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Gibco/ExpiFectamine 293 Transfection Kit/For 50 L of culture/A14526
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4000-520-616
Description
TheExpiFectamine™293TransfectionKitisacorecomponentoftheExpi293™ExpressionSystem.ItisdesignedfortransienttransfectionofhighdensityculturesofHEK(humanembryonickidney)293cells.Thehigh-efficiency,cationic,lipid-basedtransfectionreagentandtransfectionenhancersaredesignedtopowerthehighestpossIBLelevelofproteinexpressionfromExpi293F™cellsculturedinExpi293™ExpressionMedium•DesignedspecificallyfortransfectionofhighdensitysUSPensioncellculture,withmatchingtransfectionenhancersthatboosttransfectionperformanceandproteinexpression
•Achievesproteinyields2-to10-foldhigherthanothertransfectionreagentsusedonhighdensity293cellcultures
•Employsthesametransientexpressionprotocolstypicallyusedincurrentlow-density293suspensionculturesystemstoeasilyswitchfromlowdensitysystemstothehighyield,highdensityExpi293™ExpressionSystem
•Providesrobustandreproducibletransfectionresults,givingusersgreaterconfidenceintheirresults
•Scaletransfectionsforculturevolumesoflessthan1mLtogreaterthan10liters,whilemaintainingequivalentvolumetricproteinyields
TheExpiFectamine™293TransfectionKitisspecificallydesignedtoworkwithExpi293F™cellsintheExpi293™ExpressionSystem.Thetransfectionkitconsistsofthecationiclipid-basedExpiFectamine™293ReagentandExpiFectamine™293TransfectionEnhancers1and2.Theenhancersareadded16to18hourspost-transfectiontoboosttransfection,cellviABIlity,andproteinexpression.TheprotocolforuseofExpiFectamine™293Transfectioncomponentsisverysimilartotransfectionprotocolsforothertransientexpressionreagents,suchas293fectinandFreeStyle™MAX.
ForResearchUseOnly.Notforuseindiagnosticprocedures.
Specifications
| CellType: | EstablishedCellLines |
|---|---|
| SampleType(Specific): | PlasmidDNA |
| Classification: | AnimalOrigin-Free, ChemicallyDefined, Protein-Free, Serum-Free |
| TransfectionTechnique: | Lipid-BasedTransfection |
| SerumCompatible: | No |
| CellLine: | Expi293F™ |
| ProductLine: | ExpiFectamine™ |
| ProductSize: | For1Lofculture |
| PurityorQualityGrade: | CellCultureGrade |
Contents&storage
2.7mL(3x0.9mL)ExpiFectamine™293Reagent
5mLExpiFectamine™293TransfectionEnhancer1
50mLExpiFectamine™293TransfectionEnhancer2
Sufficientfortransfectionof1Lofculture
Storeat+2°Cto+8°C
5mLExpiFectamine™293TransfectionEnhancer1
50mLExpiFectamine™293TransfectionEnhancer2
Sufficientfortransfectionof1Lofculture
Storeat+2°Cto+8°C
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-07-14
基因转染技术将特定的遗传信息传递到真核细胞 中，这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究，也推动了诊断和治疗方面的分子技术 发展，并使基因治疗 成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。... 查看更多
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2018-07-16
南京恩晶生物科技有限公司在发布的EnoGeneFec 2100 转染试剂供应信息，浏览与EnoGeneFec 2100 转染试剂相关的产品或在搜索更多与EnoGeneFec 2100 转染试剂相关的内容。 查看更多
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2021-06-03
原代细胞核酸转染仪所采用的技术是德国amaxa公司的Nucleofector™ 专利创新技术，其原理是采用独特的电场参数与细胞类型特异的转染溶液相结合的方法，直接将DNA转到细胞核内，即使是原代细胞（包括不分裂的血细胞或神经元），转染后2-4小时就能检测到转染基因的表达。转染效率高，操作简单方便。... 查看更多
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2018-12-26
YEPD (non-selection)-1% yeast extract-2% peptone-1.5% agar (if needed for plates)After autoclaving add glucose to 2% by adding 100 ml of 20% solution to each l 查看更多
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2021-08-20
2019年7月30日-...CIL公司,CDN标准品,quidel,repligen,Dextra,goldbio,exiqon探针,megazyme,macrocyclics,glenresearch,chrono-log,biolog试剂,rpeptide,zeptom... 查看更多
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2021-08-03
