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【讨论】对照品与标准品概念分析技术讨论版

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Growa5mlYPDO/Ncultureinoculatedwithasingleyeastcolonyat30deg.

Transferculturetoasmall13x100glasstube.Spindowncells2min.intabletopcentrifuge.Pouroffsupernatant.

Washcellswith5mlH₂O.Spindowncells2min.Pouroffsupernatant.Cellpelletcanbestoredat-20deg.

ResUSPendcellsin500ullysisbufferbyvortexing.

Addacid-washedglassbeads(400-500microns)toabout2mmbelowmeniscus.Vortex30sec.Add25ul5MNaCl.Vortex30sec.Spindown2min.todecreasefoam.

RemovelysedcellswithP1000atbottomoftubeandtransfertoa1.5mlmicrofugetube.

Add400ulofTE-saturatedphenol.Vortex.Spin4min.Transferupperphasetoaclean1.5mlmicrofugetube(~400ul).

Add400ulphenol:chloroform(4:1).Vortex.Spin4min.Transferupperphasetoaclean1.5mlmicrofugetube.

Add1ml95%EtOHandmix.Spin6min.PouroffEtOH.Washwith1ml70%EtOH.Vortex.Spin6min.PouroffEtOH.Drypelletinhoodorvacuum.

Resuspendin50ulTE(vortex,37deg.10min,vortex)

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发布于： 2021-08-03 阅读（222）

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