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Signagen/C9orf64 Adenovirus/Category: Ready to Package Adenovirus/
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Signagen/C9orf64 Adenovirus/Category: Ready to Package Adenovirus/
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Signagen
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ProductName:Chromosome9OpenReADIngFrame64,clonedintoourAd
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Promoter:CMV
StorageBuffer:DMEMwith2.5%BSA,2.5%glycerol
TurnaroundTime:5~6weeks

GeneInformation
GeneName:Chromosome9OpenReadingFrame64
NCBIAcc.#:NM_032307
GeneSymbol:C9orf64
GeneID:84267
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FusionTag:No

Customizedserviceisavailablewithotherpromoters(CAG,U6,H1,UBCorSynapsin)andreporters(GFP,mRFP,Luc,LacZ,etc).Pleaserequestaquotewithus.
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  凋亡扮演哪些重要的角色?凋亡,经常也说“细胞自杀”,对于身体各器官的发育和正常发挥功能来说非常重要,我们的身体需要清除一些不需要的、损伤的、可能有害的细胞。但是在某些情况下如癌症的发生,凋亡过程紊乱导致细胞不可控的存活及生长,或者另一种情况如心脏受袭导致凋亡过激而杀死了更多无辜的细胞。对于人类健康来说,这个过程如此重要,于是科学家们投入了大量的热情去了解不同的疾病环境下如何抑制或诱导凋亡。  什么诱导了一个细胞的凋亡?突然消除了... 查看更多>
细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。 查看更多>
美国Trevigen公司细胞凋亡、侵袭、彗星试剂、3D细胞培养等产品火热促销中,最低5折起,还有精美小礼品,欢迎选购,Trevigen中国总经销商----深圳市纽邦生物公司为答谢广大客户一直以来的支持与厚爱,特对旗下细胞凋亡、侵袭、彗星试剂、3D细胞培养等产品推出促销活动,限时不限量,欢迎选购!想要了解更多产品信息,请登录trevigen官方网站或者联系其授权总经销商--深圳市纽邦生物科技有限公司,咨询具体产品价格及货期。 查看更多>
biotium公司提供的细胞凋亡、坏死、细胞活性检测常见方法,内含实验数据及图片等,适合于准备做细胞凋亡坏死及细胞定量的同志们下载学习。 ... 查看更多>
很多时候,我的体会,我们会分不清浓缩核,比如分裂后期、分裂末期的核。有时候会误认为是凋亡,所以有必要分清楚。一般认为最大的 查看更多>
I. Protocol1. Harvest cellsOptional: wash plate with 37°C PBS (gently, so as not to lose cells); check on microscope,after aspirate PBS or mediaPlace plate on 查看更多>
细胞凋亡检测可以:(1)用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究;(2)应用于临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。 查看更多>
南京建成生物工程研究所在发布的细胞凋亡检测供应信息,浏览与细胞凋亡检测相关的产品或在搜索更多与细胞凋亡检测相关的内容。 查看更多>
相关事件及检测1、细胞凋亡早期检测:1)PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测(PS 外翻)2)细胞内氧化还原状态改变的检测(谷光氨肽减少)3)细胞色素C 的定位检测4)线粒体膜电位变化的检测(膜电位下降)2、细胞凋亡晚期检测:核酸内切酶在核小体之间剪切核 DNA,产生大量 DNA 片段1) TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口末端标记)2) LM-PCR Ladder(连接介导的 PCR 检测)3) Telemera... 查看更多>
1) Aliquot 5 X 106 total cells in 5-8 ml 2% media.2) Add 30 µl 3H-thymidine.3) Incubate for approximately 16 hours under normal growth conditions.4) Spin 查看更多>
根据调亡形态学特征的检测方法一、普通光学显微镜观察方法1)苏木素-伊红染色(HE染色法)石蜡组织切片的HE染色1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75 查看更多>
ELISA试剂盒接收到凋亡信号后, 核基质蛋白(NMPs)释放。NMP的释放与细胞死亡相,MERCK的Cell Death Detection(NMP) ELISA可定量检测细胞培养上清中的NMP水平变化。此种检测方法优于其它方法的原因在于 查看更多>
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CCK8试剂盒细胞凋亡检测的创举,MTT法被彻底抛弃,现附上一篇应用engreen生物的CCK8试剂盒研究黄酮和单宁通过通过线粒体和p53信号通路诱导人肺腺癌细胞凋亡的文献,以供参考。



hinaL.RhizomeInduceApoptosisViaMitochondrialPathwayandMDM2-p53SignalinginHumanLungAdenocarcinomaCells.pdf(8891.03k)

做CCK8很多次了,每次96孔板五个梯度的药物浓度OD值波动很大,同一块板子不同时间1.2.3.4h趋势都不同,浓度梯度和结果很乱,很是困惑,MTT做出一次,这个是6个复孔取平均值做的趋势图,五个点从左到右是由高浓度到低浓度,希望大神帮忙,

之前一直做的是四氯化碳引起的小鼠肝组织急性损伤石蜡切片,买的是50t的试剂盒,做了四组重复,中间有一组结果较不好,又买了20t的试剂盒做重复,但是再也做不出来,后面换了DAB,结果还是不理想,DAB显色已经延长至8个小时,才有细微的显色,所有实验条件跟之前保持一样!求大神
方式不同:凋亡是突然死亡,程序性死亡是渐进性死亡。
诱因不同:凋亡是受外因,细胞程序性死亡是受内因。
意义不同:凋亡是为了机体健康,意义积极。程序性死亡是顺应基因突变,意义消极。
细胞凋亡呈现出特征性形态学变化,主要包括细胞皱缩、染色质凝集、凋亡小体形成、细胞骨架解体等,其中以胞核的变化最为显著;细胞凋亡时细胞的生化改变具有复杂性和多样性,包括DNA片段化、多种蛋白酶控制、胞浆Ca2+持续升高、pH的变化、线粒体在细胞凋亡中起重要作用。
求助细胞凋亡通路图 123
雨后8232021-07-22
请问这种像煎蛋一样的细胞形态是凋亡吗?

