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OZ Biosciences/Lullaby Transfection Reagent/3 mL/LL73000
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Lullaby is the ideal siRNA transfection reagent for gene silencing. Relying on the TEE-technology, it has been successfully tested on numerous cell lines, reaching up to 90% gene silencing with high reproducibility and a very low toxicity. RNA interference is a powerful technique to shut down genes expression in cells and organisms. This silencing effect constitutes a very helpful tool to study gene’s function and a promising approach for new therapeutic treatments. Short RNA duplexes (siRNA: small interfering RNA, shRNA: small hairpin RNA and dsRNA: double strand RNA) are extremely selective by interacting and inducing the degradation of their specific mRNA targets and thereby inhibit the resulting protein production. Lullaby® siRNA Transfection Reagent introduces the siRNA duplexes in a variety of cells with a very high efficiency leading to exceptional knockdown effects with low doses of siRNA.
"We initially collated a transfection reagent library of 26 reagents...By far, our preferred reagent is Lullaby from OZ Biosciences. We have used this reagent in over 20 cell lines and have found it essential in enabling siRNA screens in hard to tranfect cell lines..., with minimal toxicity"
Emma L. Shanks (2014) Strategic siRNA Screening Approaches to Target Cancer at the Cancer Research UK Beaston Institute, Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening, 17:328-332
- Effective with very low doses of siRNA
- Minimized off-target effects
- Suitable for siRNA, shRNA, dsRNA, etc.
- Applicable to a broad range of cells
- Serum compatible & Non toxic
- Straightforward protocol
Lullaby transfection reagent:
Sizes:
- 500 µL: Up to 1000 assays
- 1000 µL: Up to 2000 assays
- 3 x 1000 µL: Up to 6000 assays
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2021-07-27
肿瘤标志物又称肿瘤标记物，是指特征性存在于恶性肿瘤细胞，或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质，或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质，并能反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到... 查看更多
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2021-08-23
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2021-09-03
DNA（基因）检测－Southern BlotDNA吸印转移1．室温下将电泳后的琼脂糖凝胶浸入500ml溶液A中，摇动30分钟后换500ml新鲜溶液A再摇30分钟，使DNA双链碱变性。溶液A：5M NaCl 300.0ml10M NaOH 50.0mlH2O 650.0ml2．为使凝胶重新回到中性，换入溶液B中重复上 查看更多
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2021-08-26
RNAi实验原理与方法 近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其 查看更多
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2021-08-11
Firalis生物标志物产品介绍/厂家直采/代理商价格 查看更多
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Novus提供全面的神经细胞标记物抗体，已经过多种属多应用验证，使用广泛，文献引用量高。 以下神经细胞标记物，Novus均能提供对应的抗体 查看更多
