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abfrontier/TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)/TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA), 250 U/R110B
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제품특징
□ 특징
● Uracil(U)을 많이 포함한 DNA 증폭에 최적
● Anti-Taq antibody를 이용한 hot-start PCR 효소로 비특이적 증폭 억제
● GC-rich target, AT-rich target 모두 효율적으로 증폭 가능
● 증폭 산물의 3＇말단에 A가 부가, 그대로 TA 클로닝에 사용 가능
□ 제품설명
TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)는 bisulfite 처리 후 Uracil을 많이 포함한 DNA를 주형으로 bisulfite sequencing이나 COBRA법 등의 분석을 위해 PCR 증폭시 최적인 PCR 효소이다. Bisulfite 처리를 한 DNA는 PCR 반응성에 변화가 있을 수 있지만, 본 효소는 마그네슘 농도나 dNTP 농도를 조정하여 증폭 효율, 반응 특이성을 조절할 수 있기 때문에, 지금까지 증폭할 수 없었던 타겟에서도 양호한 증폭을 실시할 수 있다.본 효소는 anti-Taq antibody를 포함한 hot-start PCR 효소이며, 고온 가열할 때까지는 anti-Taq antibody가 효소에 결합해 polymerase 활성을 억제하고 있기 때문에, PCR cycle 전의 mis-primming이나 primer dimer에서 유래되는 비특이적 증폭을 막을 수 있다. Anti-Taq antibody는 PCR 초기 DNA 변성 과정(initial denaturation)에서 변성되어 분리되므로, 별도의 변성 스텝을 설정할 필요가 없다.[주의] Bisulfite 처리한 DNA를 이용하여, 메틸화 특이적 PCR(Methylation Specific PCR: MSP) 분석을 할 경우에는 EpiScope MSP Kit(Code R100A/B)을 추천 한다.
□ 내용 (200 rxns)*
| 1. TaKaRa EpiTaq HS(5 U/μl) | 250 U |
| 2. 10×EpiTaq PCR Buffer (Mg2+ free) | 1 ml |
| 3. dNTP Mixture(각 2.5 mM) | 1.2 ml |
| 4. 25 mM MgCl2 | 1.2 ml |
* 반응용량 50 μl 기준 | |
□ 보존
- 20℃
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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2018-12-26
Grow 100 ml yeast cells in desired media overnight to an A600 of ~1.0 (0.6 to 1.2 works well). For growth in minimal media, 1 ml of a saturated overnight cultu 查看更多
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2021-06-03
原代细胞核酸转染仪所采用的技术是德国amaxa公司的Nucleofector™ 专利创新技术，其原理是采用独特的电场参数与细胞类型特异的转染溶液相结合的方法，直接将DNA转到细胞核内，即使是原代细胞（包括不分裂的血细胞或神经元），转染后2-4小时就能检测到转染基因的表达。转染效率高，操作简单方便。... 查看更多
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2018-12-26
用DAPI进行细胞染色DAPI的配置Stock solution of 1mg/ml in ddH2O; working solution of 0.25mg/ml to 50mg/ml in ddH2O or PGM. 1.Place sample on slide. 2.Add a few drops worki 查看更多
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2021-09-08
细胞转染效率低！具有细胞毒性！实验条件摸索难，重复性不佳！如果您使用的是化学法细胞转染，一定不要错过本次分享。 细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著，是转染... 查看更多
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2019-04-07
脂质体介导的真核细胞转染实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高，重复性更好。 查看更多
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2018-12-27
上海中乔新舟生物科技有限公司在发布的星形胶质细胞转染试剂盒供应信息，浏览与星形胶质细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与星形胶质细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2018-11-03
Altogen 细胞转染 试剂 代理 Altogen细胞转染试剂代理美国Altogen公司是细胞类型特异性,预优化转染试剂,转染试剂盒,生物分子细胞内转送的全球领先制造商。为了高效交付... 查看更多
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2021-08-12
上海钰博生物科技有限公司在发布的Trans-fect常见细胞系转染试剂供应信息，浏览与Trans-fect常见细胞系转染试剂相关的产品或在搜索更多与Trans-fect常见细胞系转染试剂相关的内容。 查看更多
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PurposeThe main purpose of the flow chamber assay is to visualize and measure interactions between flowing cells expressing a given adhesion molecule on their 查看更多
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2018-06-22
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著，是转染试剂选择的重 查看更多
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2020-01-06
北京裕恒丰科技有限公司在发布的成纤维细胞转染试剂盒供应信息，浏览与成纤维细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与成纤维细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-07-14
基因转染技术将特定的遗传信息传递到真核细胞 中，这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究，也推动了诊断和治疗方面的分子技术 发展，并使基因治疗 成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。... 查看更多
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常见问题
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转染后,细胞发生死亡怎么回事 123
KyoyaRB352017-10-02
可能有多种原因：
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
【求助】大鼠的什么细胞转染效率较高阿?急急急123
加菲9日1512021-08-06
个人经验，BHK、CHO是很常用的转染用细胞，而且跟抗体非特异性反应也不高。一般来说，大多数可传代细胞的转染效率都是可以的，还要考虑所用转染剂的类型。
不建议你用MDCK细胞，非常难转染。
不建议你用MDCK细胞，非常难转染。
细胞转染 123
忻忻相惜4582021-08-01
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。向左转|向右转
GFP怎么转染细胞 本人新手,载体从哪来123
我爱金桥妹妹kq2017-10-02
细胞转染GFP质粒并进行表达之后，一般细胞内会有大量的GFP蛋白，可以发出绿色荧光。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级，因此只要这个结构仍然保持着，就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定，一些版本的GFP蛋白（如EGFP）甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性，因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的，一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构，即便细胞被固定了，仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级，因此只要这个结构仍然保持着，就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定，一些版本的GFP蛋白（如EGFP）甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性，因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的，一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构，即便细胞被固定了，仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
求助:细胞转染相关问题 细胞技术讨论版论坛123
cannelchen2017-02-13
如何提高悬浮细胞转染效率？123
你莫愁3672017-10-02
悬浮细胞的转染方法：（以下内容转自生物帮资讯）
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
请教siRNA细胞转染效率问题 细胞技术讨论版论坛123
齐宗献2021-08-10
求助!!HAC15细胞转染用什么转染试剂转染效率高!!! 细胞技术讨论...123
蓝天98962021-08-17
U2OS 细胞转染 分子生物 干扰/敲除论坛学术科研互动平台123
盩羉2021-07-29
可以。常用脂质体转染法。
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹入内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹入内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。
脂质体转染时不加血清的原因 实验室综合讨论区 干细胞之家...123
驚嘆13312021-08-16
传统的转染试剂有一定的细胞毒性，在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如，阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的 磷酸基团 形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质，在转染过程中，带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附，影响转染效率。另外，使用脂质体等转染 试剂时，由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞，引发细胞毒性，导致转染效率降低，故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基，转染后 4-6h在更换成有血清培养基，这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性。
【求助】贴壁细胞转染后可传代吗? 细胞技术讨论版论坛123
静°14642021-08-14
可以传代。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
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