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RayBiotech/Human Apelin EIA/1 Plate Kit/EIA-APC-1
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Antigen Information
Accession Number:
- Q9ULZ1
Gene ID:
- 8862
Gene Symbols:
- APEL
- APLN
Protein Name & Synonyms:
Apelin (APJ endogenous ligand) [Cleaved into: Apelin-36 Apelin-31 Apelin-28 Apelin-13]
Assay Format
Detection Range:
0.1-1,000 ng/ml
Recommended Dilution (serum & plasma):
Human: 2X / Mouse: 2X / Rat: 2X
Sensitivity:
15.8 ng/ml
Specificity:
This kit is designed to target the C-terminus of the 77-aa apelin peptide and therefore is expected to detect all active forms of Apelin including Apelin-36, Apelin-31, Apelin-28 and Apelin 13 can be detected.Cross Reactivity: This kit shows no cross-reactivity with any of the cytokines tested: Ghrelin, Nesfatin, and NPY.
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
- Human
- Mouse
- Rat
Compatible Sample Types:
- Cell Culture Supernatants
- Serum
Design Principle:
- Competition-based
Method of Detection:
Colorimetric
Quantitative/Semi-Quantitative:
- Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate
Product Specifications
Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit
Introduction
Apelin, an endogenous ligand for the G-protein-coupled APJ receptor, has been recently extensively studied in obesity research. It is not only expressed in adipocyte tissue, but also widely expressed in various other organs such as the heart, lung, kidney, gastrointestinal tract, brain, adrenal glands, endothelium, and human plasma.Apelin is derived from a 77-amino-acid prepropeptide that is cleaved into a 55-amino-acid fragment and then into shorter forms. The physiologically active form is thought to be apelin 36, although the pyroglutamylated form of apelin 13, which is also produced endogenously, is more potent.Studies have shown the association between apelin and obesity. Apelin has higher circulating levels in obesity. Insulin exerts a positive action on adipocyte apelin production. Apelin also regulates fluid homeostasis, playing an important role in the hypothalamic regulation of food and water intake, and pituitary hormone release.In addition to its role in obesity, apelin acts as a mediator of cardiovascular control, including for blood pressure and blood flow. It is one of the most potent stimulators of cardiac contractility yet identified, and plays a role in cardiac tissue remodeling. Apelin levels are increased in left ventricles of patients with chronic heart failure and also in patients with chronic liver disease.
Product Features
- Strip plates and additional reagents allow for use in multiple experiments
- Quantitative protein detection
- Establishes normal range
- The best products for confirmation of antibody array data
Application Notes
Kit Components
- Pre-Coated 96-well Strip Microplate
- Wash Buffer
- Standard Peptide
- Assay Diluent(s)
- Biotinylated Peptide
- HRP-Streptavidin
- TMB One-Step Substrate
- Stop Solution
- Assay Diagram
- Positive Control Sample
- Capture Antibody
- User Manual
Other Materials Required
- Distilled or deionized water
- Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
- Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
- 100 ml and 1 liter graduated cylinders
- Tubes to prepare standard and sample dilutions
- Orbital shaker
- Aluminum foil
- Saran Wrap
- Absorbent paper
- Microplate reader capable of measuring absorbance at 450nm
- SigmaPlot software (or other software that can perform four-parameter logistic regression models)
Protocol Outline
- Prepare all reagents, samples and standards as instructed.
- Add 100 µl detection antibody to each well.
- Incubate 1.5 h at RT or O/N at 4°C.
- Add 100 µl standard or sample to each well.
- Incubate 2.5 h at RT.
- Add 100 µl prepared streptavidin solution.
- Incubate 45 min at RT.
- Add 100 µl TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
- Incubate 30 min at RT.
- Add 50 µl Stop Solution to each well.
- Read plate at 450 nm immediately.
Storage/Stability
Standard, Biotinylated Apelin C-Terminus peptide, and Positive Control should be stored at -20°C after arrival. Avoid multiple freeze-thaws. The remaining kit components may be stored at 4°C. Opened Microplate Wells and antibody (Item N) may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack and reseal along entire edge.
