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免疫剂量根据被免疫的动物、免疫部位以及抗原的本身的特性相差很远。如果用兔制备多抗，首次免疫（皮下）一般在200-1000ug之间，对于大鼠，首次免疫（皮下）为100-500ug，对于小鼠， 首次免疫（皮下）一般在10-100ug之间，合成免疫原为2mg，半抗原为20～200ug，加强免疫一般为首次免疫剂量的20%-50%。尾静脉或脾内方式加强则可减至几微克至十微克。对于体型比较大的动物可酌量增加 。文献貌似很少有专门研究免疫剂量的，一般都是研究单抗什么的顺带提及。

动物血清的本来作用是作为抗体使用，但抗体也是蛋白结构，同时又是异源蛋白，进入人体，也同时成为一种抗原物质了

大家好！我要用10个氨基酸的多肽偶联到血蓝蛋白作为抗原，对BABL/c小鼠进行免疫制备单抗。请有经验的老师介绍下，每次每只小鼠应选择多大量的多肽，或者偶联后的量对小鼠进行免疫比较好。因为没有经验，所以请大家热心指教！多谢多谢

前提是假设纯蛋白和多肽已经制备完毕，下一步的免疫动物，提取抗体的过程有什么不同么？谢谢

本公司是英国国家兽医实验室（AHVLA）在中国的代理机构，需要这方面产品的朋友可以访问test.***aibao.net或访问AHVLA官方网站www.defra.gov.uk/ahvla

联系电话：010-84492262杨先生

在将抗原注射到动物体内前，为什么要将抗原与弗氏佐剂进行乳化？为什么不能直接注射蛋白抗原？

以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典方法。为了提高免疫效果，在免疫的时候，常辅以佐剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时间，使抗原缓慢释放，同时非特异性的促进局部吞噬细胞反应来增强动物的免疫效果。佐剂的类型较多，目前常用的还是福氏佐剂(Freund’sAdjuvant，FA)。它是一种对大多数抗原都有效的佐剂，但由于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用。因此，福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性时使用。FA是用矿物油(石蜡油)、乳化剂(羊毛脂)和灭活的分枝杆菌(结核分枝杆菌或卡介苗)组成的油包水乳化佐剂。这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全佐剂(Freund’sComD】eleAdjuvant，FCA)，不含分枝杆菌的佐剂为福氏不完全佐剂(Freund’sInconrpleteAdjuvant，FIA)。石蜡油因不能代谢而存留在注射的部位，这就阻碍了抗原降解或快速反应，起到抗原储存作用，使抗原缓慢持续的释放，不断刺激机体的免疫系统而产生免疫反应。乳化剂对于水溶性抗原与油稳定地乳化是必要的。分枝杆菌具有很强的免疫刺激作用，可以非特异性的激活免疫系统。FCA用于基础注射，而FIA用于辅助注射以避免分枝杆菌蛋白引起的过敏反应。FA皮下注射或肌内注射可导致多种副作用，例如肉芽肿和无菌性脓肿的形成。腹腔注射引起腹膜炎。由于这些严重的副作用，FA不允许用于人或动物的疫苗接种免疫。传统的免疫方案，包括使用福氏佐剂和某些免疫程序，已不再被一些国家的权威机构所接受。据调查，在荷兰有64％的研究人员使用FCA，而且，用于多克隆抗体的生产方案差异很大。因此，在1993年，荷兰发布了利用动物免疫技术制备多克隆抗体的生产指南。主要规定了加强免疫注射的次数、免疫途径、注射量和佐剂的使用，并且支持使用替代佐剂来替换FCA。由于FCA给实验动物带来的严重的副反应，对它的使用提出了特别的限制，规定了(小鼠和大鼠sc：0．1nd；i．d：家兔0．o5rI1l；i．P：小鼠0．2nd)推荐使用量和注射途径。

请教：针对同一抗原的同一抗原决定簇的不同动物抗体的独特位-抗原结合部位是否相同。
谢谢！

:(我目前做的实验是就是免疫动物,我已经合成了人工抗原,我不知道这样接到载体蛋白上使之变成完全抗原,然后免疫动物,要是我用得到的完全抗原免疫动物,我得到的是多抗原还是单抗原?想请高手帮我一把.本人万分感激.

