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biomax/RaFPT096 Rat Normal (5 SLIDES/PACK)/1/RaFPT096
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biomax
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RaFPT096
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  • Product Code: RaFPT096
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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产品介绍产品特点:1、融合完美的混匀半径与出色的2维混匀技术。2、高效的混匀和温度控制,具有可编程功能。3.具有断电恢复功能,断电恢复后仪器可按原设定程序自动恢复运行。4.微处理器控制,温控线性好、振荡转速准确、波动小。5.设有定时功能,0 查看更多>
广州科适特科学仪器有限公司在发布的固定角度试管旋转混匀仪供应信息,浏览与固定角度试管旋转混匀仪相关的产品或在搜索更多与固定角度试管旋转混匀仪相关的内容。 查看更多>
上海江东仪器有限公司公司拥有*的技术人员和良好的技工队伍,具备先进的技术和较强的开 查看更多>
山东巴罗克生物科技股份有限公司在发布的可调式漩涡混匀仪供应信息,浏览与可调式漩涡混匀仪相关的产品或在搜索更多与可调式漩涡混匀仪相关的内容。 查看更多>
大龙兴创实验仪器(北京)有限公司在发布的旋转混匀仪供应信息,浏览与旋转混匀仪相关的产品或在搜索更多与旋转混匀仪相关的内容。 查看更多>
HC-100恒温混匀仪(制冷)是由上海朗赋实业有限公司代理或销售的BIORISE品牌的仪器,产品来源于上海。上海朗赋实业有限公司是中国最权威的HC-100恒温混匀仪(制冷)销售服务商之一,在上海等地方销售HC-100恒温混匀仪(制冷)已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业HC-100恒温混匀仪(制冷)仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的HC-100恒温混匀仪(制冷)产品 查看更多>
在医学和生物学领域,在实验的过程中,经常需要在恒温下对实验对象进行振荡混匀操作。如果用人工的方法,既不好保证恒温,更不容易振荡混匀,为了解决这个难题,技术人员研发出恒温混匀仪,它可以在很短的时间内就达到实验要求的温度并且保持恒温,而且可以轻易的实现振荡混匀的操作,这在很大程度上加快了实验的速度,不但提高了工作效率,更重要的是实验的准确度大大的得到了提升。 查看更多>
珠海市茂亦生物科技有限公司在发布的恒温混匀仪供应信息,浏览与恒温混匀仪相关的产品或在搜索更多与恒温混匀仪相关的内容。 查看更多>
北京乾明基因技术有限公司在发布的米欧 MIX-25 迷你混合仪 漩涡混匀仪 涡旋振荡器供应信息,浏览与米欧 MIX-25 迷你混合仪 漩涡混匀仪 涡旋振荡器相关的产品或在搜索更多与米欧 MIX-25 迷你混合仪 漩涡混匀仪 涡旋振荡器相关的内容。 查看更多>
SK-Ⅱ调速快速混匀器 快速混匀器又称旋涡混合器,主要依靠装液容器与旋盘的平稳接触,使容器内的溶液快速混匀,混匀速度由人为施加的压力大小调节。是生物、遗传、医学、环保、水产、生化实验室、分析室、教育科研的必备工具。 SK-Ⅱ型快速混匀器 SK-Ⅱ Swift Mixer 型 号 TypeNo. 工作方式 Working Style 振荡幅度 (mm) Vibration Range (mm) 振荡频率 (rpm) Vibration F... 查看更多>
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会不会导致DNA片段破碎?
最近在用水稀释法加硫酸铵做卵黄抗体的初步纯化,在水稀释这步担心由于颗粒物质没有和水溶液充分混合,导致卵黄抗体回收率降低,于是将第一次水稀释后得到的上清进行离心后,又将沉淀用水重悬混合,用相同的方法再来考察是否有残留的卵黄抗体,从SDS-PAGE中可以发现,沉淀中是有残留的,而且量还不算少,于是我考虑在卵黄加入水稀释后,用超声波来混匀,使卵黄里面的颗粒物质更均匀更充分的释放在水溶液里,我的问题是应该采取怎么样的一个程序呢,即不影响我的蛋白活性也能更好的提高回收率?

大家请赐教!
RKEF工艺技术123
2017-09-30
什么是RKEF工艺
超声波细胞破碎123
ecor2004-10-19
我最近做超声波破碎大肠杆菌,但是一直效果都不好,看了一些帖子,但是还是没弄明白。请问:裂解缓冲液需要加多少(?ml/g菌)?超声波作用的时间一般是多少(有人说半小时,有人说10分钟以内)?破碎后菌液是什么状态的?会变澄清吗?如果一次做60ml菌液(置于100ml离心管中),需要注意什么呢?
我打算做蛋白提取,以前单纯用超声效果不好,为了尽量保留活性,选择用溶菌酶见超声破碎的方法。
我按照分子克隆上的步骤:
1.菌体称重为0.4g,加PBSbuffer3ml(PH=8.05),充分混匀。
2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升,至终浓度4mg/ml。冰置3小时。
3.超声400w,10s,10s,40次,结果目测还是乳白色,镜检很多菌体。

为什么破不开,搞不懂,我前几天做预实验的时候,还能变澄清???
注:预实验的步骤与现在的一样,只是菌体重量是0.1g加PBS3ml,再加溶菌酶至1mg/ml,超声400w,10s,10s,20次。

麻烦大家能给以帮助,先谢谢了...
想问一下,一般破碎细胞冻融时间要多久,几次。冻融时间与次数与细胞破碎程度有关吗?因为我们这一般都是十二小时一次,共三次。但因为我必须一天完成,所以我第一次三小时,化一小时,第二次二小时,化半小时,第三次冻只有一小时。我不知这样破碎是否完全。
另外还想问一下,还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳;如果是分析蛋白质,则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。
以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:

1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。

扩展知识:

在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
样品一般都要做到最好,你看成品的具体要求,水分、细度、合格率等。
一种碎胶机破碎系统,包括底座、转刀、固定刀、筛孔刀,所述底座前后面设有平板,平板上设置有旋转轴,转刀固定在旋转轴上,所述底座的内端面左右两侧设有固定刀,固定刀的刃部面向旋转轴,所述筛孔刀安装在底座下部,筛孔刀位于旋转轴的正下方。通过设置转刀、固定刀和筛孔刀,三刀同时工作,胶块受到三重切割,可有效快捷的将大胶块破碎并且得到预定规格胶粒的颗粒更加均匀,降低了功耗,提高了工作效率,同时设置有液压缸控制筛孔刀的抽出和复位,打开门时便于对检修刀具及对内部进行清洁,不仅结构简单、操作维护也更加方便,且经济实用。
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳;如果是分析蛋白质,则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:

1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。
加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后,样品里面的DNA会和SDS形成一团东西,无法直接上样

平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟,然后上样的

但是一方面,常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏,因为发现加冰以后超声会变得非常弱,所以都么加冰。另一方面,因为水浴超声声强是不均匀的,如果样品多的话,会发现有些已经超碎DNA,但有些还是一团。

不知道是否有其他更好的方法?
货物学试题(2)123
找不回的岁月2017-09-30
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