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ZYMO RESEARCH/Quick-DNA Fungal/Bacterial 96 Kit/D6006
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ZYMO RESEARCH/Quick-DNA Fungal/Bacterial 96 Kit/D6006
品牌 / 
ZYMO RESEARCH
货号 / 
D6006
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Easily isolate DNA from tough-to-lyse fungi and bacteria.
Highlights

  • Boost Detection: Included BashingBeads ensure complete lysis of tough-to-lyse samples.
  • Ultra-Pure: Ready for qPCR, Next-Gen Sequencing, arrays, etc.
  • Simple: Fastest high-throughput workflow (≤ 40 minutes).
Description

The Quick-DNA Fungal/Bacterial 96 Kit is designed for the simple and rapid isolation of DNA from tough-to-lyse fungi, including A. fumigatus, C. albicans, N. crassa, S. cerevisiae, S. pombe, as well as Gram (+/-) bacteria, algae, and protozoa. The procedure is easy and can be completed in minutes: fungal and/or bacterial samples are rapidly and efficiently lysed with our state of the art, ultra-high density BashingBeads. Zymo-Spin column technology is then used to isolate the DNA that is ideal for downstream molecular-based applications including PCR, array, etc.


Applicable ForAll sensitive downstream applications such as qPCR and Next-Generation Sequencing.
Elution Volume≥ 25 µl
EquipmentCentrifuge with microplate carriers, 96-well plate/block disruptor or pulverizer.
Processing Time≤ 40 minutes
Processing Volume≤20 mg (wet weight) fungi or bacteria, 2x108 bacterial cells, 2x107 yeast cells, or2x107 mammalian cells
PurityTypical A260/A280 & A260/A230 ≥ 1.8
Sample SourceFungal and bacterial cell cultures, spores, pollen, nematodes, as well as other microorganisms can also be sampled.
Size RangeCapable of recovering genomic DNA sized fragments from up to and above 40 kb. Typical fragment sizes range from 25 kb - 35 kb. If present, parasitic and viral DNA will also be recovered.
TypeTotal DNA
Yield≤ 5 µg total DNA

Q1: My lysate seems viscous. What is causing this to happen? How can I fix this?

A viscous sample can indicate incomplete sample lysis. Try using less of your sample and optimize bead beating conditions (duration, speed, time) to ensure samples are thoroughly lysed. After bead beating, pellet the cell debris before moving on. Adding more Genomic Lysis buffer to the lysate can help dilute and deproteinate the sample, making the sample less viscous and more suitable for DNA recovery.

Q2: Is it necessary to add beta-mercaptoethanol? Can this step be substituted or omitted?

Addition of beta-mercaptoethanol is recommended to enhance sample lysis, but can be substituted with dithiothreitol (DTT, final concentration of 10 mM). However, if bead beating is optimized and lysis is efficient, the addition of BME is not necessary and can be omitted.

Q3: When can an RNase A treatment be implemented in the protocol?

No additional RNase A treatment is required when processing samples within kit capacity. The selective chemistry allows for binding of double stranded DNA to the column and for RNA to flow through.