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2021-09-04
培养细胞中RNA检测－Northern Blot1．制胶：（1％）琼脂糖 2.5g10×Mops缓冲液 25.0mlH2O 192.0ml2．在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。3．取出胶冷却到60℃，于通风柜中加45ml甲醛，混匀。4．加20μl溴化乙锭，混匀。5．令胶液再冷却10分钟。6．将其倒入四面封好的电 查看更多
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2021-09-01
抑郁等精神疾患的发生可能与过量GC对海马的选择性损伤有关,但机理不明,Heuser和Cosi等报道可能是由于高浓度GC导致神经营养因子表达水平降低造成的,而抗抑郁剂不仅使GC受体上调,HPA轴反馈恢复正常,而且使神经营养因子表达升高,达到治疗目的.PC12细胞株为大鼠嗜铬细胞克隆化细胞株,分化的PC12细胞有典型 查看更多
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2021-08-03
有机及无机纳米粒子与ABC转运蛋白相互作用的机制。其中，有机纳米粒子表面含有表面活性剂等辅料，可通过改变膜流动性、清除ATP以及封闭底物结合位点的方式，实现对ABC转运蛋白活性的抑制。无机纳米粒子则作为转运蛋白底物，竞争性抑制其功能。ABC转运蛋白（ATPBindingCassetteTransporters）是位于肿瘤细胞膜上的一个超家族转运蛋白，可通过ATP水解供能，逆浓度的将抗肿瘤药物泵出体外。这一现象被称为多药耐药机制，极大增加 查看更多
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2021-09-10
(德国)emfret (美国)Covance (美国)signalchem Lifescien/signalchem Lifesciences (美国)idtdna (美国)zeptometrix (美国)Macrocyclics (美国)Accurate Chemical (... 查看更多
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2021-09-08
免疫酶标技术1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟，镜下控制染色结果。 查看更多
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2021-09-05
染色体结构显示和检测1） 染色体显带显Q带法1. 漂洗：取经过干热预处理或已老化的染色体标本，置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。2. 染色：浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分钟。 3. 漂洗：浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次，每次5分钟。4. 观察：向标本染色体面滴1~2滴新鲜缓冲液，覆以盖片（避免出气 查看更多
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Re:【讨论】干细胞特性标记以及追踪标记技术经验交流!!123
namulow2021-08-05
干细胞培养诱导后植入体内，观察成骨效果，想做个标记，因为观察周期较长，大概三个月，经查阅文献发现，可行的办法有两个：
1，逆转录病毒将GFP基因导入干细胞，这种办法在导入基因时好像比较麻烦，但是检测好像比较简单。
2，将雄性干细胞植入雌性动物，追踪Y染色体，即SRY基因，但是看文献上说SRY追踪的FISH技术复杂，费用高，但是还没有看到具体的技术步骤，也不知道具体要多少费用。
请多指教
1，逆转录病毒将GFP基因导入干细胞，这种办法在导入基因时好像比较麻烦，但是检测好像比较简单。
2，将雄性干细胞植入雌性动物，追踪Y染色体，即SRY基因，但是看文献上说SRY追踪的FISH技术复杂，费用高，但是还没有看到具体的技术步骤，也不知道具体要多少费用。
请多指教
【求助】请问不是蓝色荧光的细胞核标记有哪些? 细胞技术讨论版...123
霄子2021-08-11
各位大虾，我现在需要用两种细胞核标记物标记活细胞，应经用了DAPI，是蓝色荧光的，除外还能用哪种标记物呢？万分感谢啊！
细胞免疫组化标记(阳性率大于70%)好吗?_有问必答_123
xsssaber1472017-10-03
目的初步筛选出肝母细胞瘤(HB)中的肿瘤干细胞(NSC)相关表面标记组合,并了解NSC的分布。方法选择入住江西省儿童并接受的HB患儿,采用免疫组织化学染色的方法,观察干细胞相关标记物CD34、Thy-1、c-kit、CD56和干细胞生长因子(SCF),在HB组织及距肿瘤组织边缘3cm以外的正常肝脏组织的表达和分布。结果
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
Nature子刊发布突破性单细胞标记技术123
3453432512021-08-02
问问你的师兄师姐或者导师 谁知道你的方法创新性高不高 文章写的好不好 实验充分不充分
【求助】干细胞标记的问题 再生医学与组织工程讨论版论坛123
地下铁2021-07-20
干性标记和干细胞标记物有区别吗 123
内裤控丶4162017-10-03
目的初步筛选出肝母细胞瘤(HB)中的肿瘤干细胞(NSC)相关表面标记组合,并了解NSC的分布。方法选择入住江西省儿童医院并接受手术的HB患儿,采用免疫组织化学染色的方法,观察干细胞相关标记物CD34、Thy-1、c-kit、CD56和干细胞生长因子(SCF),在HB组织及距肿瘤组织边缘3cm以外的正常肝脏组织的表达和分布。结果
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
【求助】小鼠造血干细胞分离时表面标志物用什么? 神经生物与再生...123
鬼子2021-08-08
[精品]干细胞标记示踪技术的研究进展123
