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![NewEast/Human Apolipoprotein A1 EIA Kit [83901][96 well]/83901](images/201910/1571693801791660348.jpg)
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NewEast/Human Apolipoprotein A1 EIA Kit [83901][96 well]/83901
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2021-09-03
DNA(基因)检测-Southern BlotDNA吸印转移1.室温下将电泳后的琼脂糖凝胶浸入500ml溶液A中,摇动30分钟后换500ml新鲜溶液A再摇30分钟,使DNA双链碱变性。溶液A:5M NaCl 300.0ml10M NaOH 50.0mlH2O 650.0ml2.为使凝胶重新回到中性,换入溶液B中重复上 查看更多
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2021-08-04
上海研生实业有限公司所提供的人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息! 查看更多
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2021-08-31
一、材料:125I-UdR购自中科院北京原子能所,放化纯度>95%。脱氧腺苷(AdR)、脱氧鸟苷(GdR)、脱氧胞苷(CdR)、脱氧尿苷(UdR)均为Sigma公司产品。二、方法1、细胞培养:当癌细胞贴壁生长超过瓶壁的70%,用胰蛋白酶消化30-40s,传代培养。肿瘤细胞每3-4d传代1次。在50ml培养瓶中, 查看更多
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2021-09-02
原代心肌细胞培养及APC模型的制作参照先前报道的方法[2]。即取出生后1-2 d乳鼠心尖部组织, 胰酶消化, 离心后用含20%小牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液, 过滤, 按差速贴壁分离法纯化心肌细胞, 以1×105 cells/cm2接种于24孔板, 每24 h更换培养液。贴壁生长2 d, 于实验前24 h更换为 查看更多
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2021-08-21
荧光色素标记抗体1.准备好凝胶滤柱以便完成结合反应后用于分离标记抗体和游离的荧光色素。分离球形蛋白使用排除极限为20 000~50 000 查看更多
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2021-07-31
上海酶科生物科技有限公司在发布的足细胞标记蛋白/足盂蛋白供应信息,浏览与足细胞标记蛋白/足盂蛋白相关的产品或在搜索更多与足细胞标记蛋白/足盂蛋白相关的内容。 查看更多
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2021-08-28
5.3.2常规条件下已知值质控血清变异(routine conditions variance-known value,简称RCVK)的测定。 做常规检验的技术人员,在常规检验的条件下,将质控血清放在常规检测样本中,进行20次检验,结果计算同OCV法。一般认为RCV的SD在OCV的SD两倍范围内可以接受。若太大应该 查看更多
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2021-09-05
染色体结构显示和检测1) 染色体显带显Q带法1. 漂洗:取经过干热预处理或已老化的染色体标本,置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。2. 染色:浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分钟。 3. 漂洗:浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次,每次5分钟。4. 观察:向标本染色体面滴1~2滴新鲜缓冲液,覆以盖片(避免出气 查看更多
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2021-08-12
before start:thaw cells from liquid nitrogen, grow in 75cc flask (T75) in Fischer"s medium MM (maintenance medium) until content gets cloudy and starts to turn 查看更多
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2021-08-20
SMEAR PREPARATIONThe preparation of a smear is required for many laboratory procedures, including the Gram-stain. The purpose of making a smear is to fix the b 查看更多
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2021-09-17
通过使用一种新的方法,在前列腺癌,或乳腺癌或胰腺癌的患者血流中自由流动的癌症细胞被史无前例的准确标记起来,以此来实时的评估和控制机体内癌症的扩散和解决预测治疗反应和耐药性的问题。 和上一代治疗系统相比,研究者们声称他们的检测在比例更高的病人身上显示了数目更多的明显的循环肿瘤细胞,通过一种高强度计算方法使得研究者可以在上百万的正常细 查看更多
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2021-09-04
培养细胞中RNA检测-Northern Blot1.制胶:(1%)琼脂糖 2.5g10×Mops缓冲液 25.0mlH2O 192.0ml2.在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。3.取出胶冷却到60℃,于通风柜中加45ml甲醛,混匀。4.加20μl溴化乙锭,混匀。5.令胶液再冷却10分钟。6.将其倒入四面封好的电 查看更多
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荧光免疫标记为什么用在同种生物细胞上 123
10926433642017-10-03
荧光免疫标记是为了要显示某种待检物在组织中的分布和含量,取组织切片做免疫组化肯定要在同种生物细胞上啊,这样数据才可信
临床免疫学检验什么是细胞表面标志?作用是什么?123
2021-08-01
临床免疫学检验什么是细胞表面标志?作用是什么?
