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separopore
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Separopore® 6B

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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英文名称: SCILOGEX 赛洛捷克混匀仪MX-S/MX-M/MX-RD-Pro 总访问: 12229 国产/进口: 进口 半年访问: 612 产地/品牌: SCILOGEX/USA 产品类别: 混合器 ... 查看更多>
东南科仪在发布的VELP RX3漩涡混匀器供应信息,浏览与VELP RX3漩涡混匀器相关的产品或在搜索更多与VELP RX3漩涡混匀器相关的内容。 查看更多>
Eppendorf 产品广泛应用于学术科研和商业研究机构,如制药、生物技术以及化学分析和食品行业,以及临床和环境分析实验室、法医检测和进行需要过程分析、生产及质控的工业生产实验室。 查看更多>
SK-1型快速混匀器快速混匀器又称旋涡混合器,主要依靠装液容器与旋盘的平稳接触,使容器内的溶液快速混匀,混匀速度由人为施加的压力大小调节。是生物、遗传、医学、环保、水产、生化实验室、分析室、教育科研的必备工具。SK-1型快速混匀器SK-1 Swift Mixer型 号TypeNo.工作方式Working Style振荡幅度 (mm)Vibration Range (mm)振荡频率 (rpm)Vibration Frequence (rp... 查看更多>
2021-09-07
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无锡杰瑞安仪器设备有限公司在发布的JRA-III血液混匀器 七滚血液混匀器厂家促销供应信息,浏览与JRA-III血液混匀器 七滚血液混匀器厂家促销相关的产品或在搜索更多与JRA-III血液混匀器 七滚血液混匀器厂家促销相关的内容。 查看更多>
广州科适特科学仪器有限公司在发布的固定角度试管旋转混匀仪供应信息,浏览与固定角度试管旋转混匀仪相关的产品或在搜索更多与固定角度试管旋转混匀仪相关的内容。 查看更多>
山东巴罗克生物科技股份有限公司在发布的可调式漩涡混匀仪供应信息,浏览与可调式漩涡混匀仪相关的产品或在搜索更多与可调式漩涡混匀仪相关的内容。 查看更多>
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2021-08-28
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加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后,样品里面的DNA会和SDS形成一团东西,无法直接上样

平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟,然后上样的

但是一方面,常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏,因为发现加冰以后超声会变得非常弱,所以都么加冰。另一方面,因为水浴超声声强是不均匀的,如果样品多的话,会发现有些已经超碎DNA,但有些还是一团。

不知道是否有其他更好的方法?
用5毫升规模的菌表达蛋白,收菌用缓冲液重悬后有250微升的重悬液,通常是加LoADIngBuffer混匀后煮样破碎细胞,但现在我还需要对细胞中的蛋白进行进一步处理,但如此少的重悬液又无法用超声波破碎,而煮样后所有蛋白都变性了,又无法继续处理,谁能告诉我还有什么效果好的破碎这样的重悬液的方法?
会不会导致DNA片段破碎?
一种碎胶机破碎系统,包括底座、转刀、固定刀、筛孔刀,所述底座前后面设有平板,平板上设置有旋转轴,转刀固定在旋转轴上,所述底座的内端面左右两侧设有固定刀,固定刀的刃部面向旋转轴,所述筛孔刀安装在底座下部,筛孔刀位于旋转轴的正下方。通过设置转刀、固定刀和筛孔刀,三刀同时工作,胶块受到三重切割,可有效快捷的将大胶块破碎并且得到预定规格胶粒的颗粒更加均匀,降低了功耗,提高了工作效率,同时设置有液压缸控制筛孔刀的抽出和复位,打开门时便于对检修刀具及对内部进行清洁,不仅结构简单、操作维护也更加方便,且经济实用。
最近在用水稀释法加硫酸铵做卵黄抗体的初步纯化,在水稀释这步担心由于颗粒物质没有和水溶液充分混合,导致卵黄抗体回收率降低,于是将第一次水稀释后得到的上清进行离心后,又将沉淀用水重悬混合,用相同的方法再来考察是否有残留的卵黄抗体,从SDS-PAGE中可以发现,沉淀中是有残留的,而且量还不算少,于是我考虑在卵黄加入水稀释后,用超声波来混匀,使卵黄里面的颗粒物质更均匀更充分的释放在水溶液里,我的问题是应该采取怎么样的一个程序呢,即不影响我的蛋白活性也能更好的提高回收率?

大家请赐教!
货物学试题(2)123
找不回的岁月2017-09-30
烘干机
想问一下,一般破碎细胞冻融时间要多久,几次。冻融时间与次数与细胞破碎程度有关吗?因为我们这一般都是十二小时一次,共三次。但因为我必须一天完成,所以我第一次三小时,化一小时,第二次二小时,化半小时,第三次冻只有一小时。我不知这样破碎是否完全。
另外还想问一下,还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
酵母细胞的破碎实验123
liuyujia2007-04-05
欲破碎酵母细胞,提取胞内活性物质。尝试了超声波处理、热水处理、石英砂研磨、SDS、DMSO、甲苯处理、反复冻溶等方法,镜检观察效果都很不理想。请问还有什么方法较有效,或者是否有更可靠的检测方法?谢谢!
处方分析全123
选择性失忆19922017-09-30
硼酸和石蜡研磨能充分混匀吗
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳;如果是分析蛋白质,则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:

1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。
大家好,有谁知道真菌细胞壁的破碎方法,各种试剂的使用浓度,越详细越好,谢谢
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳;如果是分析蛋白质,则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。
以DNA凝胶电泳为例,电泳的操作步骤如下:

1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干,用胶带将两端的开口封好,放在水平的工作台上,插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,(按0.3-1.5%的琼脂糖含量,1-25kb大小的DNA用1%的凝胶,20-100kb的DNA用0.5%的凝胶,200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶)置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸腾),取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后,在电泳槽内加入电泳缓冲液,然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品(DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的)与加样缓冲液按4:1混匀后,用微量移液器将混合液加到样品槽中,每槽加10-20μl,记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接正极,打开电源,调电压至3-5V/cm,电泳1-3hr,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶,放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min,即可在254nm的紫外灯下观察,有橙红色荧光条带的位置,即为DNA条带,或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂,操作时要小心,必须戴手套。

扩展知识:

在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。