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abfrontier/Marathon cDNA Amplification Kit/Marathon cDNA Amplification Kit, 5 cDNA&100 PCRrxns/634913
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제품특징
□ 특징
● Library screening없이 신속하게 cDNA 확보 가능
● 귀찮은 single-stranded ligation 또는 tailing reactions 없음
● 동일한 template를 5" RACE와 3" RACE에 동시에 적용 가능
일반적인 RACE 제품들은 5’-RACE 또는 3’-RACE, 둘 중 하나의 실험에만 적용되도록 template가 제조된다. 그러나 Marathon cDNA Amplification Kit을 이용하면 동일한 template를 이용하여 5’-RACE와 3’-RACE 모두에 적용할 수 있으며 특화된 adaptor를 채용하여 background를 감소시킨다. Marathon cDNA amplification은 expressed sequence tags (ESTs), differential display, RNA fingerprinting, 그리고 cDNA subtraction과 같은 다양한 RNA 특성을 신속하게 파악하는데 사용할 수 있다. poly A+ RNA로부터 변형된 lock-docking oligo(dT) primer를 이용하여 Marathon cDNA 합성된다. 변형된 lock-docking oligo(dT) primer는 3’-end에 2개의 degenerate nucleotides를 갖고 있다. cDNA합성 후 blunt ends가 형성되고 Marathon adaptor가 double-stranded cDNA 양말단에 ligation된다. Clontech에서는 고품질의 프리미엄 poly A+ RNA를 이용해 합성된 double-stranded cDNA에 Marathon Adaptor가 ligation된 Marathon-Ready cDNAs를 판매하고 있다. 이 Marathon-Ready cDNA를 이용하면 간편하게 RACE를 수행할 수 있다.
□ applications
● ACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)
● Identification of 3"/5" UTRs
● Full-length gene cloning
● Gene cloning and analysis
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
蚂蚁淘承诺
正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2018-12-12
北京普华量宇科技有限公司在发布的Mortexer&BenchMixer漩涡混匀器供应信息，浏览与Mortexer&BenchMixer漩涡混匀器相关的产品或在搜索更多与Mortexer&BenchMixer漩涡混匀器相关的内容。 查看更多
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2018-03-20
北京乾明基因技术有限公司在发布的米欧 MIX-25 迷你混合仪 漩涡混匀仪 涡旋振荡器供应信息，浏览与米欧 MIX-25 迷你混合仪 漩涡混匀仪 涡旋振荡器相关的产品或在搜索更多与米欧 MIX-25 迷你混合仪 漩涡混匀仪 涡旋振荡器相关的内容。 查看更多
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2018-03-20
Eppendorf 艾本德中国有限公司在发布的Eppendorf MixMate 混匀小精灵供应信息，浏览与Eppendorf MixMate 混匀小精灵相关的产品或在搜索更多与Eppendorf MixMate 混匀小精灵相关的内容。 查看更多
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2017-10-30
东南科仪在发布的VELP CLASSIC漩涡混匀器供应信息，浏览与VELP CLASSIC漩涡混匀器相关的产品或在搜索更多与VELP CLASSIC漩涡混匀器相关的内容。 查看更多
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山东巴罗克生物科技股份有限公司在发布的恒温振荡金属浴 加热 制冷 混匀供应信息，浏览与恒温振荡金属浴 加热 制冷 混匀相关的产品或在搜索更多与恒温振荡金属浴 加热 制冷 混匀相关的内容。 查看更多
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2021-08-22
医流商城提供赛洛捷克MX-T6-Pro LED数控型滚轴混匀仪报价、参数、图片、特点、咨询等有效信息,100%正品保证,是您网上购买赛洛捷克MX-T6-Pro LED数控型滚轴混匀仪的放心平台 查看更多
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2021-07-22
上海江东仪器有限公司公司拥有*的技术人员和良好的技工队伍,具备先进的技术和较强的开 查看更多
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2021-08-07
我做 western 的时候，发现目前的资料都很老，网上的资料也大多互相传抄，说法各异，于是综合了目前网上所能找到的资料和个人实际经验，编辑了这份 western blot 操作步骤，内容包括主要操作步骤和所需要注意的有用的细节，并附上参考文献。我按下文的步骤操作已经做出来了稳定可重复的、背景干净的 western 条带了，所以相信你也行。为了节省时间，我总结了一下 western bl 查看更多
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2021-08-14
产品介绍产品特点:1、融合完美的混匀半径与出色的2维混匀技术。2、高效的混匀和温度控制，具有可编程功能。3.具有断电恢复功能，断电恢复后仪器可按原设定程序自动恢复运行。4.微处理器控制，温控线性好、振荡转速准确、波动小。5.设有定时功能，0 查看更多
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2021-08-27
[db:简介] 查看更多
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2021-07-31
血流变分析仪循环血液混匀 查看更多