Cat #NameSizePrice
S6002-96-3ZR-96 BashingBead Lysis Rack0.5 mm & 0.1 mm$192.00
C2003Elution Plate2 Plates$19.00
C2002Collection Plate2 Plates$22.00
C2001Silicon-A Plate2 Plates$129.00
P1001-296-Well Block2 Blocks$18.00
C2007-496-Well Plate Cover Foil4 Foils$10.00
D6001-3-40BashingBead Buffer40 ml$29.00
D3004-5-50DNA Pre-Wash Buffer50 ml$26.00
D3004-1-150Genomic Lysis Buffer150 ml$73.00
D3004-2-100g-DNA Wash Buffer100 ml$30.00
D3004-4-10DNA Elution Buffer10 ml$14.00
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Sections of paraformaldehyde fixed, OCT-embedded vascular tissue are sectioned at 7 to 10 mm and stored, desiccated at -70°C until needed. Thaw slides immediat 查看更多>
基本原理NK 细胞克隆来源于NK 细胞,该细胞的分离方法参见第一节之四。这些NK 细胞与经γ射线照射的饲养细胞苓而获得的NK 细胞克隆。试剂和材料● 植物血凝素(PHA)母液为100μg/ml● 重组IL-2(rIL-2)母液为105u/ml,分装小瓶(0.5ml/瓶),置-20℃长期保存,或置4℃下短期存放。应避免 查看更多>
一、材料和方法1. 材料(1)材料取自当年带芽茎段为外植体,采自哈尔滨市农业科学院宿根花卉园。(2)培养基以MS 为基本培养基,附加 查看更多>
上海锐赛生物技术有限公司在发布的细胞增殖活性实验(CCK-8)供应信息,浏览与细胞增殖活性实验(CCK-8)相关的产品或在搜索更多与细胞增殖活性实验(CCK-8)相关的内容。 查看更多>
Estimating Mitochondrial Mass,可以用于线粒体肿胀的检测Accurate measurements of mitochondrial mass require a probe that will accumulate in mitochondria regardless of the mi 查看更多>
Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础,具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证,包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选,能够实现各种细胞功能的分析: 查看更多>
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BrdU标记法1.细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4% FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期。2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。3.弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。4.甲醇/醋酸固定10min。 查看更多>
上海信帆生物科技有限公司在发布的MTT细胞增殖-毒性检测(MTT Assay)试剂盒供应信息,浏览与MTT细胞增殖-毒性检测(MTT Assay)试剂盒相关的产品或在搜索更多与MTT细胞增殖-毒性检测(MTT Assay)试剂盒相关的内容。 查看更多>
通善 CCK-8细胞增殖检测技术服务 实验技术服务基因组DNA提取服务项目材料要求服务价格获得DNA量周期细菌基因组DNA提取对数生长期的新鲜菌液1-2ml50元/样品1-2ug1-2周细胞基因组DNA提取1×106新鲜或冻存的细胞50元/样品≈10ug1-2周血液基因组DNA提取1ml新鲜或液氮冻存的样本50元/样品≈10ug1-2周组织基因组DNA提取100mg新鲜或-20度冻存的样本50元/样品≈10ug1-2周服务项目材料要求服 查看更多>
Method: Lymphoblastoid Cell Lines from Frozen Whole BloodMay 31, 1990 Rosalie Veile Purpose: Blood Samples can be stored frozen as a backup in case an LCL is n 查看更多>
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细胞集落形成实验
非整倍体无限细胞系和癌细胞株中,仍然存在不同细胞亚群,它们的功能和生长特点有些差异,其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力,细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞,细胞遗传性状、生物学特性相似,利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系,细胞集落率很低。细胞集落化培养之前,应先测定细胞集落形成率,以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。
目前认为仅有肿瘤干细胞具有形成集落的能力,集落抑制率常用于抗癌药物敏感试验、肿瘤放射生物学试验。
集落抑制率=(1-(实验组集落形成率/对照组集落形成率))×100%
(一)原理
细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。
(二)实验用品
1.材料:Hela细胞。
2.器材:(直径 60mm )培养皿、细胞记数板、烧杯、吸管、离心机、离心管、废液瓶、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、水浴锅。
3.试剂:Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞培养液、安尔碘、琼脂。
(三)方法
1.平板克隆形成试验
本法适用于贴壁生长的细胞,包括培养的正常细胞和肿瘤细胞。
(1)对指数生长期细胞,采用常规消化传代方法,制成细胞悬液。
(2)细胞悬液反复吹打,使细胞充分分散,单个细胞百分率应在95%以上。细胞记数,并用培养基调节细胞浓度,待用。
(3)根据细胞增殖能力,将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿(直径 60mm )中,以十字方向轻轻晃动培养皿,使细胞分散均匀。
(4)培养皿置 37℃ 、5%CO2中培养2~3周,中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。
(5)当培养皿中出现肉眼可见克隆时,终止培养,弃去培养液,PBS液小心浸洗2次,空气干燥。甲醇固定15分钟,弃甲醇后空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟,流水缓慢洗去染液,空气干燥。
2.软琼脂集落形成试验
本法适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。利用琼脂液无粘着性又可凝固的特性,将肿瘤细胞混入琼脂液中,琼脂液凝固使肿瘤细胞置于一定位置,琼脂中肿瘤细胞可能向周围作全方位的移动,因此可以用来检测肿瘤细胞的主动移动能力。肿瘤细胞在适宜培养基中又可以增殖,从而可以测定肿瘤细胞克隆形成率。造血系统软琼脂集落形成试验方法相同,主要用于有关细胞分化的研究,但使用培养基不同。
细胞增殖的意义:
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。

解析:细胞增殖是重要的细胞生命特征。
细胞增殖,比如以有丝分裂的方式增殖,产生的是相同的细胞。
细胞分化,产生的是不同的细胞,例如造血干细胞可以分化出红细胞。

1,如果加入的药物中含有金属,是否会有影响?

金属对CCK-8显色有影响。当终浓度为1Mm的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10Mm的话,将会100%抑制。

2,CCK-8试剂的保存条件?

在避光条件下CCK-8试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话,推荐在-20℃下保存。但是CCK-8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收,从而影响检测结果,若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。

3,预培养后,更换培养基需要细胞计数吗?

一般情况下用胰蛋白酶处理对数增长期的细胞,用血球计数盘计数,制备成一定浓度的细胞悬液即可。如果想要精密计数细胞的话,可以预培养后取培养基用血球计数盘进行计数。

4,CCK-8对于不同的细胞,灵敏度是否一样?

不一样,悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于贴壁细胞,一般加入CCK-8培养1-4小时吸光度已经很高,但对于悬浮细胞则可能吸光度较低,可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决。

5,悬浮细胞和贴壁细胞在数量上有何区别?

悬浮细胞由于染色比较困那,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。贴壁细胞染色比较容易,若细胞数量过大,有时吸光度会超过酶标仪的读数。

6,应该每次做标准曲线吗?

建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样,对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样,灵敏度可能会有轻微的差异,对于不同的批号建议分别做标准曲线。

7,有时在药物作用情况下,细胞已经死亡,但是脱氢酶的活性还在,是否能计算细胞数量?