tcx1532021-07-23
目前标记干细胞的MRI 对比剂主要有两类： 一类是以Gd3+对比剂即所谓顺磁性对比剂，主要产生T1 正性对比效应，目前有关的应用报道不多，主要是因为在目前MRI 场强下Gd3+的量需要达到相当程度，这在技术上尚有难度。
当然也有几项研究成功地应用Gd3+复合物通过胞饮作用或细胞内吞作用进入细胞内而后行MRI 的报道。Modo 等应用右旋糖酐聚合物连接的Gd-DTPA 与若丹明颗粒(gadolinium rhodamine dextran,GRID )可同时提供MRI 和荧光组织显像，将之标记永生化小鼠神经干细胞MHP36 细胞后移植至脑缺血大鼠的海马后进行4.7 T MR 离体成像， 证实MRI 能可靠分辨移植细胞以及示踪细胞迁移。
另一类是通过葡聚糖生物高分子包裹Fe3O4 晶体形成核壳式结构的超顺磁性氧化铁(superpara-magnetic iron oxide，SPIO) 纳米材料对比剂， 主要产生较强的T2 负性对比效应。其特点是粒径小、穿透力强且弛豫率约为同样 564 国际医学放射学杂志International Journal of Medical Radiology 2009 Nov; 32(6) 条件下Gd3+的7～10 倍，在很低浓度(nmol)时即可在 MRI 上形成对比且具有生物可降解性，能被细胞代谢后进入正常血浆铁池与红细胞血红蛋白结合或用于其他代谢过程。
以上特点使氧化铁类对比剂更受关注，是目前较理想的磁共振示踪剂。近年来，间充质干细胞(mesenchymal stem cells， MSCs)磁标记后MRI 示踪已成功应用于中枢神经系统和心脏等器官。Jendelova 等[21]将SPIO 和BrdU 双重标记的MSCs 经对侧脑半球局部移植入大鼠脑皮质损伤模型， 术后28 d 常规1.5 T MRI 显示MSCs 从注射点向对侧脑损伤区域迁移，脑损伤区域内见特异性低信号分布持续至术后50 d。
切片BrdU 免疫组化分析显示移植的MSCs 分化为神经元细胞，术后大鼠的神经功能改善，因此认为损伤组织可产生丰富的化学因子促使移植的MSCs 进行靶向迁移性修复。Kraitchman 等[22]利用Feridex 标记MSCs 经导管注入犬心肌梗死模型周边区域， 术后持续8 周，1.5 T MRI 明确观察到移植部位发出一条低信号线指向心肌梗死区域，心肌梗死面积逐渐减小。活体MRI 示踪磁标记MSCs 在骨关节领域也显示出重要的应用前景。
Mayer-Kuckuk 等应用与荧光基团结合的氧化铁粒子标记7F2 细胞和MC3T3-E1#4 细胞， 从股骨干骨骺端注射30 μL 含1×105 个磁标记细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)至小鼠股骨髓腔，7 T MR 活体成像显示骨髓腔内见特异性低信号持续至术后第9 天，此后髓腔内信号增高，提示移植MSCs 在股骨髓腔内部分丢失。
居等应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine, PLL) 的偶联物 Fe2O3-PLL , 有效地标记了人脐血间充质干细胞,成功地进行了磁共振标记细胞成像， 且对细胞的活力、凋亡等生物学特性无明显影响。
国内一些研究者进行的实验室结合前期间充质干细胞的磁标记工作，正在进行肝干细胞、神经干细胞的磁探针标记， 评价其对细胞活力增殖与凋亡代谢分化的影响，评价MRI 不同序列上不同浓度标记细胞的信号特点，并将标记后的肝干细胞进行正常及肝衰大鼠体内移植，神经干细胞标记后进行正常及大脑半球缺血大鼠体内移植，用MRI 动态示踪移植细胞分析移植细胞的生存状态，总结MRI 示踪干细胞的理论依据、技术方法及影像学表现特征，达到活体下追踪干细胞存活迁移的目的[24-27]。虽然MRI 示踪干细胞已经显示出了良好的应用前景，但磁标记会随着细胞分裂而稀释，在监测移植后干细胞的分化方面尚存在不足[28]，有待进一步改进。
综上所述，有关干细胞标记和活体示踪方面的研究虽然取得了重要进展，但尚有许多问题需要解决，目前应用的各种标记示踪方法都有自己的优缺点， 但是随着科技的发展以及相关实验的不断深入，各种标记示踪方法目前存在的问题必定能够得到解决，其中尤其以MRI 活体示踪磁标记干细胞技术值得期待。利用无创伤性影像学技术活体示踪干细胞的研究将会取得重大突破。
当然也有几项研究成功地应用Gd3+复合物通过胞饮作用或细胞内吞作用进入细胞内而后行MRI 的报道。Modo 等应用右旋糖酐聚合物连接的Gd-DTPA 与若丹明颗粒(gadolinium rhodamine dextran,GRID )可同时提供MRI 和荧光组织显像，将之标记永生化小鼠神经干细胞MHP36 细胞后移植至脑缺血大鼠的海马后进行4.7 T MR 离体成像， 证实MRI 能可靠分辨移植细胞以及示踪细胞迁移。
另一类是通过葡聚糖生物高分子包裹Fe3O4 晶体形成核壳式结构的超顺磁性氧化铁(superpara-magnetic iron oxide，SPIO) 纳米材料对比剂， 主要产生较强的T2 负性对比效应。其特点是粒径小、穿透力强且弛豫率约为同样 564 国际医学放射学杂志International Journal of Medical Radiology 2009 Nov; 32(6) 条件下Gd3+的7～10 倍，在很低浓度(nmol)时即可在 MRI 上形成对比且具有生物可降解性，能被细胞代谢后进入正常血浆铁池与红细胞血红蛋白结合或用于其他代谢过程。
以上特点使氧化铁类对比剂更受关注，是目前较理想的磁共振示踪剂。近年来，间充质干细胞(mesenchymal stem cells， MSCs)磁标记后MRI 示踪已成功应用于中枢神经系统和心脏等器官。Jendelova 等[21]将SPIO 和BrdU 双重标记的MSCs 经对侧脑半球局部移植入大鼠脑皮质损伤模型， 术后28 d 常规1.5 T MRI 显示MSCs 从注射点向对侧脑损伤区域迁移，脑损伤区域内见特异性低信号分布持续至术后50 d。
切片BrdU 免疫组化分析显示移植的MSCs 分化为神经元细胞，术后大鼠的神经功能改善，因此认为损伤组织可产生丰富的化学因子促使移植的MSCs 进行靶向迁移性修复。Kraitchman 等[22]利用Feridex 标记MSCs 经导管注入犬心肌梗死模型周边区域， 术后持续8 周，1.5 T MRI 明确观察到移植部位发出一条低信号线指向心肌梗死区域，心肌梗死面积逐渐减小。活体MRI 示踪磁标记MSCs 在骨关节领域也显示出重要的应用前景。
