【求助】超声处理细胞/细菌样品破碎DNA是否合理？
2009-07-26
问题描述：
加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后，样品里面的DNA会和SDS形成一团东西，无法直接上样
平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟，然后上样的
但是一方面，常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏，因为发现加冰以后超声会变得非常弱，所以都么加冰。另一方面，因为水浴超声声强是不均匀的，如果样品多的话，会发现有些已经超碎DNA，但有些还是一团。
不知道是否有其他更好的方法？
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supermaltose
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skykiller
用户我们的做法是取个2ml的EP管，挑点菌，加入PBS混匀后，用超声波破碎仪冰水浴破菌（注意不是清洗机）个30-40次，再取样加loADIngbuffer电泳。不过前提是要有那种很小超声探头的超声仪。另外可选的就是加点DNA降解酶了。
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supermaltose
用户嗬嗬，多谢你的意见~
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