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Signagen/GenMute siRNA Transfection Reagent for MEFs/SL100568-MEF/5 x 1.0 mL
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4000-520-616
Description:
GenMute
siRNA Transfection Reagent for MEFs is pre-optimized for transfecting siRNA to
Mouse Embryonic Fibroblasts (MEFs). MEFs are required to support the growth of undifferentiated mouse or
human ES cells, iPS cells, thus they are also called feeder cells. MEFs
are isolated from mouse embryos and are used at their early passages.
Before MEFs are used as feeder cells, they must be treated by
irradiation or mitomycin C to stop the cells from further dividing.
Refer to the following optimal transfection conditions for maximal silencing on
MEFs. GenMute reagent, 1.0 ml, is sufficient for ~833 transfections in 24 well plates or
~416 transfections in 6 well plates.
|
Summary of
Optimal Transfection Conditions: |
|
Storage:
Store at 4 °C. If stored properly, the product is stable for 12 months or
longer.
Data Sheet & Protocol
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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2019-01-28
河南佰柯生物科技有限公司在发布的293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging（293T细胞转染试剂(慢病毒包装)）供应信息，浏览与293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging（293T细胞转染试剂(慢病毒包装)）相关的产品或在搜索更多与293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging（293T细胞转染试剂(慢病毒包装)）相关的内容。 查看更多
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济南思科生物科技有限公司在发布的SignaGen转染试剂 for M-PAC Cells供应信息，浏览与SignaGen转染试剂 for M-PAC Cells相关的产品或在搜索更多与SignaGen转染试剂 for M-PAC Cells相关的内容。 查看更多
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2018-06-22
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著，是转染试剂选择的重 查看更多
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2021-08-04
北京英格恩生物科技有限公司在发布的RNA专用转染试剂-R4000供应信息，浏览与RNA专用转染试剂-R4000相关的产品或在搜索更多与RNA专用转染试剂-R4000相关的内容。 查看更多
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2019-04-07
脂质体介导的真核细胞转染实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高，重复性更好。 查看更多
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PurposeThe main purpose of the flow chamber assay is to visualize and measure interactions between flowing cells expressing a given adhesion molecule on their 查看更多
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2019-07-04
磷酸钙法细胞转染试剂是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Yeasen品牌的试剂，产品来源于Yeasen。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的磷酸钙法细胞转染试剂试剂销售服务商之一，在浦东新区等地方销售磷酸钙法细胞转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业磷酸钙法细胞转染试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的磷酸钙法细胞转染试剂产品 查看更多
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2021-09-23
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著，是转染试剂选择的重要依据，选试剂时要留意成分哦。严格来讲，转染的方法可以基于化学法、物理法（电穿孔、显微注射等）以及病... 查看更多
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2018-12-26
Preparation of the probe. Probes are prepared as Digoxigenin labelled RNA . The labelling mix as well as all antibodies are purchased from Boehringer All condi 查看更多
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2018-06-22
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著，是转染试剂选择的重要依据，选试剂时要留意成分哦。严格来讲，转染的方法可以基于化学法、物理法（电穿孔、显微注射等）以及病... 查看更多
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2019-03-03
北京裕恒丰科技有限公司在发布的内皮细胞转染试剂盒供应信息，浏览与内皮细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与内皮细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2020-01-06
北京裕恒丰科技有限公司在发布的成纤维细胞转染试剂盒供应信息，浏览与成纤维细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与成纤维细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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...Reagent/MIR 2704/ 0.4 ml _细胞转染_细胞研究_细胞相关_免疫在线123
医疗092017-10-02
看了一篇文献说，某某干预对SV40转染的人成纤维细胞有细胞毒性。不明白他想说明什么。#细胞生物学#
【求助】瞬时转染测周期,如何将细胞同步化? 核酸基因技术讨论版...123
神马4pF2017-10-02
我目前遇到的瞬时转染，没有专门做细胞同步化的。
但是有在转染前，将细胞进行重新传代的情况，这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1）接种在孔板中，于37℃， 5%CO2 的条件下进行培养，18-24小时（ sf9细胞为3-4小时）后转染。”
但是有在转染前，将细胞进行重新传代的情况，这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1）接种在孔板中，于37℃， 5%CO2 的条件下进行培养，18-24小时（ sf9细胞为3-4小时）后转染。”
沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法123
寂寞哥_05022017-10-02
可能有多种原因：目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；细胞贴壁转染之后没有正常换液。建议： 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统； 摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection； 对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
细胞能够同时转染两个靶基因吗 mir123
蘇荷‖tlmw↖2017-10-02
细胞转染可以：（1）真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志；（2）应用于转基因动植物；（3）应用于生物制药、基因治疗、RNA干扰。脂质体介导法实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
脂质体介导DNA转染法 实验方法 123
冷泪轩_韝2021-07-30
请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
细胞转染,有许多孔的细胞死了,什么原因? 分子生物 综合其他 小...123
福州吧壹母T漎2017-10-02
转染试剂有的毒性很大，要准时换液。可以换个低毒性的试试。或者你转染的东西有致死性。
求助:细胞转染相关问题 细胞技术讨论版论坛123
cannelchen2017-02-13
转染6孔板后,怎么收集我的细胞,然后提蛋白123
小隐刀侵182017-10-02
转染6孔板后，一般长到十的六次方级别就可以提蛋白了
可以用移液器将细胞吸出来并高速离心，沉淀重悬于PBS中洗涤，接着就可以裂解提取蛋白了。可以用超声，酶解等等，裂解后离心收集上清。
可以用移液器将细胞吸出来并高速离心，沉淀重悬于PBS中洗涤，接着就可以裂解提取蛋白了。可以用超声，酶解等等，裂解后离心收集上清。
脂质体转染时不加血清的原因 实验室综合讨论区 干细胞之家...123
驚嘆13312021-08-16
传统的转染试剂有一定的细胞毒性，在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如，阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的 磷酸基团 形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质，在转染过程中，带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附，影响转染效率。另外，使用脂质体等转染 试剂时，由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞，引发细胞毒性，导致转染效率降低，故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基，转染后 4-6h在更换成有血清培养基，这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性。
细胞转染,为什么有许多孔的细胞死了?_123
qingwudarao2021-07-27
【求助】293FT包装细胞可否用293T代替123
弑神ZS032021-07-25
现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。
做的比较好的，一般都是上海地区的，你可以看下基尔顿生物。
做的比较好的，一般都是上海地区的，你可以看下基尔顿生物。
GFP怎么转染细胞 本人新手,载体从哪来123
我爱金桥妹妹kq2017-10-02
细胞转染GFP质粒并进行表达之后，一般细胞内会有大量的GFP蛋白，可以发出绿色荧光。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级，因此只要这个结构仍然保持着，就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定，一些版本的GFP蛋白（如EGFP）甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性，因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的，一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构，即便细胞被固定了，仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级，因此只要这个结构仍然保持着，就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定，一些版本的GFP蛋白（如EGFP）甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性，因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的，一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构，即便细胞被固定了，仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
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