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Encapsula/Cellsome® – DOTAP-based/5-ml/CDP-501
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Encapsula/Cellsome® – DOTAP-based/5-ml/CDP-501
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Encapsula
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Plainliposomesareextensivelyusedasartificialcellmodelsandforstudyingtheinteractionofvarioustypesofmoleculessuchaspeptidesandproteinswiththesurfaceofthelipidmembranes.Plainliposomesarealsousedascontrolformulationsformanydifferenttypesofdrugencapsulatedliposomeformulations.Chargedliposomesarealsousedinmanydifferenttypesofbloodcomplementstudies.Plainliposomesareavailableinvariousanionic,cationicandneutralsurfacecharges.Plainliposomescanbeunilamellaror multilamellar.

DOTAPisapositivelychargedmoleculeandtheproductsinCellsome®-DOTAP-basedcataloguseDOPCasamatrixlipidandvariousamountsofcationicDOTAPlipidfrom0.5%to50%withvariouszetapotentials.IfyouarelookingforDOTAPbasedliposomesforgenedelivery,thenyouneedtoseetheGenesomeliposomecatalog.

IfyouarelookingforthecationicDOTAP-basedliposomesforDNA/RNAdelivery,pleasesee Genesome®liposomecatalog.

ThestructureofDOTAPmoleculewithacationicheadgroup.
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河南佰柯生物科技有限公司在发布的293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging(293T细胞转染试剂(慢病毒包装))供应信息,浏览与293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging(293T细胞转染试剂(慢病毒包装))相关的产品或在搜索更多与293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging(293T细胞转染试剂(慢病毒包装))相关的内容。 查看更多>
济南思科生物科技有限公司在发布的SignaGen转染试剂 for M-PAC Cells供应信息,浏览与SignaGen转染试剂 for M-PAC Cells相关的产品或在搜索更多与SignaGen转染试剂 for M-PAC Cells相关的内容。 查看更多>
细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展,转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目,各有千秋,然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的,成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著,是转染试剂选择的重 查看更多>
北京英格恩生物科技有限公司在发布的RNA专用转染试剂-R4000供应信息,浏览与RNA专用转染试剂-R4000相关的产品或在搜索更多与RNA专用转染试剂-R4000相关的内容。 查看更多>
脂质体介导的真核细胞转染实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高,重复性更好。 查看更多>
PurposeThe main purpose of the flow chamber assay is to visualize and measure interactions between flowing cells expressing a given adhesion molecule on their 查看更多>
磷酸钙法细胞转染试剂是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Yeasen品牌的试剂,产品来源于Yeasen。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的磷酸钙法细胞转染试剂试剂销售服务商之一,在浦东新区等地方销售磷酸钙法细胞转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业磷酸钙法细胞转染试剂仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的磷酸钙法细胞转染试剂产品 查看更多>
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Preparation of the probe. Probes are prepared as Digoxigenin labelled RNA . The labelling mix as well as all antibodies are purchased from Boehringer All condi 查看更多>
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2019-03-03
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看了一篇文献说,某某干预对SV40转染的人成纤维细胞有细胞毒性。不明白他想说明什么。#细胞生物学#
我目前遇到的瞬时转染,没有专门做细胞同步化的。

但是有在转染前,将细胞进行重新传代的情况,这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1)接种在孔板中,于37℃, 5%CO2 的条件下进行培养,18-24小时( sf9细胞为3-4小时)后转染。”
可能有多种原因:目标蛋白对细胞有毒性,导致细胞死亡;转染试剂以及DNA用量信息需要优化,否则对细胞具有伤害;细胞贴壁转染之后没有正常换液。建议: 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统; 摸索转染试剂以及DNA用量信息,如果转染试剂毒性太大,可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection; 对转染后的细胞进行换液处理,如果细胞状态感觉不够理想,可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。以上所有分析、建议的前提是,细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利,加油~
细胞转染可以:(1)真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志;(2)应用于转基因动植物;(3)应用于生物制药、基因治疗、RNA干扰。脂质体介导法实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性,因此脂质体与质粒的比例,细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题,通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂,它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物,是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
转染试剂有的毒性很大,要准时换液。可以换个低毒性的试试。或者你转染的东西有致死性。

求助:本人现在做细胞转染,具体实验包括转染目的基因后测MTT,凋亡,侵袭等水平差异,现在有个疑惑,如果MTT结果是促进增殖,那凋亡或侵袭结果的意义是否受其影响,比如同样数量细胞里这个组的凋亡少是否其侵袭能力就强,结果是凋亡少造成的还是有协同作用,如何避免干扰,还有转染后凋亡检测时间的选择,因为不是做的药物而是转染,应如何设置时间,78小时是否有意义?问的有点多,求大家耐心指导

转染6孔板后,一般长到十的六次方级别就可以提蛋白了
可以用移液器将细胞吸出来并高速离心,沉淀重悬于PBS中洗涤,接着就可以裂解提取蛋白了。可以用超声,酶解等等,裂解后离心收集上清。
传统的转染试剂有一定的细胞毒性,在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如,阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的 磷酸基团 形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。另外,使用脂质体等转染 试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基,转染后 4-6h在更换成有血清培养基,这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性。

heck293细胞,铺完板后,一共七块24孔板。发现有两块板的其中两个孔变黄,然后用脂质体试剂转染质粒(质粒浓度1600ng/ul)后细胞,溶液没有变黄。(一般正常情况下都会变黄)没变黄的孔里的细胞都没了。。。什么原因呢

现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。

做的比较好的,一般都是上海地区的,你可以看下基尔顿生物。
细胞转染GFP质粒并进行表达之后,一般细胞内会有大量的GFP蛋白,可以发出绿色荧光。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级,因此只要这个结构仍然保持着,就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定,一些版本的GFP蛋白(如EGFP)甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性,因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的,一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构,即便细胞被固定了,仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。