Clophosome®- Clodronate Liposomes (Neutral)
Clophosome®, neutral clodronate liposomes, offers highly efficient in vivo macrophagedepletion. Clodronate molecules are encapsulated in small MLV liposomes for superior activity, physical and chemical stability, and convenience of use. It is formulated to an exceptionally high clodronate/lipid ratio. Free clodronate is cleaned out and the liposomal clodronateencapsulation efficiency is more than 90%. Clophosome liposomes remain homogenous and suspended even after long term storage in fridge. It is not viscous and easy to inject.It is manufactured sterilefor long term shelf-life.
The product is suitable for dosing with various routes includingintravenous, intraperitoneal, subcutaneous, intranasal,intratracheal and etc. We have achieved 80-90% macrophage depletion in spleen (red pulp macrophages) 24 hours after a single 0.2 mL intravenous injection.A starting dose of 0.15 - 0.2 mL (i.v. or i.p.) for 20-25ganimal body weight is recommended for good consistency in macrophage depletion. Optimization is recommended for your specific applications.
Specifications
Product code: F70101C-N
Brand Name: Clophosome®
Active: clodronate disodium.CAS: 22560-50-5, 7 mg/mL
Lipid composition:phosphatidylcholine and cholesterol
Bulk solution: phosphate buffered saline (20mMsodiumphosphate, 09wt% NaCl), pH 7.0-7.5
Shelf-life: 6 monthsguaranteed for unopened vials at 2-8 degree C (guaranteed starting from the date of delivery, replacement only)
FormuMax科学公司位于加利福尼亚州北部硅谷的中心地带，是一家专业的药品配送公司，致力于满足医药/生物技术、化妆品和保健工业的配方开发外包的日益增长的需求。经营理念是成为**的伙伴，作为药物交付的***，特别是在制定具有挑战性的化合物脂质体和其他新的纳米技术。FormuMax拥有一支技术团队，在药物递送领域拥有***的专业知识，特别关注脂质体和其他基于脂质的技术。它们目前提供基础研究，配方可行性，定制配方准备，配方表征和分析科学的合同服务。FormuMax是**家提供大量预成型脂质体试剂的在线商店。已经成功地为来自世界各地的大学实验室、研究中心和各种行业的客户提供了服务和/或产品。
FormuMax供应主要产品：
Clophosome-氯膦酸盐脂质体
FormuMax提供两种预埋有氯磷酸盐分子的中性脂质体产品，该产品单次静脉或腹腔注射后可在脾脏经巨噬细胞清除率可达80-90%，并具有高度活性、稳定的理化性质（长期冰箱存放后仍保持均一性及悬浮特性），粘滞度低使用简便，适用于静脉、腹腔、皮下、鼻腔、气管等多种方式给药。
Doxoves-盐酸多柔比星脂质体
FormuMax可提供脂质定制的盐酸多柔比星脂质体（定制内容为脂质成分及脂质体大小）。FormuMax提供的产品为Doxoves，具有高度的产品稳定性和一致性,紧密的粒径分布和高效的药物包埋效率（高达4.0mg/mL(40mMlipid)的包埋药物浓度）。Doxoves系列产品在产品特性、稳定性及药代动力学特性上可媲美商业产品Doxil。
DrugLoadedliposomes
FormuMax提供多款包埋活性药物的脂质体产品，包括DoxorubicinHCl（含2.0mg/mL及4.0mg/mL两种浓度），IrinotecanHCl(2.0mg/mL)，TopotecanHCl(2.0mg/mL)，产品线仍在持续更新中。
预制脂质体
FormuMax供应的预制脂质体产品囊括多种通用的脂质体类型，使用世界*的优质脂类原料。该系列产品易于使用，稳定性、可靠性及可重复性高，节省时间和成本，并可为研究人员提供定制脂质体服务。目前FormuMax提供聚乙二醇化/非聚乙二醇化的常用脂质体，以及含浓度梯度Ammonium的脂质体
阳离子脂质体
FormuMax供应一系列的阳离子脂质体，用于需带正电荷的脂质体或细胞转染质粒DNA、反义/干扰RNA等。
荧光脂质体
FormuMax供应预制荧光标记的脂质体，包括常规荧光脂质体、生物素化的荧光脂质体以及Avdinized化的荧光脂质体，另外还提供客户定制的荧光脂质体（脂类及染料可选）。
脂质体制备薄膜
FormuMax供应一系列不同规格的聚碳酸酯薄膜，用于脂质体挤出制备。
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目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
不建议你用MDCK细胞，非常难转染。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级，因此只要这个结构仍然保持着，就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定，一些版本的GFP蛋白（如EGFP）甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性，因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的，一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构，即便细胞被固定了，仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹入内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