【求助】成纤维细胞的标记物有哪些 生理生化与组织胚胎 ...123
净空2021-07-31
急求!请教各位站友,我准备标记成纤维细胞,移植体内后2月再切片观察,请问可以用什么标记?同时还要测移植后存活的细胞数量,万分感谢!
细胞免疫组化标记(阳性率大于70%)好吗?_有问必答_123
xsssaber1472017-10-03
目的初步筛选出肝母细胞瘤(HB)中的肿瘤干细胞(NSC)相关表面标记组合,并了解NSC的分布。方法选择入住江西省儿童并接受的HB患儿,采用免疫组织化学染色的方法,观察干细胞相关标记物CD34、Thy-1、c-kit、CD56和干细胞生长因子(SCF),在HB组织及距肿瘤组织边缘3cm以外的正常肝脏组织的表达和分布。结果
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
你好,骨髓里的粒细胞进入血液中即为白细胞,白细胞包括:中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞。红细胞进入血液中即为红细胞。巨核细胞的碎片进入血液中即为血小板。希望我的回答对你有帮助。1539
小鼠3T3L1前脂肪细胞系的特异性标记论文万方医学网123
2017-10-03
半圆状
【实验求助】效应T细胞的表面标志 细胞生物学论坛123
悠哈1232021-07-24
有做过T细胞分选的吗?T细胞表面标志CD3,CD4,CD8大家都是用什么抗体标记的呢?
为什么用荧光蛋白对细胞膜进行标记,一般标记在蛋白质上– 960化工...123
万里长が征2017-10-03
荧光蛋白
第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白(phycobiliproteins)和从蓝藻(cyanobacteria)中提取的触角光合色素(photosynthetic antenna pigments)。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团(bilin chromophores)。这些生色基团都包裹在一种基质结构中,这样就能将它们的淬灭作用降至最小,因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头(分子量高达200KD)”也限制了它们在细胞内的扩散,因此,它们也只能与抗体联用,在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。
自从科学家从维多利亚发光水母(jellyfish Aequorea victoria)中发现了绿色荧光蛋白(GFP)之后,生物成像领域就发生了革命性的改变。单独表达绿色荧光蛋白或与其它蛋白融合表达就可以在细胞内发出绿色荧光了,使用这种方法除了需要氧气O2之外,不再需要任何其它的试剂参与,因为生色基团是通过自发环化作用形成的,需要对深埋在直径约2.4纳米至4纳米的β桶(beta barrel)核心里的三个氨基酸(丝氨酸-酪氨酸-氨基乙酸)进行氧化才能发出荧光。绿色荧光蛋白只是荧光蛋白大家族中的一员,这些荧光蛋白大部分都来自海洋腔肠动物,因为各自含有共价结构不同以及非共价环境不同的生色基团,所以可以发出不同颜色的荧光。在实验室中对这些荧光蛋白进行遗传修饰之后可以进一步的丰富它们的特性,比如增加亮度和折叠效率、减少寡聚体形成等。突变既可以增加荧光蛋白的光稳定性,还可以赋予荧光蛋白光操控性,比如控制荧光发射与否,或者发出哪种荧光。这种光操控性既可以是可逆的也可以是不可逆的,可以用于监测蛋白的弥散过程、运输过程和老化过程等。虽然荧光蛋白在生色基团形成的过程中会生成H2O2,但似乎没有产生太多的活性氧簇(ROS),这一点也并不奇怪,因为荧光蛋白在进化过程中都是暴露在阳光下的。不过我们也可以对荧光蛋白进行改造使其能够形成ROS。荧光蛋白发出的荧光一般对它们所处的生化环境都不太敏感,但是酸性环境或变性剂的存在可以淬灭荧光。不过现在我们已经有了经过改造的、能耐受酸性环境或者能对金属离子、卤化物离子和巯基二硫化物氧化还原剂起反应的荧光蛋白。展开
