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ApexBio/TUG 891/10mg/B5651
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Nature.2017 Jan 19;541(7637):417-420.
Nature.2018 Nov;563(7731):407-411.
Nature.2018 Jun 13.
Nature.2018 Jun 27.
Nature.2018 Mar 29;555(7698):673-677.
Nature.2017 Sep 7;549(7670):96-100.
Nature.2016 Apr 21;532(7599):398-401.
Science.2016 Aug 5;353(6299)594-8
Nat Nanotechnol.2017 Dec;12(12):1190-1198.
Nature Biotechnology.2017 Jun;35(6):569-576
Nat Med.2018 Sep 17.
Cell.2018 Dec 21. pii: S0092-8674(18)31561-7.
Cell.Available online 25 October 2018.
Cell.2018 Sep 27. pii: S0092-8674(18)31183-8.
Cell.2018 Jun 28;174(1):172-186.e21.
Cell.2018 Feb 22;172(5):1007-1021.e17.
Cell.2017 Nov 30;171(6):1284-1300.e21.
Cell.2017 Aug 17. pii: S0092-8674(17)30869-3.
Cell.2017 Jul 13;170(2):312-323
Nat Med.2018 Jan 29.
Nat Med.2017 Nov;23(11):1342-1351.
Cell.2017 Apr 6;169(2):286-300.
Cell.2015 Aug 27;162(5):987-1002.
Cell.2015 Feb 12;160(4):729-44.
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Cancer Cell.2018 Apr 9;33(4):752-769.e8.
Cancer Cell.2018 Mar 12;33(3):401-416.e8.
Cancer Cell.2017 Aug 14;32(2):253-267.e5.
Nat Methods.2018 Jul;15(7):523-526.
Cell Stem Cell.2018 May 3;22(5):769-778.e4.
Cell Stem Cell.2017 Nov 20. pii: S1934-5909(17)30375-2.

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Cas No. 1374516-07-0SDF Download SDF
Synonyms N/A
Chemical Name 3-(4-((4-fluoro-4"-methyl-[1,1"-biphenyl]-2-yl)methoxy)phenyl)propanoic acid
Canonical SMILES CC1=CC=C(C2=CC=C(F)C=C2COC3=CC=C(CCC(O)=O)C=C3)C=C1
Formula C23H21FO3 M.Wt 364.41
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“To be or not tobe, that’s a question. ”莎士比亚的名句,道出了生与死的对立。在生物学中,增殖和凋亡被认为是对立的细胞现象,然而,随着研究的深入,研究者发现了一种称为“凋亡促进增殖(apoptosis-induce proliferation,AiP)”的现象。这样看似矛盾的现象,却可以用一张简单的图来解释。一个细胞通过增殖产生一群细胞,当这群细胞中的某一部分发生凋亡后,细胞会发生补偿性增 查看更多>
基本原理NK 细胞克隆来源于NK 细胞,该细胞的分离方法参见第一节之四。这些NK 细胞与经γ射线照射的饲养细胞苓而获得的NK 细胞克隆。试剂和材料● 植物血凝素(PHA)母液为100μg/ml● 重组IL-2(rIL-2)母液为105u/ml,分装小瓶(0.5ml/瓶),置-20℃长期保存,或置4℃下短期存放。应避免 查看更多>
目的要求通过PAS反应,了解糖原显示的基本原理、方法以及糖原在细胞中的分布。基本原理糖原由D-葡萄糖的分支或直链组成,在肝和肌肉最丰富。过碘酸是一种强氧化剂,能将葡萄糖中乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成二个游离醛基(—CHO),游离醛基与Schiff ‘s试剂反应生成紫红色产物,颜色深浅与多糖含量 查看更多>
【CCK-8细胞增殖检测服务】代做实验|技术服务,上海通善生物科技有限公司提供实验技术服务,【CCK-8细胞增殖检测服务】代做实验|技术服务,详询业务员。争做一流服务,共建一流产品,同创一流企业。通善生物微信公众号:bioleaf扫一扫直接询价。通善生物提供以下技术服务。具体实验事项请咨询业务员,021-33779006 61806666【CCK-8细胞增殖检测服务】代做实验|技术服务,上海通善生物科技有限公司提供实验技术服务,【CCK 查看更多>
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嘉美生物是一家主要从事Annexin V,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,磷酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司,免费热线:400-698-4168。 查看更多>
根据调亡形态学特征的检测方法一、普通光学显微镜观察方法1)苏木素-伊红染色(HE染色法)石蜡组织切片的HE染色1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75 查看更多>
BrdU标记法1.细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4% FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期。2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。3.弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。4.甲醇/醋酸固定10min。 查看更多>
2019-02-19
北京京雷科技发展有限公司在发布的细胞增殖实验(MTS法)供应信息,浏览与细胞增殖实验(MTS法)相关的产品或在搜索更多与细胞增殖实验(MTS法)相关的内容。 查看更多>
阅读文档 5页 - 20积分 - 上传时间:2017年9月4日 the European Union (FP6 NeuroproMiSe) and the Brain Research Trust. SC is supporte... Immature dendritic cell exosomes suppres. preventive treatment w... 查看更多>
本公司应用MTT、CCK-8比色法,检测细胞存活和生长。MTT检测原理为活细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的Formazan,用酶联免疫检测仪在一定波长处测定其吸光值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。CCK-8原理与MTT类似,其灵敏度更高,而且孵育后可以直接上机检测,不需要 查看更多>
2018-08-10
在成年哺乳动物以及较高等脊椎动物的中枢神经系统,损伤后的神经元轴突只能生长很短的一段距离(约 Imm 左右)。与之相反,在脊椎动物的周围神经系统以及较低等脊椎动物的某些中枢神经系统中,损伤的轴突具有较强的生长能力(Gaze,Keating1970;Sharmaetal.1993)。 查看更多>
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我做的课题与移植免疫耐受有关,目前在做的就是体外MLR。实验protocol如下:


供体小鼠(Balb/c)脾淋巴细胞经磁珠分选提取APC细胞,辐照灭活后作为刺激细胞。受体小鼠(C57)脾淋巴细胞经磁珠分选提取cd3细胞用CFSE标记作为反应细胞。调整供体细胞密度为5×10^6/ml,受体细胞密度为1×10^6/ml,分别按2:1,5:1,10:1的比例加入圆底96孔板,每组3个复孔,同时设单纯受体细胞和受体自身APC-cd3混合培养作为阴性对照组,37℃5%CO2共培养3天。共培养3天后收集细胞,3个复孔合并成一管,经PBS洗涤,加入CD3-PE流式抗体孵育标记T细胞,上流式细胞仪检测受体T细胞增殖程度。


结果:流式检测结果如下图所示,图3是各浓度梯度组间比较,想请教图中左侧是否为正常的增殖峰,因为此前多次结果均显示为宽大的单峰,未观察到所谓的细胞增殖峰,查阅之前的研究结果多数显示如未加细胞刺激物,单凭细胞的刺激作用形成的增殖相当微弱,极少呈现这样单个高尖的增殖峰。


图1

图2


图3(从上往下(黄、红、蓝)分别为5:1,2:1,10:1混合培养组)

单纯受体细胞的空白组没有增殖这个没有问题,但奇怪的是图4里作为阴性对照的反应组也是同样的双峰结果,尽管刺激效果不如前三组明显,但理论上用自身的APC刺激自身的cd3根本不会出现增殖,不知这样的结果是属于正常增殖还是假阳性结果,因为我们的阴性对照组细胞在镜下看被污染了,是否会受此影响表现为细胞增殖?

因本人刚接触免疫细胞实验不久,可能描述的问题比较小白,如有不当请大神们指正,非常感谢^^

图4(从下往下(黄、蓝、红)分别为空白组、5:1混合培养组和自身对照组)