一直到烧伤患者面部的自己的腿的皮肤算不算抗原？？（有的答案上说是，有的说不是可不可以给一点点解析？？O(∩_∩)O谢谢）

动物免疫血清是什么抗原

没有质量问题，破伤风抗毒素对人来说本身就是一种异种蛋白，对人体是一种过敏原，再加上医院做皮试时未按说明书上的要求做，故经常会出现皮试假阳性，但全量注射后又没事。在临床上会出现99%的假阳性。可以给一论文看看：破伤风抗毒素皮试假阳性原因与对策胡凤华(天津市第一中心医院，天津300192)关键词破伤风抗毒素；皮试；假阳性中图分类号R472文献标志码B文章编号1006．9143(2009)02-0122-02破伤风抗毒素(TAT)是用破伤风类毒素免疫马的血清经胃酶消化后，提纯制得的液体制剂，对人体是一种异体蛋白，具有抗原性，注射后容易发生过敏反应⋯。目前已有人血源的抗破伤风免疫球蛋白制剂，效果较好，且能避免发生过敏反应，但其来源较少，制备复杂，尚不能普遍应用，因而TAT仍为预防和治疗破伤风的主要生物制品。传统的皮试方法假阳性率较高，脱敏注射法繁琐耗时。因此，近年来护理同行对造成TAT皮试假阳性的各种可能性因素进行分析，并进行了大量临床实践和研究找出相应对策，现将其研究进展综述如下。1破伤风抗毒素(TAT)皮试假阳性的原因1．1保存不当l临床上确实存在将破伤风抗毒素以室温存放。TAT是马血清制品，是用类毒素免疫马匹后制备的，属于异体蛋白质室温放置易变质、变性。1．2rAT皮试液配制时稀释液选择不当临床上有些医院仍采用注射用水配制各种皮试液，由于注射用水为低渗液，皮下注射后可引起皮下组织细胞膨胀，引起局部疼痛，疼痛刺激皮肤使局部充血潮红，从而造成假阳性。1．3皮试液浓度传统皮试液的配制方法取0．1mLTAT原液(规格15OOU／mL)；0Z生理盐水稀释至1mL(内含~5ou)即为皮试液，即o．1mL含15U的TAT皮试液。TAT皮试液的浓度剂量与局部反应程度成正比关系，浓度高，局部反应程度增强，局部皮肤接受高浓度大分子的异性蛋白后，造成组织渗透压升高而引起的皮肤局部反应。1．4皮试液配制不准确临床上配制TAT皮试液时常使用的注射器是1mL一次性无菌塑料注射器，注射器死腔因素是皮试液浓度增高的主要原因】。注射器死腔包括3部分，乳头内部空间，乳头与针栓之间的空间，以及针梗空间。多年来经过对破伤风抗毒素原液的剂量进行反复观察，发现各个厂家生产的破伤风抗毒素针剂药量都不足1mL，多则0．8mL，少则0．5mL，按教科书要求方法进行皮试液的配制，造成TAT皮试液浓度过高，使TAT皮试假阳性率升高“。在注射器内吸取作者简介：胡风华(1969．)，女，主管护师，大专一定量的破伤风抗毒素后再吸取稀释液时，由于注射器的吸力，稀释液进入注射器中有一定的冲力，该冲力对管内的破伤风抗毒素起了强烈搅拌作用，因而导致泡沫的产生而影响药液剂量六。1．5消毒液使用不当临床上在做皮试前，多采用75％酒精消毒局部皮肤，观察结果时发现有的患者皮试处出现与酒精消毒面积大小相一致的局限性红晕，直径达5cm左右，恰是消毒的范围，因此无法判断是酒精过敏还是1IAT过敏。这样对皮试结果判定带来很大的难度，从而使TAT皮试假阳性率升高。1．6注射针头选择不当皮内注射时选用5号或6．5号针头，因针头粗对局部刺激性大，易出现皮丘发红等皮肤的应激反应，使TAT皮试假阳性率增高。1．7注射时进针方法不妥皮内注射时进针方向与前臂横纹肌垂直，使皮肤产生机械性损伤，加上药液逆流阻力大，易产生撕裂样疼痛，局部疼痛会引起假阳性反应。这就是因操作不当而增加了患者的痛苦，同时增加了对局部皮肤的刺激而造成TAT皮试假阳性率增加。1．