第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白(phycobiliproteins)和从蓝藻(cyanobacteria)中提取的触角光合色素(photosynthetic antenna pigments)。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团(bilin chromophores)。这些生色基团都包裹在一种基质结构中,这样就能将它们的淬灭作用降至最小,因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头(分子量高达200KD)”也限制了它们在细胞内的扩散,因此,它们也只能与抗体联用,在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。
自从科学家从维多利亚发光水母(jellyfish Aequorea victoria)中发现了绿色荧光蛋白(GFP)之后,生物成像领域就发生了革命性的改变。单独表达绿色荧光蛋白或与其它蛋白融合表达就可以在细胞内发出绿色荧光了,使用这种方法除了需要氧气O2之外,不再需要任何其它的试剂参与,因为生色基团是通过自发环化作用形成的,需要对深埋在直径约2.4纳米至4纳米的β桶(beta barrel)核心里的三个氨基酸(丝氨酸-酪氨酸-氨基乙酸)进行氧化才能发出荧光。绿色荧光蛋白只是荧光蛋白大家族中的一员,这些荧光蛋白大部分都来自海洋腔肠动物,因为各自含有共价结构不同以及非共价环境不同的生色基团,所以可以发出不同颜色的荧光。在实验室中对这些荧光蛋白进行遗传修饰之后可以进一步的丰富它们的特性,比如增加亮度和折叠效率、减少寡聚体形成等。突变既可以增加荧光蛋白的光稳定性,还可以赋予荧光蛋白光操控性,比如控制荧光发射与否,或者发出哪种荧光。这种光操控性既可以是可逆的也可以是不可逆的,可以用于监测蛋白的弥散过程、运输过程和老化过程等。虽然荧光蛋白在生色基团形成的过程中会生成H2O2,但似乎没有产生太多的活性氧簇(ROS),这一点也并不奇怪,因为荧光蛋白在进化过程中都是暴露在阳光下的。不过我们也可以对荧光蛋白进行改造使其能够形成ROS。荧光蛋白发出的荧光一般对它们所处的生化环境都不太敏感,但是酸性环境或变性剂的存在可以淬灭荧光。不过现在我们已经有了经过改造的、能耐受酸性环境或者能对金属离子、卤化物离子和巯基二硫化物氧化还原剂起反应的荧光蛋白。展开
GFAP是不是星形胶质细胞的“细胞表面标记物” 免疫学讨论版...123
情圣02092021-07-30
通常指神经胶质细胞.
神经胶质细胞(neuroglia cell)简称神经胶质(neuroglia ),广泛分布于中枢和周围神经系统.普通染色只能显示胞核,用特殊银染方法才能显示神经胶质细胞整体形态.神经胶质细胞一般较神经细胞小,突起多而不规则,数量约为神经细胞的十倍.多分布在神经元胞体、突起以及中枢神经毛细血管的周围.神经胶质细胞具有支持.一营养、保护、髓鞘形成及绝缘,并有分裂增殖与再生修复等多种作用.
(-)中枢神经系统的神经胶质细胞
1.星形胶质细胞(astrocyte)是胶质细胞中最大的一种,胞体呈星形,核大呈圆形或椭圆形,染色较浅.胞质内有交织走行的神经胶质丝(neuroglial filament).由胞体伸出许多呈放射状走行的突起,部分突起末端膨大形成脚板(end foot),附着在毛细血管基膜上,或伸到脑和脊髓的表面形成胶质界膜(gliolimitan).星形胶质细胞约占全部胶质细胞的20%.星形
胶质细胞依其分布及结构又可分为两种.
(1)原浆性星形胶质细胞(protoplasmie astrocyte):分布于中枢神经系统的灰质内,位于神经细胞体及其突起的周围.原浆性星形胶质细胞的突起不规则,分支多而短曲,表面不光滑.胞质内的神经胶质丝少.
(2)纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte):分布于白质内,位于神经纤维之间.其突起呈放射状,细长而直,分支少,表面光滑.胞质内有许多交织排列的原纤维,其超微结构是一种中间丝,称神经胶质丝,其内含有胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein GFAP),用免疫细胞化学染色技术能特异性地显示出这类细胞.