预优化DNA转染试剂是由上海新睿生物科技有限公司代理或销售的SignaGen品牌的试剂，产品来源于美国。上海新睿生物科技有限公司是中国最权威的预优化DNA转染试剂试剂销售服务商之一，在上海等地方销售预优化DNA转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业预优化DNA转染试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的预优化DNA转染试剂产品 查看更多
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2021-09-23
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著，是转染试剂选择的重要依据，选试剂时要留意成分哦。严格来讲，转染的方法可以基于化学法、物理法（电穿孔、显微注射等）以及病... 查看更多
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2021-07-17
SignaGen转染试剂的比较和特点 转染细胞广谱：转染几十种哺乳动物细胞和/或难转染细胞以及悬浮细胞 转染形式多样：转染DNA、mRNA、siRNA、miRNA、shRNA以及共转染DNA/RNA 转染技术优化提升：生物可降解聚合物的合成、增强型脂质体构建和PDCC优化技术等 转染试剂 转染的分子 特性 PolyJet™ 长DNA片段(<89kb... 查看更多
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2021-07-19
河南佰柯生物科技有限公司在发布的Transfection Reagent（DNA／RNA）（转染试剂）供应信息，浏览与Transfection Reagent（DNA／RNA）（转染试剂）相关的产品或在搜索更多与Transfection Reagent（DNA／RNA）（转染试剂）相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
1、pcDNA3.1＋-gD的线性化: pcDNA3.1＋使用说明书推荐了以下几个酶作为线性化酶(BglⅡ MfeⅡ Bst1107Ⅰ Eam1105Ⅰ PvuⅠ ScaⅠ SspⅠ),通过DNAMAN分析gD序列发现其带有MfeⅡ酶切位点。2、转染前一天,在60mm的dish中接种8×105个细胞,加入5ml培养基 查看更多
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上海中乔新舟生物科技有限公司在发布的平滑肌细胞转染试剂盒供应信息，浏览与平滑肌细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与平滑肌细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-07
SignaGen 是一家专注于开发和生产基因转导工具的企业，服务于生物医学研究领域。借助我们独有的技术平台（美国专利商标局号码为 072308 和 61135606），SignaGen 已经成功开发出三大类 DNA/siRNA 转染试剂，经验证我们的产品比市场上主导产品效率更高，细胞毒性更低。更重要的是我们提供一个合理的价位。 查看更多更新引用文献 more info Recent Product & Service Cit... 查看更多
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原代T细胞难转染?那是工具没选对 汉恒生物工程(上海)有限公司 公 ...123
saberEi2021-07-20
您好，现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何，做的比较好的，还是上海这边的，你可以看下基尔顿生物，原代细胞培养，动物造模，整体课题外包。
其次要看下你选择单位的规模如何，做的比较好的，还是上海这边的，你可以看下基尔顿生物，原代细胞培养，动物造模，整体课题外包。
高效率转染RAW 264.7细胞方法 123
生气的小菊花2016-07-19
本人研究生
细胞转染,有许多孔的细胞死了,什么原因? 分子生物 综合其他 小...123
福州吧壹母T漎2017-10-02
转染试剂有的毒性很大，要准时换液。可以换个低毒性的试试。或者你转染的东西有致死性。
【求助】贴壁细胞转染后可传代吗? 细胞技术讨论版论坛123
静°14642021-08-14
可以传代。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法123
寂寞哥_05022017-10-02
可能有多种原因：目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；细胞贴壁转染之后没有正常换液。建议： 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统； 摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection； 对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
请教siRNA细胞转染效率问题 细胞技术讨论版论坛123
齐宗献2021-08-10
【求助】求助啊!!!转染hek293细胞用什么转染试剂呢? 实验方法 ...123
jiang39672021-08-07
【求助】真核表达,基因克隆时是否要考虑3·端非翻译序列。123
sen4042021-08-09
细胞转染可以：（1）真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志；（2）应用于转基因动植物；（3）应用于生物制药、基因治疗、RNA干扰。
脂质体介导法
实验原理
上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。
利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
脂质体介导法
实验原理
上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。
利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
脂质体转染时不加血清的原因 实验室综合讨论区 干细胞之家...123
驚嘆13312021-08-16
传统的转染试剂有一定的细胞毒性，在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如，阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的 磷酸基团 形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质，在转染过程中，带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附，影响转染效率。另外，使用脂质体等转染 试剂时，由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞，引发细胞毒性，导致转染效率降低，故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基，转染后 4-6h在更换成有血清培养基，这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性。
求助!!HAC15细胞转染用什么转染试剂转染效率高!!! 细胞技术讨论...123
蓝天98962021-08-17
脂质体介导DNA转染法 实验方法 123
冷泪轩_韝2021-07-30
请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
转染后,细胞发生死亡怎么回事 123
KyoyaRB352017-10-02
可能有多种原因：
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
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