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常见问题
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蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
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商品咨询
RKEF工艺技术123
2017-09-30
什么是RKEF工艺
真菌细胞壁的破碎方法 免疫学讨论版论坛123
zhangzaiguozyf2021-07-23
大家好，有谁知道真菌细胞壁的破碎方法，各种试剂的使用浓度，越详细越好，谢谢
冻融法破碎细胞的冻融时间与破碎程度有无关联 细胞技术讨论版...123
sun212021-07-20
想问一下，一般破碎细胞冻融时间要多久，几次。冻融时间与次数与细胞破碎程度有关吗？因为我们这一般都是十二小时一次，共三次。但因为我必须一天完成，所以我第一次三小时，化一小时，第二次二小时，化半小时，第三次冻只有一小时。我不知这样破碎是否完全。
另外还想问一下，还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
另外还想问一下，还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
处方分析全123
选择性失忆19922017-09-30
硼酸和石蜡研磨能充分混匀吗
【求助】蛋白表达及菌体破碎问题 经验共享 分析测试百科123
huolizwh2009-02-15
我做大肠杆菌原核表达，选用pGEX系列载体，收集菌体超生破碎后离心取菌体上清，上清内有大量核酸，用GST亲和层析柱纯化蛋白，谷胱甘肽洗脱峰特别小。
问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？
2样品中的核酸对吸附有无太大影响？
3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？
4怎么提高样品的澄清度？
问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？
2样品中的核酸对吸附有无太大影响？
3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？
4怎么提高样品的澄清度？
一种高效安全提取动物肌肉组织DNA的方法技术,动物组织dna提取专...123
棉花糖之Z72017-09-30
会不会导致DNA片段破碎？
【求助】关于用超声波破碎细胞的问题 经验共享 分析测试百科 123
血刺潇潇w椦2017-09-30
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳；如果是分析蛋白质，则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。
以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA用0.5%的凝胶，200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶）置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化（不要加热至沸腾），取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后，在电泳槽内加入电泳缓冲液，然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品（DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的）与加样缓冲液按4：1混匀后，用微量移液器将混合液加到样品槽中，每槽加10-20μl，记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线，点样孔一端接负极，另一端接正极，打开电源，调电压至3-5V/cm，电泳1-3hr，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶，放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min，即可在254nm的紫外灯下观察，有橙红色荧光条带的位置，即为DNA条带，或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂，操作时要小心，必须戴手套。
扩展知识：
在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途，但也可以作为制备技术，在采用某些方法（如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹）检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA用0.5%的凝胶，200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶）置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化（不要加热至沸腾），取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后，在电泳槽内加入电泳缓冲液，然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品（DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的）与加样缓冲液按4：1混匀后，用微量移液器将混合液加到样品槽中，每槽加10-20μl，记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线，点样孔一端接负极，另一端接正极，打开电源，调电压至3-5V/cm，电泳1-3hr，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶，放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min，即可在254nm的紫外灯下观察，有橙红色荧光条带的位置，即为DNA条带，或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂，操作时要小心，必须戴手套。
扩展知识：
在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途，但也可以作为制备技术，在采用某些方法（如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹）检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