不能。由于CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量,建议采用别的方法测定。

8,实验之前,是否需要先检测一下培养基和CCK-8是否会反应?

需要,可用一个孔检测一下,因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质,在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK-8是否反应。一般正常在的OD值应该在0.4以下。

9,如果OD值太低,可以采取什么办法?

可以采取2个办法:①适当增加细胞数量。②延长加入CCK-8试剂后的染色时间。

以上内容来自英格恩生物CCK8试剂盒

从细胞增殖角度看,细胞可分三类:
①持续分裂细胞,又称周期性细胞, 即在细胞周期中连续运转的细胞。机体内某些组织需要不断的更新,组成这些组织的细胞就必须通过不断分裂产生新细胞。此类细胞的分裂周期非常正常, 有丝分裂的活性很高。如性细胞(包括卵母细胞和精原细胞),它们要不断地产生配子; 造血干细胞需要不断地产生红细胞和白细胞;上皮基底层细胞需要通过分裂不断补充表面老化死亡的细胞; 植物的根茎尖端细胞需要通过分裂进行生长等都是具有正常周期的持续分裂细胞。
②终端分化细胞, 即永久性失去了分裂能力的细胞,它们不可逆地脱离了细胞周期, 但保持了生理活性机能。这些细胞都是高度特化的细胞, 如哺乳动物的红细胞、神经细胞、多形性白细胞、肌细胞等, 这些细胞一旦分化,就永远保持这种不分裂状态直到死亡。
③G0细胞,又称休眠细胞,暂时脱离细胞周期,不进行DNA复制和分裂, 也称静止细胞群。但这些细胞可在某些条件的诱导下重新开始DNA合成, 进行细胞分裂。如肝细胞, 外科手术切除部分肝组成后可以诱导进入细胞分裂。淋巴细胞可通过与抗原的相互作用诱导增殖。在胚胎发育早期(卵裂期),所有的细胞均为周期性细胞, 以后随着发育成熟, 某些细胞进入了GO期, 某些细胞分化后丧失分裂能力。到成体时,只有少数细胞处于增殖状态, 它们的增殖仅作为补充丢失的细胞, 或对外界刺激的反应。
ki67检测细胞增殖包含细胞分裂哪个期
Ki67,在很多肿瘤病理中做,它是判断肿瘤细胞增殖情况的一个指标,越高表示正在肿瘤细胞增殖多,恶性程度越高。P16,是一个抑癌基因,直接作用于细胞周期、抑制细胞分裂的基因,细胞内P16蛋白减少,会引起细胞周期调节紊乱,使细胞无限制增生,甚至癌变。
ki67是什么 Ki67是一种增殖细胞相关的核抗原,其功能与有丝分裂密切相关,在细胞增殖中是不可缺少 ,但其确切机制尚不清楚. Ki67标记的是处于增殖周期中的细胞。该标记阳性率越高,肿瘤生长越快,组织分化越差,对化疗也越敏感。一般来说,预后较差。
细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去。可见,细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础
T细胞快速增殖方法123
gwenye2017-04-07

比如用CD3、CD28刺激,除了这个还有什么方法吗?增殖!

and还想问问用CD3、CD28刺激是不是所有T细胞都能增殖?


细胞增殖123
太叔幼凝2021-08-06
意义:细胞以分裂的方式进行增殖,细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。
方式:真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种最为普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂。向左转|向右转
A、甲胎蛋白是一种糖蛋白,正常情况下,这种蛋白主要来自胚胎的肝细胞,成人中含量很少,但肝癌病人的甲胎蛋白含量升高,故可用于肝癌的检测,A错误;
B、癌胚抗原为肠癌组织产生的一种糖蛋白,故可用于癌细胞的检测,B错误;
下、癌细胞表面糖蛋白减少,故可用于检测细胞癌变的证据,下错误;
D、癌细胞的磷脂分子未发生变化,故不能用于检测细胞癌变的证据,D正确.
应该说必修一《细胞增殖》是很难上的一节课,最近听了一位年轻老师的课——细胞增殖,教学目标达成,教学设计和过程科学合理,即导入新课→细胞周期概念→间期特点→分裂期特点→染色体和DNA的变化规律。应该说这样的教学设计符合学生的认知规律,但总觉得缺少点什么,也就是从学生的角度来说,真正让学生从微观上去理解和掌握细胞增殖的内容还是有点困难的。思考再三觉得还应该把握以下几方面:
首先,可以让学生设想细胞数目增加需要那些方面准备?过程会怎么样?这实际上是学生主体性的体现,有利于学生总体把握细胞增殖的变化规律。
然后,要让学生明白细胞内有好多变化,但我们的学习集中在染色体的变化规律来教学,重点一定要突出染色体这样的变化是为了遗传性状的稳定。复制、螺旋化、移到赤道面、着丝粒分裂、纺锤丝牵拉都是为了染色体结构和数目的稳定,这种动态变化完全可以设想出来,不需要去死记硬背。
最后,由于概念繁杂,一定要对概念进行辨析:染色体和染色质;纺锤体和纺锤丝;赤道面和细胞板。
一样的