道
Cell-based ELISA
比较：
双通道
cell-based ELISA
，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，
R&D Systems
提供的
Cell-based ELISA
就是双通道
cell-based ELISA
，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）；
单通道
cell-based ELISA
，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通
ELISA
的主要区别在于样品处理过
程
3
、
cell-based ELISA
的应用：
该产品，最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量；
4
、有
cell-based ELISA
产品的公司：目前，多家
elisa
产品提供
商均
提供
cell
based
elisa
试剂盒，
如
Rnd
systems
，
raybiotech
，
ebioscience
，
millipore
等公司；
5
、如何自己进行
cell based elisa
实验？
事实上，根据单通道的
cell based elisa
原理，可以自己建立
cell based elisa
实验系统；
细胞加入培养板中；
加入刺激物或者抑制剂进行培养；
对细胞进行固定或者封闭；
加入第一抗体；
加入
HRP
结合的二抗（二抗的选择，同
western blot
）；
加入底物进行显色；
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