星形胶质细胞含有高浓度的K+,并能摄取某些神经递质(如γ-氨基丁酸).它通过调节细胞间隙的K+和神经递质浓度,来影响神经元的功能活动.因此,星形胶质细胞对维持神经细胞微环境的稳定和调节代谢过程起重要作用.当中枢神经系统损伤时,星形胶质细胞迅速分裂增殖,以形成胶质瘢痕形式进行修复.
神经胶质细胞(neuroglia cell)简称神经胶质(neuroglia ),广泛分布于中枢和周围神经系统.普通染色只能显示胞核,用特殊银染方法才能显示神经胶质细胞整体形态.神经胶质细胞一般较神经细胞小,突起多而不规则,数量约为神经细胞的十倍.多分布在神经元胞体、突起以及中枢神经毛细血管的周围.神经胶质细胞具有支持.一营养、保护、髓鞘形成及绝缘,并有分裂增殖与再生修复等多种作用.
(-)中枢神经系统的神经胶质细胞
1.星形胶质细胞(astrocyte)是胶质细胞中最大的一种,胞体呈星形,核大呈圆形或椭圆形,染色较浅.胞质内有交织走行的神经胶质丝(neuroglial filament).由胞体伸出许多呈放射状走行的突起,部分突起末端膨大形成脚板(end foot),附着在毛细血管基膜上,或伸到脑和脊髓的表面形成胶质界膜(gliolimitan).星形胶质细胞约占全部胶质细胞的20%.星形
胶质细胞依其分布及结构又可分为两种.
(1)原浆性星形胶质细胞(protoplasmie astrocyte):分布于中枢神经系统的灰质内,位于神经细胞体及其突起的周围.原浆性星形胶质细胞的突起不规则,分支多而短曲,表面不光滑.胞质内的神经胶质丝少.
(2)纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte):分布于白质内,位于神经纤维之间.其突起呈放射状,细长而直,分支少,表面光滑.胞质内有许多交织排列的原纤维,其超微结构是一种中间丝,称神经胶质丝,其内含有胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein GFAP),用免疫细胞化学染色技术能特异性地显示出这类细胞.
星形胶质细胞含有高浓度的K+,并能摄取某些神经递质(如γ-氨基丁酸).它通过调节细胞间隙的K+和神经递质浓度,来影响神经元的功能活动.因此,星形胶质细胞对维持神经细胞微环境的稳定和调节代谢过程起重要作用.当中枢神经系统损伤时,星形胶质细胞迅速分裂增殖,以形成胶质瘢痕形式进行修复.
【求助】怎么检测细胞通透性? 细胞技术讨论版论坛123
Kyoya雀MZ42017-10-03
(1)死/活细胞染色法 : 使用选择性死/活细胞染色的特殊染料如不易穿透活细胞膜的台盼兰、苯胺黑及用于活细胞着色的中性红、健那绿、亚甲蓝、甲苯胺蓝等,通过染色区分死活细胞并计数来间接判断细胞膜通透性的改变情况。该方法简单,方便,价廉;但灵敏度和精确性差。
(2)荧光标记法 : 使用二乙酸荧光素(FDP)、碘化丙啶(PI)或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育,用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是(1)法的“荧光”版,但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。
(3)硝酸镧(La)示踪法: 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙,但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜),也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时, 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内, 并在电镜下显示, 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
(4)LDH释放法: 在正常情况下,细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的, 但在细胞膜受损伤而通透性增加时,可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
(2)荧光标记法 : 使用二乙酸荧光素(FDP)、碘化丙啶(PI)或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育,用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是(1)法的“荧光”版,但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。
