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Accutase is a sterile filtered ready-to-use detachment solution and can also be used for tissue dissociation. It was developed for very gentle and effective detachment of adherent cells. The well balanced combination of proteolytic and collagenolytic enzymes ensures that surface proteins and epitopes stay entirely intact. Accutase is therefore perfectly suited for applications, which require an unchanged cell surface.Each batch of the PromoCell Accutase-Solution is tested on primary human cells. Accutase is supplied in Dulbecco´s PBS containing 0.5 mM EDTA

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可能原因 建 议 1、抗体浓度太高 一抗或二抗浓度太高会导致高背景,降低抗体浓度 2、使用的封闭液不兼容 对比不同的封闭缓冲液 3、非特异性位点封闭不足 优化封闭缓冲液,最好的封闭缓冲液具有系统依赖性 提高封闭液中蛋白的浓度 优化封闭时间和/或温度。室温封闭至少1 h或者4°C封闭过夜 在封闭液 查看更多>
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规格(核心参数):1袋(可配250ml溶液);PH4.00;是PH计/酸度计上面用的试剂,也叫标准缓冲溶液、PH标准液/校准液 查看更多>
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我想问一下如何配置用于稀释病毒的PBS缓冲液

缓冲液;能抵御少量的酸,碱或稀释少量倍数时,体系的pH基本不变的溶液称为缓冲溶液.缓冲溶液的缓冲对一般是由共轭酸碱对或两性物质组成.缓冲对在生物中是指酸碱性相反的东西,,可以相互中和,比如在人体中,乳酸和碳酸氢钠就是一对缓冲对
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WB前,上样缓冲液是买的成品,在-20°冰箱保存,之前做一直正常,这次蛋白样品加上样缓冲液后变成棕色了?啥情况?是蛋白样品PH值的关系吗?这个还能继续跑电泳吗?

哪位高手给指导一下,谢谢!

由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗,所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。
  在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。
  缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。
  组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH最小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:
  此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。
  弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1
  弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1
  例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1。

  制备

  为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液。
  以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法。对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法。
  缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2+ 离子时,可用下面的反应:
  白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应。
  常用缓冲液配制
  枸橼酸-磷酸氢二钠
  甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml,置冰箱内保存。
  乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。
  取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml,混合,摇匀,即得。
  氨-氯化铵缓冲液
  取氯化铵1.07g,加水使溶解成100ml, 再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0,即得。
  氨-氯化铵缓冲液
  取氯化铵5.4g,加水20ml溶解后,加浓氨溶液35ml,再加水稀释至100ml,即得。
  醋酸-醋酸钠缓冲液
  取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。
  醋酸-醋酸钠缓冲液
  取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
  醋酸-醋酸钠缓冲液
  取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。
  醋酸-醋酸铵缓冲液
  取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml,即得。
  醋酸-醋酸铵缓冲液
  取醋酸铵77g,加水约200ml使溶解,加冰醋酸57ml,再加水至1000ml,即得。
  醋酸-醋酸铵缓冲液
  取醋酸铵100g,加水300ml使溶解,加冰醋酸7ml,摇匀,即得。
  磷酸盐缓冲液
  取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,即得。

  当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HOAc与NaOAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。

  参考资料:http://baike.baidu.com/view/901429.htm

像图中所示,我1%的羧基微球用EDC活化,离心后用50Mm、PH7.2的PB缓冲液悬浮,用超声波超声5分钟,然后就分层了,上层是微球。

稳定PH值,通入酸性或碱性物质时 都能使PH保持在一个可以接受的范围内.
碳酸氢钠溶液是一种co2缓冲液,当瓶内二氧化碳量减少时,碳酸氢钠溶液释放co2,反之吸收co2.因此它能保持瓶内二氧化碳量大致不变.

日本药典中0.1mol/L的磷酸缓冲液pH7.0是怎么配置的啊,求救!!!!

选择缓冲溶液的原则:
1、 缓冲溶液对反应物的测定没有干扰
2、缓冲组分的浓度为1:1
3、有足够的缓冲容量
4、缓冲溶液的PH应在所需范围内
5、组成缓冲溶液的弱碱PKB和弱酸PKA应接近或等于所需的POH值或PH值(PH+POH=14)
配制
只要知道缓冲对的PH值,和要配制的缓冲液的pH值(及要求的缓冲液总浓度),就能按公式计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算,较麻烦,前人为减少后人的计算麻烦,已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系并列出了表格。只要我们知道要配制的缓冲液的pH,经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。
经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升,而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
计算好后,按计算结果准确称好固态化学成分,放于烧杯中,加少量蒸馏水溶解,转移入50ml容量瓶,加蒸馏水至刻度,摇匀,就能得到所需的缓冲液。
各种缓冲溶液的配制,均按表格按比例混合,某些试剂,必须标定配成准确浓度才能进行,如醋酸、氢氧化钠等。另外,所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。
TBS缓冲液 123
弘贝方弘2017-10-02
索莱宝的TBS缓冲液怎么样

TBST中含有Tris-Hcl,NaCl,Tween20这三种物质,是做WESTERNBLOT中常用的一种缓冲液

TBST缓冲液的配制

1000ml×TBST的配置

先称量NaCl40g,倒入烧杯中,加DDW蒸馏水400ml,再称量NaCl47.6g,倒入刚才的那个烧杯中(PS:由于NaCl的量太多,一次称量不方便,所以分两次称量,且易于溶解)。往烧杯中加入Tris—HCl缓冲液100ml,最后加(吐温20)5ml,转入1000ml容量瓶中,在定容,转移即可。

TBST缓冲液的应用:

1.主要用于免疫组化和原位杂交,酶联免疫等实验中,清洗免疫印。

2.迹膜;

注意事项:

1.TBST缓冲液,PH7.2-7.5;

2.颜色为无色透明液体;

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴防护手套操作;


TE缓冲液(pH 8.0)配制方法 123
风记社六团mfj2017-09-28
10 mmol/LTris-HCl(pH 8.0)
  1 mmol/LEDTA(pH 8.0)
  因为含有以上两种物质,所以称为TE。
  配制分三步:
  1)1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制:称取Tris碱6.06 g,加超纯水40 ml溶解,滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0,定容至50 ml。
  2)0.5 M EDTA(pH 8.0)50 ml的配制:称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g,加超纯水35 ml,剧烈搅拌,用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0,定容至50 ml。(EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时,才会溶解。)
  3)1×TE(10 mM Tris-HCl,pH 8.0;1 mM EDTA,pH 8.0)的配制:
  作用:
  TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存. 10mMTris-Hcl,pH有7.47.68.0三种。
  EDTA调到8.0是为了更好溶解,其他只要调到相应pH就可以。Tris在7-8附近缓冲能力很强,所以加8.0的EDTA下去后,不会改变pH。
浓度为0.11mol/l及pH7.2的磷酸盐缓冲液怎么配制?
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