请问一下大家,如果想做流式细胞仪检测细胞凋亡情况,请问细胞应该接种在多大的孔板上

一、形态学观察方法
  1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。
  2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。
  3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。
  4、透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。

  二、DNA凝胶电泳
  (一)检测原理
  细胞发生凋亡或坏死,其细胞DNA均发生断裂,细胞内小分子量DNA片断增加,高分子DNA减少,胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间,出现180-200bpDNA片断,而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断,利用此特征可以确定群体细胞的死亡,并可与坏死细胞区别。

  (二)结果判断
  正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状(LADDER)条带;坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。

  三、酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定
  凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成,可由ELISA法检测。

  (一)检测步骤
  1、将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体;
  2、在微定量板上吸附组蛋白体;
  3、加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合;
  4、加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合;
  5、加酶的底物,测光吸收制。

  (二)用途
  该法敏感性高,可检测5*100/ml凋亡细胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。该法不需要特殊仪器,适合基层工作,但是不能精确测定凋亡细胞发生的绝多对量。

  四、流式细胞仪分析
  (一)检测原理
  细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。

  (二)应用价值
  流式细胞仪检测具有以下特点:
  1)、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确
  2)、可以做许多相关性分析
  3)、结合被检测细胞的DNA含量的分析,可确定凋亡的细胞所处的细胞周期

  ■检测形态学及细胞膜完整性的Hoechs-PI双染色法
  细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性液增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间,利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪检测细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。
  利用Hoechs-PI染色法,正常细胞对染料有抗拒性,荧光染色很浅,凋亡细胞主要摄取Hoecha染料,呈现强蓝色荧光,而坏死细胞主要摄取碘化丙啶(PI)而呈强的红色荧光。

  ■DNA片断原位标记法
  凋亡细胞DNA片断原位末端检测技术是指在细胞(或组织)结构保持不变的情况下,用荧光素、地高辛或生物素标记的脱氧尿三磷酸(deoxyuridinetriphate,DUTP)和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)相反应与凋亡细胞裂解后3.的羟基(-OH)端结合,经显色反应后检测DNA裂解点的技术。

  DNA片段原位标记法有二种:
  1、原位缺口转移(in situ nick-translation,ISNT)技术,它是利用DNA多聚酶I将标记的核苷酸连接到断裂DNA的3-OH端
  2、原位缺口末端标记技术(in situ end labelling technique,ISEL),即TUNEL法,它是利用TdT将标记的DUPT接到3-OH端。研究证明,TUNEL法的敏感性远高于ISNT,尤其对早期凋亡的检测,TUNEL为合适。

  ■检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法
  1、原理:在细胞凋亡早期位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)迁移至细胞膜外测。磷脂结合蛋白V(Annexin V)是钙依赖性的磷脂结合蛋白,它于PS具有高度的结合力。因此,Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外测的磷脂酰丝氨酸。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V,将Annexin V标记上荧光素(如异硫氰酸荧光素FITC),同时结合使用PI拒染法(因坏死细胞PS亦暴露于细胞膜外测,且对PI高染)进行凋亡细胞双染法后用流式细胞仪即可检测凋亡细胞。

  2、结果判断:正常活细胞Annexin V 、PI均低染;凋亡细胞Annexin V高染、PI低染;坏死细胞Annexin V/PI均高染。

  3、应用价值:细胞发生凋亡时,膜上的PS外露早于DNA断裂发生,因此Annexin V联合PI染色法检测早期细胞凋亡较TUNEL法更为灵敏。又Annexin V联合PI染色不需固定细胞,可避免PI染色因固定造成的细胞碎片过多及TUNEL法因固定出现的DNA片段丢失。因此,Annexin V联合PI法更加省时,结果更为可靠,是最为理想的检测细胞凋亡的方法。
主要是:细胞变圆,染色质凝聚、分块,胞质皱缩.之后整个细胞通过发芽、起泡等方式形成一些 球形的突起,并在其基部绞断而脱落形成大小不等的内含胞质、细胞器及核碎片的凋亡小体,然后被周围细胞所吞噬.
其他的特征是:1.由基因控制,2,不引起炎症.3.质膜不破裂,4,染色质DNA的有控裂
常用细胞凋亡检测方法123
dxy_8mvqw9762017-06-21

细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。


一、细胞凋亡的形态学检测


根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。


1光学显微镜和倒置显微镜


(1)未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。

贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。


(2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割

成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。


2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜


一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。


常用的DNA特异性染料有:HO33342(Hoechst33342),HO33258(Hoechst33258),DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。


Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。


DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5~1mg/ml。


结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;Ⅱb期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体(图1)。


3透射电子显微镜观察


 结果评判:凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期(pro-apoptosisnuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构(图2);Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。

请问AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒用哪个牌子好呢?
Kerr( 1972)最先提出凋亡的概念,与细胞坏死的区别是:①细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体;②凋亡小体内有结构完整的细胞器; ③不引起炎症;④线粒体无变化,溶酶体活性不增加;⑤内切酶活化,DNA有控降解,凝胶电泳图谱呈梯状;⑥凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。
  细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)是一种基因指导的细胞自我消亡方式。PCD和细胞凋亡的区别在以下方面:PCD是功能性概念,凋亡是形态学概念;PCD的最终结果是细胞凋亡,但细胞凋亡并非都是程序化的;PCD存在于胚胎发育过程中。