(3)硝酸镧(La)示踪法: 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙,但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜),也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时, 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内, 并在电镜下显示, 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
(4)LDH释放法: 在正常情况下,细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的, 但在细胞膜受损伤而通透性增加时,可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
【求助】小鼠造血干细胞分离时表面标志物用什么? 神经生物与再生...123
鬼子2021-08-08
[精品]干细胞标记示踪技术的研究进展123
tcx1532021-07-23
目前标记干细胞的MRI 对比剂主要有两类: 一类是以Gd3+对比剂即所谓顺磁性对比剂,主要产生T1 正性对比效应,目前有关的应用报道不多,主要是因为在目前MRI 场强下Gd3+的量需要达到相当程度,这在技术上尚有难度。
当然也有几项研究成功地应用Gd3+复合物通过胞饮作用或细胞内吞作用进入细胞内而后行MRI 的报道。Modo 等应用右旋糖酐聚合物连接的Gd-DTPA 与若丹明颗粒(gadolinium rhodamine dextran,GRID )可同时提供MRI 和荧光组织显像,将之标记永生化小鼠神经干细胞MHP36 细胞后移植至脑缺血大鼠的海马后进行4.7 T MR 离体成像, 证实MRI 能可靠分辨移植细胞以及示踪细胞迁移。
另一类是通过葡聚糖生物高分子包裹Fe3O4 晶体形成核壳式结构的超顺磁性氧化铁(superpara-magnetic iron oxide,SPIO) 纳米材料对比剂, 主要产生较强的T2 负性对比效应。其特点是粒径小、穿透力强且弛豫率约为同样 564 国际医学放射学杂志International Journal of Medical Radiology 2009 Nov; 32(6) 条件下Gd3+的7~10 倍,在很低浓度(nmol)时即可在 MRI 上形成对比且具有生物可降解性,能被细胞代谢后进入正常血浆铁池与红细胞血红蛋白结合或用于其他代谢过程。
以上特点使氧化铁类对比剂更受关注,是目前较理想的磁共振示踪剂。近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)磁标记后MRI 示踪已成功应用于中枢神经系统和心脏等器官。Jendelova 等[21]将SPIO 和BrdU 双重标记的MSCs 经对侧脑半球局部移植入大鼠脑皮质损伤模型, 术后28 d 常规1.5 T MRI 显示MSCs 从注射点向对侧脑损伤区域迁移,脑损伤区域内见特异性低信号分布持续至术后50 d。
切片BrdU 免疫组化分析显示移植的MSCs 分化为神经元细胞,术后大鼠的神经功能改善,因此认为损伤组织可产生丰富的化学因子促使移植的MSCs 进行靶向迁移性修复。Kraitchman 等[22]利用Feridex 标记MSCs 经导管注入犬心肌梗死模型周边区域, 术后持续8 周,1.5 T MRI 明确观察到移植部位发出一条低信号线指向心肌梗死区域,心肌梗死面积逐渐减小。活体MRI 示踪磁标记MSCs 在骨关节领域也显示出重要的应用前景。
Mayer-Kuckuk 等应用与荧光基团结合的氧化铁粒子标记7F2 细胞和MC3T3-E1#4 细胞, 从股骨干骨骺端注射30 μL 含1×105 个磁标记细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)至小鼠股骨髓腔,7 T MR 活体成像显示骨髓腔内见特异性低信号持续至术后第9 天,此后髓腔内信号增高,提示移植MSCs 在股骨髓腔内部分丢失。
居等应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine, PLL) 的偶联物 Fe2O3-PLL , 有效地标记了人脐血间充质干细胞,成功地进行了磁共振标记细胞成像, 且对细胞的活力、凋亡等生物学特性无明显影响。
国内一些研究者进行的实验室结合前期间充质干细胞的磁标记工作,正在进行肝干细胞、神经干细胞的磁探针标记, 评价其对细胞活力增殖与凋亡代谢分化的影响,评价MRI 不同序列上不同浓度标记细胞的信号特点,并将标记后的肝干细胞进行正常及肝衰大鼠体内移植,神经干细胞标记后进行正常及大脑半球缺血大鼠体内移植,用MRI 动态示踪移植细胞分析移植细胞的生存状态,总结MRI 示踪干细胞的理论依据、技术方法及影像学表现特征,达到活体下追踪干细胞存活迁移的目的[24-27]。虽然MRI 示踪干细胞已经显示出了良好的应用前景,但磁标记会随着细胞分裂而稀释,在监测移植后干细胞的分化方面尚存在不足[28],有待进一步改进。