8传统皮试观察时间过短通过临床观察发现TAT皮试后15min的反应最为强烈，因此，传统皮试观察20min也显得时间过短，假阳性率最高”j。1．9传统皮试结果判断标准过于简单全国中等卫生学校教材《基础护理学》第3版对破伤风抗毒素皮内试验结果判断标准阴性：局部无红肿。阳性：局部反应为皮丘红肿、硬结直径大于1．5cm，有时有伪足，主诉有痒感，或有其他过敏症状。庞跟娣，李澍等通过1260例临床操作及对照观察，结果发现按习用标准判断阴性反应者8例，不足1％，也就是说将有99％以上患者的皮试反应都超过了阴性的原有规定范围，阳性率很高。1．10d,JL特殊生理特点d,JL皮肤菲薄，富于血管故注入药液后极易扩散，红晕范围大，而皮丘相对较小。如操作时动作不够轻柔，皮肤绷的太紧，用手抓捏，衣袖摩擦等，均可使红晕范围扩大。再就是婴幼儿语言表达能力欠缺，对某些阳性表现如发痒、胸闷等不能确切表达，影响试敏人员判断结果，易rjanjinJoumalofNursing，April2009，Vo1．17，No．2·123·造成TAT皮试假阳性，从而使TAT皮试假阳性率升高。1．11其他原因皮试观察时间不够。由于护理人员的责任心不强，有些试敏人员观察反应在结果不足20min，提前观察，即见到注射对皮肤刺激产生红晕还没有消退，误认为是皮试阳性。有些试敏人员由于对TAT过敏反应有恐惧感，造成对判断标准掌握过严，而没有按皮试阳性判定标准来鉴别，而造成TAT皮试假阳性率提高。某些患者因恐惧、精神紧张或疾病的影响以及疼痛刺激而使感觉异常，诉说皮试处痒或痛，误判为TAT皮试假阳性。2对策2．1妥善管理TAT制剂I’AT制剂应保存在2—8。C暗处，温度过高或过低都会影响药效。注射前需仔细查看，发现制剂混浊、且摇不散的沉淀、异物或安瓶有裂纹、标签不清、过期失效者均不可使用。防止制剂变质，影响皮试的准确率。2．2选择正确的稀释液应选用生理盐水作为配制TAT皮试液时的溶媒。因它为等渗液，渗透压与组织液相等，对皮肤及组织刺激小，降低TAT皮试的假阳性率。2．3推广使用7．5IU为皮试标准浓度以往教科书上TAT皮试以含l5IU为标准，现在医学上推广以7．5IU为标准，含7．5IU为标准的皮试液更能准确地反映病人的阴阳性结果J。既可以避免因假阴性而出现的漏诊，又可以减少假阳性而缩短治疗时间。皮内注射TAT0．1mL含7．5U为最佳剂量，配制浓度75U／mL为最佳浓度，应用这种皮试液既可以减轻患者痛苦，又减轻了护士工作量，而且皮试液配制方法简单，便于护理人员掌握。2．4改进配制方法黄秀华等测定注射器死腔残余量为0．06·”】，在配制皮试液时应减去残余量。1mL一次性胰岛素专用注射器几乎无死腔，因此是理想的配制皮试液的注射器。配制皮试液时由于各厂家生产的破伤风抗毒素针剂都不足1mL，配制TAT皮试液时，先将每支为1500IU的不足1mL的制剂加适量生理盐水稀释足1mLc。破伤风抗毒素注射液是经硫酸胺盐析法所制成的生物制品，为表面活性物质的高分子化合物溶液。配制时先抽取生理盐水0．1mL，再抽取TAT0．1mL，这样会加速抗毒素的稀释溶解而不产生泡沫，再抽取生理盐水0．8mL，配制成150IU／mLc”J，再排出0．5mL~=／JU生理盐水0．5mL，即配制出的皮试液为75IU／mL，皮内注射0．1mLc。2．5选用适宜的皮肤消毒液用75％酒精棉签消毒注射部位皮肤(以注射点为中心，用螺旋式动作从中心向外旋转涂擦，直径5cm以上)，再用生理盐水棉签擦拭注射部位皮肤(方法同酒精消毒，但直径不超过酒精消毒范围5cm，擦拭1次)做TAT皮试较安全、可靠，且可降低TAT皮试阳性率。2．6选用适宜的皮内注射针头选用4号、4．5号的针头。