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基因突变发生在什么时期真实医生回答春雨医生
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一、材料和方法

1.材料

(1)材料取自当年带芽茎段为外植体,采自哈尔滨市农业科学院宿根花卉园。

(2)培养基以MS为基本培养基,附加不同的激素配比。启动、增殖培养基加蔗糖30g/L,生根培养基加蔗糖15g/L。各培养基均加琼脂6.0g/L,pH5.8-6.0,121℃条件下灭菌20min。

2.方法

(1)初代培养取宿根福禄考当年生幼嫩的枝条,剪去叶片,先用软毛刷蘸洗衣粉水轻刷干净,然后用流水冲洗。将枝条剪成一芽一段,用70%的酒精消毒30s后,用0.1%的升汞溶液消毒8-10min,用无菌水冲洗5-8次。接种到启动培养基上进行培养。培养容器用100mL三角瓶,每瓶装30-40mL培养基,每天观察并统计各外植体在培养基上的生长情况。

(2)继代与增殖将在新长出的宿根福禄考切成单个带芽茎段接种到增殖培养基中,可多次反复切割进行继代培养,采用相同培养基上的材料进行增殖,30d后统计增殖倍数。

(3)生根培养在继代过程中选择2~3cm高的健壮苗,转入生根培养基中。比较MS和1/2MS两种培养基试管苗生根的情况,从而筛选出最适的生根培养基。

(4)培养条件培养室温度(25士2)℃,光照强度2000一3000lx,光周期12h/d。

二、结果与分析

(1)初代培养基的筛选

30d后统计各种外植体的出芽情况,由实验可知,启动培养基MS十6-BA1.0mg/L十NAA0.1mg/L+30g蔗糖为最佳处理,芽诱导率76.6%。

(2)增殖培养基的筛选

以MS为基本培养基,通过完全随机区组试验,筛选最佳增殖培养基。由实验可知,增殖培养基最佳配方是MS十6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L十30g蔗糖,平均增殖倍数达7.5,不但增殖倍数高,而且分化的芽均匀一致、生长快且健壮。

(3)生根培养基的筛选

在生根培养时选择了MS和1/2MS培养基,添加了NAA、IBA,糖为15g。选择继代中高度在2-3cm的健壮无根苗,转移到生根培基上,1个月后统计生根的结果,从实验可知,最适生根培养基为1/2MS十IBA0.5mg/L十15g蔗糖,IBA生根效果优于NAA。

(4)移栽

选择生根培养30d的健壮生根苗在温室中进行移栽,移栽1个月以后,统计不同移栽基质中的成活率,由实验可知,在温室中,珍珠岩:草炭为2:l的效果最好,移栽成活率分别达到88.50%,明显优于基质珍珠岩。

三、讨论

宿根福禄考品种多,耐高温、耐严寒、耐盐碱土的能力强,是黑龙江省优良的宿根花卉,因此实现宿根福禄考栽培技术创新,达到规模化、专业化生产很有意义,该试验结果表明,采取宿根福禄考幼嫩枝条的腋芽诱导率较高,污染率低,是理想的外植体材料。宿根福禄考启动的最佳培养基为MS十6-BA1.0mg/L十NAA0.1mg/L+30g蔗糖,培养30d后萌发率达76.6%。增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L十30g蔗糖,月平均增殖倍数为7.5。生根的最适培养基为1/2MS十IBA0.5mg/L十15g蔗糖,1个月后生根率达97.5%。试验苗移栽田间,30d后成活率达88.50%。

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