- Najafipour H., Vakili A., Shahouzehi B., et al. Investigation of changes in apelin receptor mRNA and protein expression in the myocardium and aorta of rats with two-kidney, one-clip (2K1C) Goldblatt hypertension. J Physiol Biochem. 2015 Jun;71(2):165-75. doi: 10.1007/s13105-015-0394-zSpecies: RatSample type: Serum
- Sanchis-Gomar F., Alis R., Rampinini E., et al. Adropin and apelin fluctuations throughout a season in professional soccer players: Are they related with performance? Peptides. 2015 Aug;70:32-6. doi: 10.1016/j.peptides.2015.05.001Species: HumanSample type: Serum
- Gileles-Hillel A., Alonso-Alvares M., Kheirandish-Gozal L., Peris E., et al. Inflammatory markers and obstructive sleep apnea in obese children: The NANOS Study. Mediators of Inflammation. Accepted May 2014 http://www.hindawi.com/journals/mi/aip/605280/ [Epub ahead of print]Species: HumanSample type: Plasma
- Samy D., Ismail C., Deif A., et al. Induction of Apelin by Losartan in Renal Ischemia/Reperfusion Injury in Rats - Implication of Endothelial Nitric Oxide Synthase (eNOS) Phosphorylation. J Phys Pharm Adv 2014 , 4 (11): 465 - 477 DOI: 10.5455/jppa.20141117043349Species: RatSample type: Tissue Lysate
- Than A., Cheng Y., Foh LC., et al. Apelin inhibits adipogenesis and lipolysis through distinct molecular pathways. Mol Cell Endocrinol. 2012 Oct 15;362(1-2):227-41. doi: 10.1016/j.mce.2012.07.002. Species: MouseSample type: Conditioned Media
- Than A., Tee W., Chen P. Apelin secretion and expression of apelin receptors in 3T3-L1 adipocytes are differentially regulated by angiotensin type 1 and type 2 receptors. Mol Cell Endocrinol. 2012 Apr 4;351(2):296-305. doi: 10.1016/j.mce.2012.01.005Species: MouseSample type: Conditioned Media
- Najafipour H., Soltani Hekmat A., Nekooian A., Esmaeili-Mahini S. Apelin receptor expression in ischemic and non- ischemic kidneys and cardiovascular responses to apelin in chronic two-kidney-one-clip hypertension in rats. Regul Pept. 2012 Oct 10;178(1-3):43-50. doi: 10.1016/j.regpep.2012.06.006.Species: RatSample type: Plasma
- Geiger, K., et al. "Hypoxia induces apelin expression in human adipocytes."?Hormone and metabolic research?43.06 (2011): 380-385.Species: HumanSample type: Conditioned Media
- Hekmat, Ava Soltani, et al. "Cardiovascular responses to apelin in two-kidney?one-clip hypertensive rats and its receptor expression in ischemic and non-ischemic kidneys."?Regulatory peptides?172.1 (2011): 62-68.Species: RatSample type: Plasma
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2018-12-26
以兔软骨细胞为例：①一般根据实验要求，选取不同年龄组的兔子，实际上兔子的年龄越小越好，毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力，耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨，剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜，放入盛有PBS液的培养皿中。②将分离得到的软骨组织剁碎成 查看更多
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2021-07-25
细胞纯化可根据其大小、密度、表面荷电、吸附能力或表面抗原的差异而采用密度梯度沉降法、细胞电泳、贴附、亲和层析、花环形成、补体介导杀伤溶解以及流式细胞仪（FCM）等方法来进行纯化。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990） 查看更多
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2018-12-26
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2018-12-26
最近看大家常提到支原体污染，就翻了翻书，做了些笔记，现在贴出来和大家分享： 支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察 查看更多
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2021-08-28
细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。 一、Brachet反应一显示细胞内的DNA和RNA (一)原理 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中 查看更多
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2021-09-11
The wound healing assay allows the researcher to study cell migration and cell interactions. In some cases also single cell migration can be analyzed. This ass 查看更多