Mayer-Kuckuk 等应用与荧光基团结合的氧化铁粒子标记7F2 细胞和MC3T3-E1#4 细胞， 从股骨干骨骺端注射30 μL 含1×105 个磁标记细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)至小鼠股骨髓腔，7 T MR 活体成像显示骨髓腔内见特异性低信号持续至术后第9 天，此后髓腔内信号增高，提示移植MSCs 在股骨髓腔内部分丢失。
居等应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine, PLL) 的偶联物 Fe2O3-PLL , 有效地标记了人脐血间充质干细胞,成功地进行了磁共振标记细胞成像， 且对细胞的活力、凋亡等生物学特性无明显影响。
国内一些研究者进行的实验室结合前期间充质干细胞的磁标记工作，正在进行肝干细胞、神经干细胞的磁探针标记， 评价其对细胞活力增殖与凋亡代谢分化的影响，评价MRI 不同序列上不同浓度标记细胞的信号特点，并将标记后的肝干细胞进行正常及肝衰大鼠体内移植，神经干细胞标记后进行正常及大脑半球缺血大鼠体内移植，用MRI 动态示踪移植细胞分析移植细胞的生存状态，总结MRI 示踪干细胞的理论依据、技术方法及影像学表现特征，达到活体下追踪干细胞存活迁移的目的[24-27]。虽然MRI 示踪干细胞已经显示出了良好的应用前景，但磁标记会随着细胞分裂而稀释，在监测移植后干细胞的分化方面尚存在不足[28]，有待进一步改进。
综上所述，有关干细胞标记和活体示踪方面的研究虽然取得了重要进展，但尚有许多问题需要解决，目前应用的各种标记示踪方法都有自己的优缺点， 但是随着科技的发展以及相关实验的不断深入，各种标记示踪方法目前存在的问题必定能够得到解决，其中尤其以MRI 活体示踪磁标记干细胞技术值得期待。利用无创伤性影像学技术活体示踪干细胞的研究将会取得重大突破。
流式细胞仪检测树突细胞的表面标记应注意什么问题123
苦也不太差°鸹2017-10-03
千万不是空白对照，而是isotype对照。
比如你用的CD1a－FITC（如果是鼠单抗IgG1，那对照抗体就要用相同物种的非特异性IgG1-FITC）。注意浓度要相同。一般提供抗体的公司BD，santa cruz等有提供的。其他就按照说明书的推荐浓度和孵育时间。
比如你用的CD1a－FITC（如果是鼠单抗IgG1，那对照抗体就要用相同物种的非特异性IgG1-FITC）。注意浓度要相同。一般提供抗体的公司BD，santa cruz等有提供的。其他就按照说明书的推荐浓度和孵育时间。
【求助】怎么检测细胞通透性? 细胞技术讨论版论坛123
Kyoya雀MZ42017-10-03
（1）死/活细胞染色法 ： 使用选择性死/活细胞染色的特殊染料如不易穿透活细胞膜的台盼兰、苯胺黑及用于活细胞着色的中性红、健那绿、亚甲蓝、甲苯胺蓝等，通过染色区分死活细胞并计数来间接判断细胞膜通透性的改变情况。该方法简单，方便，价廉；但灵敏度和精确性差。
（2）荧光标记法 ： 使用二乙酸荧光素（FDP）、碘化丙啶（PI）或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育，用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是（1）法的“荧光”版，但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。
（3）硝酸镧(La)示踪法： 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙，但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜)，也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时， 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内， 并在电镜下显示， 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
（4）LDH释放法： 在正常情况下，细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的， 但在细胞膜受损伤而通透性增加时，可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
（2）荧光标记法 ： 使用二乙酸荧光素（FDP）、碘化丙啶（PI）或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育，用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是（1）法的“荧光”版，但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。
（3）硝酸镧(La)示踪法： 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙，但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜)，也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时， 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内， 并在电镜下显示， 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
（4）LDH释放法： 在正常情况下，细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的， 但在细胞膜受损伤而通透性增加时，可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
小鼠肺泡上皮细胞 MLE12的应用 123
newrain452017-10-03
急，肺泡上皮细胞的标记抗体有什么？
BrdU标记法 实验方法123
userbyme2021-08-04
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