
- ONO-AE3-208
MK-2894EP4 receptor inhibitor |
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
































Quality Control & MSDS
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- Purity = 98.00%
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- MSDS (Material Safety Data Sheet)
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Chemical structure

Description | MK-2894 is a highly potent and selective inhibitor of EP4 receptor with IC50 value of 2.5 nM. | |||||
Targets | EP4 receptor | |||||
IC50 | 2.5 nM (Ki=0.56±0.1 nM) |

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Cas No. | 1006036-87-8 | SDF | Download SDF |
Synonyms | MK 2894;MK2894 | ||
Chemical Name | 4-[1-[[2,5-dimethyl-4-[[4-(trifluoromethyl)phenyl]methyl]thiophene-3-carbonyl]amino]cyclopropyl]benzoic acid | ||
Canonical SMILES | CC1=C(C(=C(S1)C)C(=O)NC2(CC2)C3=CC=C(C=C3)C(=O)O)CC4=CC=C(C=C4)C(F)(F)F | ||
Formula | C25H22F3NO3S | M.Wt | 473.51 |
Solubility | Soluble in DMSO | Storage | Store at -20°C |
Shipping Condition | Evaluation sample solution : ship with blue ice.All other available size:ship with RT , or blue ice upon request | ||
General tips | For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be stored below -20℃ for several months. |
MK-2894 is a highly potent and selective inhibitor of EP4 receptor with IC50 value of 2.5 nM [1].
MK-2894 is a highly selective and potent second generation EP4 antagonist with a Ki of 0.56±0.1nM in the radio ligand binding assay using membranes prepared from human EP1-4 overexpressed HEK 293 cell lines. And the EP4 functional assay measures the inhibition of PGE2-induced cAMP accumulation with IC50 of 2.5±0.7nM. In the AIA model and GI tolerability model in male SD rats, MK-2894 shows a dose-dependent inhibition of pain response with ED50 of 0.36 mg/kg. It also has the potent activity in inhibiting chronic pawswelling with ED50 of 0.02 mg/kg/day. Overall, MK-2894 displays the desired potency, selectivity, pharmacokinetic, and GI tolerability profile for further development and represents a potential safer alternative for treating pain and inflammation than traditional NSAIDs and coxibs [1].
References:[1] Marc Blouin, Yongxin Han, Jason Burch, Julie Farand, Christophe Mellon, Mireille Gaudreault, Mark Wrona, Jean-Francois Levesque, Danielle Denis, Marie-Claude Mathieu, Rino Stocco, Erika Vigneault, Alex Therien, Patsy Clark, Steve Rowland, Daigen Xu, Gary O’Neill, Yves Ducharme and Rick Friesen. The Discovery of 4-{1-[({2,5-Dimethyl-4-[4-(trifluoromethyl)benzyl]-3-thienyl}carbonyl)amino]cyclopropyl}benzoic Acid (MK-2894), A Potent and Selective Prostaglandin E2 Subtype 4 Receptor Antagonist. J. Med. Chem. 2010, 53: 2227–2238.
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另外还想问一下,还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
问:1如才能提高柱子吸附蛋白量?
2样品中的核酸对吸附有无太大影响?
3我拟采用阴离子交换树脂,问pH8.0条件下除去核酸可否?
4怎么提高样品的澄清度?
以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。
扩展知识:
在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
快速细胞破碎法鉴定转化子DNA(分离效果一般,二者要相差比较大才行,我常用前者,一般T载体上的要五百bp以上,一千bp以上最好!)
快速细胞破碎法鉴定转化子DNA
1、转化子菌落接种于相应的抗性培养基2.0ml,过夜培养。(要求设立对照!)
2、制备0.8%琼脂糖胶。
3、取1.5ml过夜培养物离心,15kr/min,1min;弃上清。(剩余保种!)
4、加水重悬,离心如上。留沉淀。
5、每管加50—100µl破碎细胞缓冲液(见后配方),充分涡旋,使菌体悬浮均匀
6、水浴37℃,15min。
7、离心15kr/min,15min。
8、立即取20-30µl上清点样进行电泳,4—6V/cm。
9、电泳,当溴酚蓝到达凝胶板的2/3时,停止电泳。
10、染胶15—30min。
配方:50mMTris-HCl(pH6.8);1%SDS;2mMEDTA;400mM蔗糖;0.01%溴酚兰
配法:1MTris-HCl(pH6.8),10ml;20%SDS,10ml;250mMEDTA,1.6ml;蔗糖27.2g;1.2%溴酚兰1.67ml加水至200ml;
煮沸法快速分析转化子DNA
1、挑单菌落于2.0ml相应抗生素液体培养基中,37℃振荡过夜(约16小时)。
2、取1.5ml过夜培养物于离心管中,15kr/min,1min。(剩余保种!)
3、弃上清,倒扣、流尽。
4、加入350µl由下列试剂组成溶液,混匀。
(8%蔗糖、0.5%TritonX-100、50mMEDTA(pH8.0)、10mMTris-HCl(pH8.0))
5、加入25µl新鲜配制的10mg/ml的溶菌酶(溶于10mMTris-HClpH8.0中),涡旋3--5sec。
6、立即将离心管浸入沸水浴40sec。
7、离心15kr/min,10min。
8、转移上清至另一离心管,加入2.5MNaAc40µl,加入异丙醇420µl,混匀后冰浴15min,沉淀DNA。
9、离心15kr/min,15min,将上层异丙醇弃去,真空抽干。
10、加入50µlTE缓冲液重悬,(含Rnase50µg/ml)。37℃保温10min。
11、取10µl样品点样,电泳,染胶。观察质粒DNA的区带位置。(要求有对照电泳!)
平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟,然后上样的
但是一方面,常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏,因为发现加冰以后超声会变得非常弱,所以都么加冰。另一方面,因为水浴超声声强是不均匀的,如果样品多的话,会发现有些已经超碎DNA,但有些还是一团。
不知道是否有其他更好的方法?

