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Abeomics/Mouse Monoclonal Antibody to SYP(Clone :BS15)/0.1 ml/10-12536
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Abeomics/Mouse Monoclonal Antibody to SYP(Clone :BS15)/0.1 ml/10-12536
品牌 / 
Abeomics
货号 / 
10-12536
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Format :concentrate
Amount :0.5 ml
Isotype :Mouse IgG1
Content :TRIS with 0.03% sodium azide, pH7.2
Storage condition :Store at 4°C
Gene :SYP
Gene ID :6855
Uniprot ID :P08247
Alternative Name :Synaptophysin, Major synaptic vesicle protein p38
Synaptophysin (p38) is an integral membrane protein of small synaptic vesicles in brain and endocrine cells.Synaptophysin contains four transmembrane domains that form a hexameric channel or gap junction-like pore. Synaptophysin binds to the SNARE protein synaptobrevin/VAMP, which prevents the inclusion of synaptobrevin in the synaptic vesicle fusion complex and creates a pool of synaptobrevin for exocytosis when synapse activity increases. Synaptophysin is also responsible for targeting synaptobrevin 2/VAMP2 to synaptic vesicles, a critical component of the fusion complex.

Immunohistochemical Analysis :-1:300

For Research Use Only. Not for use in diagnostic/therapeutics procedures.

Subcellular location:Cytoplasmic vesicle, Cell junction
Post transnational modification:Ubiquitinated; mediated by SIAH1 or SIAH2 and leading to its subsequent proteasomal degradation.
Tissue Specificity:Expressed in the brain, with expression in the hippocampus, the neuropil in the dentate gyrus, where expression is higher in the outer half of the molecular layer than in the inner half, and in the neuropil of CA4 and CA3.
BioGrid:112721.39 interactions.
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2021-09-07
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一种碎胶机破碎系统,包括底座、转刀、固定刀、筛孔刀,所述底座前后面设有平板,平板上设置有旋转轴,转刀固定在旋转轴上,所述底座的内端面左右两侧设有固定刀,固定刀的刃部面向旋转轴,所述筛孔刀安装在底座下部,筛孔刀位于旋转轴的正下方。通过设置转刀、固定刀和筛孔刀,三刀同时工作,胶块受到三重切割,可有效快捷的将大胶块破碎并且得到预定规格胶粒的颗粒更加均匀,降低了功耗,提高了工作效率,同时设置有液压缸控制筛孔刀的抽出和复位,打开门时便于对检修刀具及对内部进行清洁,不仅结构简单、操作维护也更加方便,且经济实用。
处方分析全123
选择性失忆19922017-09-30
硼酸和石蜡研磨能充分混匀吗
超声波细胞破碎123
ecor2004-10-19
我最近做超声波破碎大肠杆菌,但是一直效果都不好,看了一些帖子,但是还是没弄明白。请问:裂解缓冲液需要加多少(?ml/g菌)?超声波作用的时间一般是多少(有人说半小时,有人说10分钟以内)?破碎后菌液是什么状态的?会变澄清吗?如果一次做60ml菌液(置于100ml离心管中),需要注意什么呢?
样品一般都要做到最好,你看成品的具体要求,水分、细度、合格率等。
加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后,样品里面的DNA会和SDS形成一团东西,无法直接上样

平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟,然后上样的

但是一方面,常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏,因为发现加冰以后超声会变得非常弱,所以都么加冰。另一方面,因为水浴超声声强是不均匀的,如果样品多的话,会发现有些已经超碎DNA,但有些还是一团。

不知道是否有其他更好的方法?
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳;如果是分析蛋白质,则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:

1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。
用5毫升规模的菌表达蛋白,收菌用缓冲液重悬后有250微升的重悬液,通常是加LoADIngBuffer混匀后煮样破碎细胞,但现在我还需要对细胞中的蛋白进行进一步处理,但如此少的重悬液又无法用超声波破碎,而煮样后所有蛋白都变性了,又无法继续处理,谁能告诉我还有什么效果好的破碎这样的重悬液的方法?
我做大肠杆菌原核表达,选用pGEX系列载体,收集菌体超生破碎后离心取菌体上清,上清内有大量核酸,用GST亲和层析柱纯化蛋白,谷胱甘肽洗脱峰特别小。
问:1如才能提高柱子吸附蛋白量?
2样品中的核酸对吸附有无太大影响?
3我拟采用阴离子交换树脂,问pH8.0条件下除去核酸可否?
4怎么提高样品的澄清度?
在酵母表达表达时遇到问题:

1.少量表达时用玻璃珠振荡的方法破碎细胞,跑胶时蛋白量总是很低,有什么好的方法进行少量酵母细胞的破碎吗?
2.好像有一种试剂加到玻璃珠振荡破碎的酵母细胞样品中来镜鉴细胞是否破碎的,是什么试剂啊?

多谢指点!
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳;如果是分析蛋白质,则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。
以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:

1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。

扩展知识:

在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
我打算做蛋白提取,以前单纯用超声效果不好,为了尽量保留活性,选择用溶菌酶见超声破碎的方法。
我按照分子克隆上的步骤:
1.菌体称重为0.4g,加PBSbuffer3ml(PH=8.05),充分混匀。
2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升,至终浓度4mg/ml。冰置3小时。
3.超声400w,10s,10s,40次,结果目测还是乳白色,镜检很多菌体。

为什么破不开,搞不懂,我前几天做预实验的时候,还能变澄清???
注:预实验的步骤与现在的一样,只是菌体重量是0.1g加PBS3ml,再加溶菌酶至1mg/ml,超声400w,10s,10s,20次。

麻烦大家能给以帮助,先谢谢了...
想问一下,一般破碎细胞冻融时间要多久,几次。冻融时间与次数与细胞破碎程度有关吗?因为我们这一般都是十二小时一次,共三次。但因为我必须一天完成,所以我第一次三小时,化一小时,第二次二小时,化半小时,第三次冻只有一小时。我不知这样破碎是否完全。
另外还想问一下,还有其他可行的破碎方法吗
谢谢