请使用支持JavaScript的浏览器! +,ELH-ACOT13-1, ELH-ACOT13-2, ELH-ACOT13-5, Q9NPJ3, Acyl-coenzyme A thioesterase 13 (Acyl-CoA thioesterase 13) (EC 3.1.2.-) (Thioesterase superfamily member 2) [Cleaved into: Acyl-coenzyme A thioesterase 13, N-terminally processed], ACOT13, THEM2, HT012//蚂蚁淘商城
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RayBiotech/Human ACOT13 ELISA/1 Plate Kit/ELH-ACOT13-1
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RayBiotech/Human ACOT13 ELISA/1 Plate Kit/ELH-ACOT13-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
ELH-ACOT13-1
美元价:
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数    量:
免费咨询热线
4000-520-616
Note:
This ELISA uses an antibody pair and standard that have been validated for multiplex array products, but not for the 96-well plate ELISA format. Thus, this ELISA requires a 4 - 7 week development phase, which RayBiotech begins after receiving an order for the kit. After development, the kit will have passed RayBiotech"s ELISA quality control tests, and will thereafter have a typical 1 - 2 day lead time for orders placed.

Antigen Information

Accession Number:
  • Q9NPJ3
Gene ID:
  • 55856
Gene Names:
  • ACOT13
  • HT012
  • PNAS-27
  • THEM2
Protein Name & Synonyms:
Acyl-coenzyme A thioesterase 13 (Acyl-CoA thioesterase 13) (EC 3.1.2.-) (Thioesterase superfamily member 2) [Cleaved into: Acyl-coenzyme A thioesterase 13, N-terminally processed]

Assay Format

Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Colorimetric
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit

Product Features

  • Strip plates and additional reagents allow for use in multiple experiments
  • Quantitative protein detection
  • Establishes normal range
  • The best products for confirmation of antibody array data

Application Notes

Kit Components
  • Pre-Coated 96-well Strip Microplate
  • Wash Buffer
  • Stop Solution
  • Assay Diluent(s)
  • Lyophilized Standard
  • Biotinylated Detection Antibody
  • Streptavidin-Conjugated HRP
  • TMB One-Step Substrate
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 µl volumes
  • Adjustable 1-25 µl pipettes for reagent preparation
  • 100 µl and 1 liter graduated cylinders
  • Tubes to prepare standard and sample dilutions
  • Absorbent paper
  • Microplate reader capable of measuring absorbance at 450nm
  • Log-log graph paper or computer and software for ELISA data analysis
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents, samples and standards as instructed in the manual.
  2. Add 100 µl of standard or sample to each well.
  3. Incubate 2.5 h at RT or O/N at 4°C.
  4. Add 100 µl of prepared biotin antibody to each well.
  5. Incubate 1 h at RT.
  6. Add 100 µl of prepared Streptavidin solution to each well.
  7. Incubate 45 min at RT.
  8. Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
  9. Incubate 30 min at RT.
  10. Add 50 µl of Stop Solution to each well.
  11. Read at 450 nm immediately.

Storage/Stability

The entire kit may be stored at -20°C for up to 1 year from the date of shipment. Avoid repeated freeze-thaw cycles. The kit may be stored at 4°C for up to 6 months. For extended storage, it is recommended to store at -80°C.

#Manual

#SDS

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公司介绍
公司简介
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细胞转染效率低!具有细胞毒性!实验条件摸索难,重复性不佳!如果您使用的是化学法细胞转染,一定不要错过本次分享。 细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展,转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目,各有千秋,然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的,成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著,是转染... 查看更多>
Altogen 细胞转染 试剂 代理 Altogen细胞转染试剂代理美国Altogen公司是细胞类型特异性,预优化转染试剂,转染试剂盒,生物分子细胞内转送的全球领先制造商。为了高效交付... 查看更多>
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转染试剂选择与介绍在选择转染方法时,需考虑您希望输送的运载物(DNA、RNA或蛋白质)以及您希望转染的细胞类型。您可通过下表选择Life Technologies™的各类阳离子脂质体转染试剂和Neon®转染系统.我们提供了各种DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA输送选择,让您可以对自己的结果更加自信. 卓越的输送效果—可转染多种类型的细胞 无毒性作用—您之所以能看到结果,是因为核酸存在,而不是因为试剂 需要的优化工作更少—针对大多数... 查看更多>
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我刚开始做转染,悬浮细胞,分别做过表达和敲减,看了很多文献,大都没有提及转染后是用转染的这同一批细胞同时做pcr,wb,cck8,凋亡,细胞周期;还是说这次转染只做pcr或wb,再转染一次做cck8或细胞周期。剩下的功能试验均同前,转染一次做一次?我养的是悬浮细胞,转染后做cck8这些功能试验前需要离心换液吗?跪谢解答!

无限稀释法,就是铺到96板的一个孔,然后倍数稀释下去,到最后就会有一个细胞的孔,还有就是细胞计数,然后再铺96孔,也会出现一个细胞,但是对于挑单克隆来说,我觉得没必要单个细胞,单个细胞也不容易长起来,虽然挑克隆可能是混转的,但是不会影响实验需求。
大家都是用什么方法挑选细胞单克隆的
单克隆:单克隆是指‘子代来源于一个母体.
细胞培养:细胞的大规模克隆.细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞.
单克隆一般常指动植物细胞的克隆,细胞培养一般是指动物、微生物等细胞的细胞克隆.
二者没有什么明显区别.单克隆在单克隆抗体制备中比较常见.其实是对骨髓瘤细胞的细胞培养.
悬浮细胞的转染方法:(以下内容转自生物帮资讯)
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
转染试剂有的毒性很大,要准时换液。可以换个低毒性的试试。或者你转染的东西有致死性。
需要连接到载体上才能转染受体细胞,载体可能是质粒或者病毒
高效率转染RAW 264.7细胞方法 123
生气的小菊花2016-07-19

本人研究生

heck293细胞,铺完板后,一共七块24孔板。发现有两块板的其中两个孔变黄,然后用脂质体试剂转染质粒(质粒浓度1600ng/ul)后细胞,溶液没有变黄。(一般正常情况下都会变黄)没变黄的孔里的细胞都没了。。。什么原因呢

各位版友求助,

我使用Hek293构建转染模型,瞬转5质粒,用lipo2000做转染体系。

转染48h,发现荧光较强的细胞都在爬片的边缘,比例十分少。是因为我添加试剂的手法不对吗。

同时也发现加入转染体系后细胞状态特别差。想问一下用lipo2000时可以用无双抗的10%FBSDMEM吗。我转染前6h现在用的是纯DMEM,不含FBS。


请各位大神帮忙

请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
质粒转染细胞后多久能提RNA做PCR
实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题。
我觉得只要是注意以下2点就可以了:
1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套。
2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的。
无论是小提还是大提我们都是用的日常型的,并没有刻意用转染级的,因为转染量大,去内毒素的操作太麻烦,损失太大。
您好,现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何,做的比较好的,还是上海这边的,你可以看下基尔顿生物,原代细胞培养,动物造模,整体课题外包。
个人经验,BHK、CHO是很常用的转染用细胞,而且跟抗体非特异性反应也不高。一般来说,大多数可传代细胞的转染效率都是可以的,还要考虑所用转染剂的类型。

不建议你用MDCK细胞,非常难转染。
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