细胞增殖,比如以有丝分裂的方式增殖,产生的是相同的细胞。
细胞分化,产生的是不同的细胞,例如造血干细胞可以分化出红细胞。
使用CFSE追踪染料染色后,总的分裂次数除以进入细胞周期的细胞数。得到的数值就是增殖指数
淋巴因子促进B细胞增殖分化我知道,可是为什么还会促进T细胞增殖分化呢?
细胞集落形成实验
非整倍体无限细胞系和癌细胞株中,仍然存在不同细胞亚群,它们的功能和生长特点有些差异,其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力,细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞,细胞遗传性状、生物学特性相似,利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系,细胞集落率很低。细胞集落化培养之前,应先测定细胞集落形成率,以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。
目前认为仅有肿瘤干细胞具有形成集落的能力,集落抑制率常用于抗癌药物敏感试验、肿瘤放射生物学试验。
集落抑制率=(1-(实验组集落形成率/对照组集落形成率))×100%
(一)原理
细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。
(二)实验用品
1.材料:Hela细胞。
2.器材:(直径 60mm )培养皿、细胞记数板、烧杯、吸管、离心机、离心管、废液瓶、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、水浴锅。
3.试剂:Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞培养液、安尔碘、琼脂。
(三)方法
1.平板克隆形成试验
本法适用于贴壁生长的细胞,包括培养的正常细胞和肿瘤细胞。
(1)对指数生长期细胞,采用常规消化传代方法,制成细胞悬液。
(2)细胞悬液反复吹打,使细胞充分分散,单个细胞百分率应在95%以上。细胞记数,并用培养基调节细胞浓度,待用。
(3)根据细胞增殖能力,将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿(直径 60mm )中,以十字方向轻轻晃动培养皿,使细胞分散均匀。
(4)培养皿置 37℃ 、5%CO2中培养2~3周,中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。
(5)当培养皿中出现肉眼可见克隆时,终止培养,弃去培养液,PBS液小心浸洗2次,空气干燥。甲醇固定15分钟,弃甲醇后空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟,流水缓慢洗去染液,空气干燥。
2.软琼脂集落形成试验
本法适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。利用琼脂液无粘着性又可凝固的特性,将肿瘤细胞混入琼脂液中,琼脂液凝固使肿瘤细胞置于一定位置,琼脂中肿瘤细胞可能向周围作全方位的移动,因此可以用来检测肿瘤细胞的主动移动能力。肿瘤细胞在适宜培养基中又可以增殖,从而可以测定肿瘤细胞克隆形成率。造血系统软琼脂集落形成试验方法相同,主要用于有关细胞分化的研究,但使用培养基不同。
细胞增殖的意义:
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。