如何快速鉴定转化子DNA 实验方法 123
root2021-07-22
首先说明，因为最近有人向我要，我以前也发过，好像是试剂配方不全，所以在此补发一个，望版主不要删了！多谢！
快速细胞破碎法鉴定转化子DNA（分离效果一般，二者要相差比较大才行，我常用前者，一般T载体上的要五百bp以上，一千bp以上最好！）
快速细胞破碎法鉴定转化子DNA
1、转化子菌落接种于相应的抗性培养基2.0ml，过夜培养。（要求设立对照！）
2、制备0.8%琼脂糖胶。
3、取1.5ml过夜培养物离心，15kr/min，1min；弃上清。（剩余保种！）
4、加水重悬，离心如上。留沉淀。
5、每管加50—100µl破碎细胞缓冲液(见后配方)，充分涡旋，使菌体悬浮均匀
6、水浴37℃，15min。
7、离心15kr/min，15min。
8、立即取20-30µl上清点样进行电泳，4—6V/cm。
9、电泳，当溴酚蓝到达凝胶板的2/3时，停止电泳。
10、染胶15—30min。
配方：50mMTris-HCl(pH6.8)；1%SDS；2mMEDTA；400mM蔗糖；0.01%溴酚兰
配法：1MTris-HCl(pH6.8),10ml;20%SDS,10ml;250mMEDTA,1.6ml;蔗糖27.2g;1.2%溴酚兰1.67ml加水至200ml;
煮沸法快速分析转化子DNA
1、挑单菌落于2.0ml相应抗生素液体培养基中，37℃振荡过夜（约16小时）。
2、取1.5ml过夜培养物于离心管中，15kr/min，1min。（剩余保种！）
3、弃上清，倒扣、流尽。
4、加入350µl由下列试剂组成溶液，混匀。
(8%蔗糖、0.5%TritonX-100、50mMEDTA(pH8.0)、10mMTris-HCl(pH8.0))
5、加入25µl新鲜配制的10mg/ml的溶菌酶（溶于10mMTris-HClpH8.0中），涡旋3--5sec。
6、立即将离心管浸入沸水浴40sec。
7、离心15kr/min，10min。
8、转移上清至另一离心管，加入2.5MNaAc40µl，加入异丙醇420µl，混匀后冰浴15min，沉淀DNA。
9、离心15kr/min，15min，将上层异丙醇弃去，真空抽干。
10、加入50µlTE缓冲液重悬，（含Rnase50µg/ml）。37℃保温10min。
11、取10µl样品点样，电泳，染胶。观察质粒DNA的区带位置。（要求有对照电泳！）
快速细胞破碎法鉴定转化子DNA（分离效果一般，二者要相差比较大才行，我常用前者，一般T载体上的要五百bp以上，一千bp以上最好！）
快速细胞破碎法鉴定转化子DNA
1、转化子菌落接种于相应的抗性培养基2.0ml，过夜培养。（要求设立对照！）
2、制备0.8%琼脂糖胶。
3、取1.5ml过夜培养物离心，15kr/min，1min；弃上清。（剩余保种！）
4、加水重悬，离心如上。留沉淀。
5、每管加50—100µl破碎细胞缓冲液(见后配方)，充分涡旋，使菌体悬浮均匀
6、水浴37℃，15min。
7、离心15kr/min，15min。
8、立即取20-30µl上清点样进行电泳，4—6V/cm。
9、电泳，当溴酚蓝到达凝胶板的2/3时，停止电泳。
10、染胶15—30min。
配方：50mMTris-HCl(pH6.8)；1%SDS；2mMEDTA；400mM蔗糖；0.01%溴酚兰
配法：1MTris-HCl(pH6.8),10ml;20%SDS,10ml;250mMEDTA,1.6ml;蔗糖27.2g;1.2%溴酚兰1.67ml加水至200ml;
煮沸法快速分析转化子DNA
1、挑单菌落于2.0ml相应抗生素液体培养基中，37℃振荡过夜（约16小时）。
2、取1.5ml过夜培养物于离心管中，15kr/min，1min。（剩余保种！）
3、弃上清，倒扣、流尽。
4、加入350µl由下列试剂组成溶液，混匀。
(8%蔗糖、0.5%TritonX-100、50mMEDTA(pH8.0)、10mMTris-HCl(pH8.0))
5、加入25µl新鲜配制的10mg/ml的溶菌酶（溶于10mMTris-HClpH8.0中），涡旋3--5sec。
6、立即将离心管浸入沸水浴40sec。
7、离心15kr/min，10min。
8、转移上清至另一离心管，加入2.5MNaAc40µl，加入异丙醇420µl，混匀后冰浴15min，沉淀DNA。
9、离心15kr/min，15min，将上层异丙醇弃去，真空抽干。
10、加入50µlTE缓冲液重悬，（含Rnase50µg/ml）。37℃保温10min。
11、取10µl样品点样，电泳，染胶。观察质粒DNA的区带位置。（要求有对照电泳！）
【求助】超声处理细胞/细菌样品破碎DNA是否合理? 蛋白质和糖学...123
supermaltose2009-07-26
加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后，样品里面的DNA会和SDS形成一团东西，无法直接上样
平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟，然后上样的
但是一方面，常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏，因为发现加冰以后超声会变得非常弱，所以都么加冰。另一方面，因为水浴超声声强是不均匀的，如果样品多的话，会发现有些已经超碎DNA，但有些还是一团。
不知道是否有其他更好的方法？
平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟，然后上样的
但是一方面，常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏，因为发现加冰以后超声会变得非常弱，所以都么加冰。另一方面，因为水浴超声声强是不均匀的，如果样品多的话，会发现有些已经超碎DNA，但有些还是一团。
不知道是否有其他更好的方法？
【求助】5ml注射液生产上的装量问题 制剂技术123
syvictor2008-10-15
请教天然橡胶的使用工艺及注意事项乳胶技术橡胶技术网123
swlrsis82017-09-30
一种碎胶机破碎系统，包括底座、转刀、固定刀、筛孔刀，所述底座前后面设有平板，平板上设置有旋转轴，转刀固定在旋转轴上，所述底座的内端面左右两侧设有固定刀，固定刀的刃部面向旋转轴，所述筛孔刀安装在底座下部，筛孔刀位于旋转轴的正下方。通过设置转刀、固定刀和筛孔刀，三刀同时工作，胶块受到三重切割，可有效快捷的将大胶块破碎并且得到预定规格胶粒的颗粒更加均匀，降低了功耗，提高了工作效率，同时设置有液压缸控制筛孔刀的抽出和复位，打开门时便于对检修刀具及对内部进行清洁，不仅结构简单、操作维护也更加方便，且经济实用。
酵母细胞的破碎实验123
liuyujia2007-04-05
欲破碎酵母细胞，提取胞内活性物质。尝试了超声波处理、热水处理、石英砂研磨、SDS、DMSO、甲苯处理、反复冻溶等方法，镜检观察效果都很不理想。请问还有什么方法较有效，或者是否有更可靠的检测方法？谢谢！
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