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2021-07-24
干细胞的分离纯化作者：裴雪涛,本实验来自「干细胞实验指南」 查看更多
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2021-08-14
1． 试剂：30％的醋酸，3只spectra/por管，HNP－3多克隆抗体，液氮2． 器械和设备：超声破碎仪，离心管，离心机，4度的冰箱，bicinchoninic酸蛋白测定系统，液氮仪，S－200HR柱，S－200HR柱，tricineSDS-PAGE,AU-PAGE及激光测定取来在COPD病人50毫升脓痰液超声 查看更多
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ProcedureTransfer 1.5 ml of liquid culture of yeast grown for 20 - 24 h at 30°C in YPD (1% yeast extract, 2% peptone, 2% dextrose) into a microcentrifuge tube. 查看更多
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本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。 查看更多
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2018-12-26
目前,尽管Alzheimer病(AD)的分子遗传学和分子生物学的研究中发现了4种与AD有关的基因,如APP的突变、AD3、STM2、ApoE等，但导致AD发病的关键机理尚不很清楚,而建立与之互为因果的真正AD模型尤为重要。本实验采用MR I、γ2刀立体定位射频热凝损毁老年猴脑的穹隆2海马伞,并通过检测其tau及APP 查看更多
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2021-09-04
MATERIALS:1. 1 X PBS (PBSAz, 1 X PBS, e.g., Irvine Scientific, CA, containing 2% newborn calf serum and 0.1% sodium azide)2. 7-Amino-actinomycin D (7-AAD, e.g 查看更多
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商品咨询
新生大鼠心肌细胞的分离和培养123
心sky2016-08-31
请大神前辈指点指点，已经研三了，实验很不顺利，再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙，做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的？谢谢了！
FicollPaque单个核细胞分离方法123
青霉素YY2016-11-28
刚买的分离液标本是人的为什么会有絮状物
乳鼠心肌细胞分离步骤(最新整理) 123
dxy_g7kz4xfw2017-03-25
这两天实验需要分离乳鼠心肌细胞，操作了两次，但是效果都不好。细胞不贴壁，大量漂浮死亡。我是新手，也没有人指导，只能自己查文献摸索条件，想跟各位老师请教一下，争取早点培养成功。
大概步骤如下：c57小鼠大概六七只，酒精浸泡后不处死取出，迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕，冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
之后加入0.1％胰酶消化（之前浓度为0.25％，活细胞数量更少。）吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清，加入∥型胶原酶（0.1％）吹打10Min，放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化，800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
48h后只有少量（个位数）细胞贴壁，呈三角形。
第一次用0.25％胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
第二次胰酶浓度减小后没有，但细胞沉淀少，且为半透明微白。是不是离心时间不够。
感觉细胞整体状态都不好，几次都没有大量心肌细胞，更不用说观察到心肌细胞搏动。
老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
希望大神快点出现。
大概步骤如下：c57小鼠大概六七只，酒精浸泡后不处死取出，迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕，冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
之后加入0.1％胰酶消化（之前浓度为0.25％，活细胞数量更少。）吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清，加入∥型胶原酶（0.1％）吹打10Min，放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化，800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
48h后只有少量（个位数）细胞贴壁，呈三角形。
第一次用0.25％胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
第二次胰酶浓度减小后没有，但细胞沉淀少，且为半透明微白。是不是离心时间不够。
感觉细胞整体状态都不好，几次都没有大量心肌细胞，更不用说观察到心肌细胞搏动。
老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
希望大神快点出现。
毛囊细胞高效分离培养方法的建立123
涵602wei2016-10-09
小鼠毛乳头细胞分离培养:一个毛囊大概有多少毛乳头细胞? 细胞...123
littlefishzb2016-05-30
想用二步酶消法来分离毛乳头细胞，一个毛囊大概有多少个毛乳头细胞？处于生长期的毛囊在显微镜下有什么特点？先谢谢大神们指点
细胞分离知识百科,细胞分离试验步骤,细胞分离说明书,细胞分离...123
blue66612017-05-09
前辈们好，近期老板布置任务需要分离小鼠肝脏细胞，查了好多文献，都没有写胶原酶的cat#,只写sigma订购，想请教下，是否有人做过，可以提供下货号和使用方法吗？十分感谢。另外，文中还提到digitonin，如果有一起用到的话麻烦帮我查看下，谢谢。
头痛,蛋白细胞分离,大神们,考虑是吗? 神经科学专业讨论版...123
小谈医生2017-08-10
人外周血单核细胞(PBMC)分离及培养123
baichimao2016-05-27
各位师兄师姐：
我近期负责的课题，需要进行人类血液淋巴细胞和DC细胞的分离和培养，但我在方面懂的不多，想求助这方面的大神们。后续我需要做RT-qPCR，western-blot、免疫荧光等实验，我应该去多少ml全血比较好？全血怎么保存？怎么进行分离？后续怎么培养和保存？
谢谢！
流式细胞仪细胞分选的操作步骤123
wangenjing2017-03-15
我做的临床试验，就想简单检测PBMC细胞的凋亡，上流式检测，有啥检测效果好的步骤推荐一下，谢谢
肝星状细胞的分离、培养及鉴定123
123reserch2017-06-03
经过无数次的大鼠肝脏插针灌注，忍受过实验结果不理想的打击和折磨，今天终于成功了，特分享些相关图片以鼓励还在奋战中的网友们。
【求助】求小鼠睾丸支持细胞分离经验_问答详情_细胞分离_细胞...123
hxy00222013-08-20
各位前辈，我现在要分离小鼠睾丸支持细胞进行培养，但是做了三次都没有贴壁，不知道问题出在哪，**指导！！！
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
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