解析:细胞增殖是重要的细胞生命特征。
请教BrdU检测细胞增殖的详细protocal,需要自己亲自做过这个实验的朋友帮忙,不1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片)
细胞克隆形成实验 123
怪叔叔岂z0韷2017-10-02
细胞集落形成实验
非整倍体无限细胞系和癌细胞株中,仍然存在不同细胞亚群,它们的功能和生长特点有些差异,其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力,细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞,细胞遗传性状、生物学特性相似,利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系,细胞集落率很低。细胞集落化培养之前,应先测定细胞集落形成率,以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。
目前认为仅有肿瘤干细胞具有形成集落的能力,集落抑制率常用于抗癌药物敏感试验、肿瘤放射生物学试验。
集落抑制率=(1-(实验组集落形成率/对照组集落形成率))×100%
(一)原理
细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。
(二)实验用品
1.材料:Hela细胞。
2.器材:(直径 60mm )培养皿、细胞记数板、烧杯、吸管、离心机、离心管、废液瓶、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、水浴锅。
3.试剂:Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞培养液、安尔碘、琼脂。
(三)方法
1.平板克隆形成试验
本法适用于贴壁生长的细胞,包括培养的正常细胞和肿瘤细胞。
(1)对指数生长期细胞,采用常规消化传代方法,制成细胞悬液。
(2)细胞悬液反复吹打,使细胞充分分散,单个细胞百分率应在95%以上。细胞记数,并用培养基调节细胞浓度,待用。
(3)根据细胞增殖能力,将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿(直径 60mm )中,以十字方向轻轻晃动培养皿,使细胞分散均匀。
(4)培养皿置 37℃ 、5%CO2中培养2~3周,中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。
(5)当培养皿中出现肉眼可见克隆时,终止培养,弃去培养液,PBS液小心浸洗2次,空气干燥。甲醇固定15分钟,弃甲醇后空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟,流水缓慢洗去染液,空气干燥。
2.软琼脂集落形成试验
本法适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。利用琼脂液无粘着性又可凝固的特性,将肿瘤细胞混入琼脂液中,琼脂液凝固使肿瘤细胞置于一定位置,琼脂中肿瘤细胞可能向周围作全方位的移动,因此可以用来检测肿瘤细胞的主动移动能力。肿瘤细胞在适宜培养基中又可以增殖,从而可以测定肿瘤细胞克隆形成率。造血系统软琼脂集落形成试验方法相同,主要用于有关细胞分化的研究,但使用培养基不同。
(1)同上(1)~(3)步骤。
(2)调整细胞悬液密度为1×103个/ml细胞。
(3)制备底层琼脂,完全溶化的5%琼脂和 37℃ 左右预温的新鲜完全培养液以1:9比例在 40℃ 均匀混合,加入培养皿(直径 60mm )中,每皿含0.5%琼脂培养基2ml,室温下琼脂完全凝固。
(4)制备上层琼脂,取 37℃ 不同密度梯度(按照每皿含50、100、200个)的细胞悬液1.5ml移入小烧杯中,加入 40℃ 、5%琼脂等体积混匀,即成0.25%半固体琼脂培养基。配好的半固体琼脂培养基立即加入铺有底层琼脂的培养皿中,室温下琼脂凝固。 37℃ 、5%CO2静置培养2-3周。
(四)实验结果
1.定期观察细胞培养过程中集落的形成。
2.显微镜下计数大于50个细胞克隆数,然后按下式计算集落形成率:
集落形成率(%)=(集落数/接种细胞数)×100
(五)注意事项
1.琼脂对热和酸不稳定,如果反复加热,容易降解,产生毒性,同时琼脂硬度下降。故琼脂高压灭菌( 10磅 15分钟)后按一次用量进行分装。
2.细胞悬液中,细胞分散度>95%。
3.软琼脂培养时,注意琼脂与细胞混合时温度不要超过 40℃ ,以免烫伤细胞。
4.接种细胞密度不宜过高。
5.细胞在低密度条件下培养,生存率明显下降,无限细胞系和肿瘤细胞株克隆形成率一般在10%以上。但初代培养细胞和有限细胞系仅为0.5~5%,甚至为零。为提高集落形成率,必要时在培养基中添加胰岛素、地塞米松等促细胞克隆形成物质。
一样的
ki67检测细胞增殖包含细胞分裂哪个期
Ki67,在很多肿瘤病理中做,它是判断肿瘤细胞增殖情况的一个指标,越高表示正在肿瘤细胞增殖多,恶性程度越高。P16,是一个抑癌基因,直接作用于细胞周期、抑制细胞分裂的基因,细胞内P16蛋白减少,会引起细胞周期调节紊乱,使细胞无限制增生,甚至癌变。
ki67是什么 Ki67是一种增殖细胞相关的核抗原,其功能与有丝分裂密切相关,在细胞增殖中是不可缺少 ,但其确切机制尚不清楚. Ki67标记的是处于增殖周期中的细胞。该标记阳性率越高,肿瘤生长越快,组织分化越差,对化疗也越敏感。一般来说,预后较差。

区别:

1.CCK-8为一瓶溶液,毋需预制,即开即用,MTT法的步骤比较多也比较繁琐。

2.如果药物本身有颜色,那么采用MTT法可以通过离心去除颜色的干扰,多次的离心和吸取上清要求操作者要小心和仔细,否则会降低试验的准确率。

3.CCK-8法生成的甲臜是水溶性的,不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤,因此可以减少一定的误差,其重复性优于MTT。其对悬浮细胞的测定有其独到之处。

4.对细胞毒性小,CCK-8对细胞生长没有影响,测完细胞活性后,去掉含CCK-8的培养基,用新鲜培养基可以继续培养,并且还可以继续做其它指标的检测,而MTT就不能。

5.CCK-8反应时间也短,适合做急性作用。

6.CCK-8线性范围更宽,灵敏度更高。

7.发文章过程中,MTT因其重复性差,一般得不到认可。

应用:

被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。


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