USBIo全称United States BIOLOGical，位于麻省斯万普斯科特(Swampscott, MA)。全美**的抗原抗体和生化试剂供应商，目前向全球六十余个国家的科研工作者提供约50,000种抗体、抗原和生化试剂，以质量**闻名。主要产品种类包括：抗体、生化试剂、基因克隆相关产品、培养基、生长因子等细胞因子、分子生物学试剂。美国US Biological公司是生物化学和生物学试剂的专业生产商，产品服务于免疫学，分子生物学，分子遗传学，体外诊断，组织培养等科研领域。产品精确度高，质量稳定，产品数量巨大，提供70,000多种抗体、抗原和生化试剂等。
Usbio的生物化学品，抗体，重组蛋白，细胞培养基和分子生物学试剂盒几乎用于所有科学应用和环境，包括基因组研究，生物技术，药物开发和疾病诊断。USBio产品从经济实惠的研究数量到更大的批量可用于工艺开发和生产。我们的客户包括位于美国和国外的大多数*的制药和生物技术公司。
USbiological公司致力于以价值，诚信和真正的个人购买体验降低研究成本。USbiological的生物化学，抗体，重组蛋白，细胞培养基和分子生物学试剂盒几乎用于所有科学应用和环境，包括基因组研究，生物技术，药物开发和疾病诊断。产品可以从负担得起的研究数量到大批量用于工艺开发和生产。
USBio（UnitedStatesBiological，或简称USBiological）位于麻省斯万普斯科特(Swampscott,MA)。作为全美最大的抗原抗体和生化试剂供应商，USBiological目前向全球六十余个国家的科研工作者提供约150,000种抗体、抗原和生化试剂，以质量卓越闻名。主要产品种类包括：抗体、生化试剂、基因克隆相关产品、培养基、生长因子等细胞因子、分子生物学试剂。美国USBiological的产品服务于免疫学，分子生物学，分子遗传学，体外诊断，组织培养等科研领域。USBiological一直恪守“为您的研究减少成本”原则，提供高纯度、高品质的产品，并在大多数生化试剂、生物与培养基产品线上保持最高的性价比。USBiological的产品被广泛用于各种科学研究领域，包括基因组研究、生物技术、药物研发和疾病诊断等。USBiological的产品从小型科研级到生物制品大规模级规格均有提供。众多全球顶ji的生物制药和生物技术公司都在使用USBiological的高品质产品。
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大概步骤如下：c57小鼠大概六七只，酒精浸泡后不处死取出，迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕，冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
之后加入0.1％胰酶消化（之前浓度为0.25％，活细胞数量更少。）吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清，加入∥型胶原酶（0.1％）吹打10Min，放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化，800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
48h后只有少量（个位数）细胞贴壁，呈三角形。
第一次用0.25％胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
第二次胰酶浓度减小后没有，但细胞沉淀少，且为半透明微白。是不是离心时间不够。
感觉细胞整体状态都不好，几次都没有大量心肌细胞，更不用说观察到心肌细胞搏动。
老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
希望大神快点出现。
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
我做的临床试验，就想简单检测PBMC细胞的凋亡，上流式检测，有啥检测效果好的步骤推荐一下，谢谢
各位师兄师姐：
我近期负责的课题，需要进行人类血液淋巴细胞和DC细胞的分离和培养，但我在方面懂的不多，想求助这方面的大神们。后续我需要做RT-qPCR，western-blot、免疫荧光等实验，我应该去多少ml全血比较好？全血怎么保存？怎么进行分离？后续怎么培养和保存？
谢谢！
前辈们好，近期老板布置任务需要分离小鼠肝脏细胞，查了好多文献，都没有写胶原酶的cat#,只写sigma订购，想请教下，是否有人做过，可以提供下货号和使用方法吗？十分感谢。另外，文中还提到digitonin，如果有一起用到的话麻烦帮我查看下，谢谢。
近期根据经验总结了原代肿瘤细胞分离培养的2个关键因素。
1、组织的活性：如果我们取的都是坏死的组织或者结缔组织，我相信任何方法都不可能分离出来活的细胞的。另外，取完的组织要冷藏存放，并且越早分离越好，最好在24h内，最久不要超过48h。
2、组织的消化：在组织消化前，组织剪的越碎越好（1mm3左右为宜），组织的大小决定了组织的消化时间，不同组织消化时间差别较大：例如肺癌在2h-2.5h；食管癌在1个多小时。
希望可以帮到各位研友，另外如果大家有更好的经验可以一起来讨论！
请大神前辈指点指点，已经研三了，实验很不顺利，再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙，做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的？谢谢了！
最近在做黄体化颗粒细胞分离培养，但是注射器吸取大卵泡液或者从下颗粒细胞离心时就会凝固成果冻状，大家有碰到过这样的事情么？已经好几次了，一直是这样，大家给支个招吧
想用二步酶消法来分离毛乳头细胞，一个毛囊大概有多少个毛乳头细胞？处于生长期的毛囊在显微镜下有什么特点？先谢谢大神们指点