综上所述,有关干细胞标记和活体示踪方面的研究虽然取得了重要进展,但尚有许多问题需要解决,目前应用的各种标记示踪方法都有自己的优缺点, 但是随着科技的发展以及相关实验的不断深入,各种标记示踪方法目前存在的问题必定能够得到解决,其中尤其以MRI 活体示踪磁标记干细胞技术值得期待。利用无创伤性影像学技术活体示踪干细胞的研究将会取得重大突破。
当然也有几项研究成功地应用Gd3+复合物通过胞饮作用或细胞内吞作用进入细胞内而后行MRI 的报道。Modo 等应用右旋糖酐聚合物连接的Gd-DTPA 与若丹明颗粒(gadolinium rhodamine dextran,GRID )可同时提供MRI 和荧光组织显像,将之标记永生化小鼠神经干细胞MHP36 细胞后移植至脑缺血大鼠的海马后进行4.7 T MR 离体成像, 证实MRI 能可靠分辨移植细胞以及示踪细胞迁移。
另一类是通过葡聚糖生物高分子包裹Fe3O4 晶体形成核壳式结构的超顺磁性氧化铁(superpara-magnetic iron oxide,SPIO) 纳米材料对比剂, 主要产生较强的T2 负性对比效应。其特点是粒径小、穿透力强且弛豫率约为同样 564 国际医学放射学杂志International Journal of Medical Radiology 2009 Nov; 32(6) 条件下Gd3+的7~10 倍,在很低浓度(nmol)时即可在 MRI 上形成对比且具有生物可降解性,能被细胞代谢后进入正常血浆铁池与红细胞血红蛋白结合或用于其他代谢过程。
以上特点使氧化铁类对比剂更受关注,是目前较理想的磁共振示踪剂。近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)磁标记后MRI 示踪已成功应用于中枢神经系统和心脏等器官。Jendelova 等[21]将SPIO 和BrdU 双重标记的MSCs 经对侧脑半球局部移植入大鼠脑皮质损伤模型, 术后28 d 常规1.5 T MRI 显示MSCs 从注射点向对侧脑损伤区域迁移,脑损伤区域内见特异性低信号分布持续至术后50 d。
切片BrdU 免疫组化分析显示移植的MSCs 分化为神经元细胞,术后大鼠的神经功能改善,因此认为损伤组织可产生丰富的化学因子促使移植的MSCs 进行靶向迁移性修复。Kraitchman 等[22]利用Feridex 标记MSCs 经导管注入犬心肌梗死模型周边区域, 术后持续8 周,1.5 T MRI 明确观察到移植部位发出一条低信号线指向心肌梗死区域,心肌梗死面积逐渐减小。活体MRI 示踪磁标记MSCs 在骨关节领域也显示出重要的应用前景。
Mayer-Kuckuk 等应用与荧光基团结合的氧化铁粒子标记7F2 细胞和MC3T3-E1#4 细胞, 从股骨干骨骺端注射30 μL 含1×105 个磁标记细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)至小鼠股骨髓腔,7 T MR 活体成像显示骨髓腔内见特异性低信号持续至术后第9 天,此后髓腔内信号增高,提示移植MSCs 在股骨髓腔内部分丢失。
居等应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine, PLL) 的偶联物 Fe2O3-PLL , 有效地标记了人脐血间充质干细胞,成功地进行了磁共振标记细胞成像, 且对细胞的活力、凋亡等生物学特性无明显影响。
国内一些研究者进行的实验室结合前期间充质干细胞的磁标记工作,正在进行肝干细胞、神经干细胞的磁探针标记, 评价其对细胞活力增殖与凋亡代谢分化的影响,评价MRI 不同序列上不同浓度标记细胞的信号特点,并将标记后的肝干细胞进行正常及肝衰大鼠体内移植,神经干细胞标记后进行正常及大脑半球缺血大鼠体内移植,用MRI 动态示踪移植细胞分析移植细胞的生存状态,总结MRI 示踪干细胞的理论依据、技术方法及影像学表现特征,达到活体下追踪干细胞存活迁移的目的[24-27]。虽然MRI 示踪干细胞已经显示出了良好的应用前景,但磁标记会随着细胞分裂而稀释,在监测移植后干细胞的分化方面尚存在不足[28],有待进一步改进。
综上所述,有关干细胞标记和活体示踪方面的研究虽然取得了重要进展,但尚有许多问题需要解决,目前应用的各种标记示踪方法都有自己的优缺点, 但是随着科技的发展以及相关实验的不断深入,各种标记示踪方法目前存在的问题必定能够得到解决,其中尤其以MRI 活体示踪磁标记干细胞技术值得期待。利用无创伤性影像学技术活体示踪干细胞的研究将会取得重大突破。


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