由于针头小皮内注射时减轻了对局部皮肤的刺激，患者就无撕裂样疼痛或只有一点微痛，皮肤的应激反应减轻。2．7改进皮内注射时的进针方法皮试时在患者前臂掌侧横纹上3横指正中与腕横纹皮肤平行进针，因此处是尺神经皮支与桡神经皮支末梢分布最稀少的部位，与皮纹平行方向进针，皮纹向前推移，机械损伤小，且皮纹无断裂现象，药液是顺流阻力小，这样就减轻了皮试液对局部皮肤的刺激，从而降低TAT皮试的假阳性率。2．8规范皮试结果的最佳观察时间规定皮试结果最佳观察时间为30min【7】。对可疑为假阳性反应的患者，可根据具体情况，用生理盐水作对照及脱敏疗法，重点观察“局部”或“全身痒感”，“皮丘”以及“皮丘质地与形状”等，采用“延时观察法”和“众人证明观察法”，以提高判断准确性“。皮试过程红润出现较普遍，无特异性意义，只能作为TAT过敏反应的佐证。2．9规范皮试结果判断标准皮试结果判断阴性局部无红肿，硬结不超过1eln，无全身及其他部位反应。崔明淑将阳性分级用(+)(++++)表示，见表1(+、++为假阳性，+++为阳性，++++为强阳性)，采用此方法进行判断，假阳性率明显降低。表1TAT皮试阳性分级2．1O婴幼儿要用特殊方法对于婴幼儿患者要设法分散其注意力，使其最大限度的配合，操作时要固定好针头，防止针头滑出，同时进针用力要轻，防止进针过深，注入药物过多，从而减少TAT皮试假阳性反应。对于学龄前儿童应询问有无接种白百破三联疫苗，如已接种其中的破伤风抗毒素5岁内有预防破伤风杆菌感染的作用，此类患儿只需注射破伤风类毒素0．5mL即可。参考文献：[1]崔炎．护理学基础[M]．北京：人民卫生出版社，2003．320[2]马白芳，李彩玲．破伤风抗毒素皮试浓度的探讨[J]．ChineseJoumalofClinicalHealtheare，2004，17(5)：384[3]郑艳，涂索华，王玲，等．空针死腔对TAT皮试结果影响的临床观察[J]．护士进修杂志，2003，18(4)：379[4]李静，李秀珍，史小景．破伤风抗毒素皮试试验阳性率过高原因分析[J]．中国误诊学杂志，20O7，7(13)：2987[5】苏月巧，郑荣坤，赵连萍．破伤风皮试液不同配制方法的比较观察[J]．护理实践与研究，2006，3(8)：78[6]冯月霞，赵润萍，翟谢民．破伤风抗毒素皮试假阳性原因及对策[J]．中国误诊学杂志，2003，3(5)：777[7]郑昌炼．避免破伤风抗毒素皮试结果假阳性的探讨[J]．河北医学，213O5，11(10)：919[83庞跟娣，李澍，刘改云，等．破伤风抗毒素皮试阳性判断标准体会[J]．中国误诊学杂志，2008，8(2)：337[9]裴振兰，钱国菊，韩静枫，等．破伤风抗毒素皮试液最佳浓度及剂量探讨研究[J]．实用护理杂志，1996，12(3)：102[10]张亚琴．四种破伤风抗毒素皮试液的比较分析[J]．实用医技杂志，2006，13(4)：614[11]黄秀华，梁秀萍，黄艳萍，等．破伤风抗毒素皮试液含量与皮试结果关系的观察[盯．广西医学，2007，29(11)：1826[12]余佳，陈琼枝．破伤风抗毒素皮试液浓度与皮试结果的临床观察与体会[J]．当代护士，2008，2：82[133张胜姣，沈兰花．TAT皮试液配制方法的比较研究[J]．杭州师范学院学报，2005，4(6)：483[1nJ李淑华．破伤风抗毒素皮试皮肤消毒方法改进的效果[J]．实用临床医学，2006，7(8)：150[15]闫玉霞．破伤风抗毒素过敏试验进针方法的改进[J]．黑龙江护理杂志，1999，5(4)：83[16]高娟，马春华．避免破伤风抗毒素皮内试验假阳性的临床探讨[J]．锦州医学院学报，2006，27(3)：3[17]崔明淑，王艳春．破伤风抗毒素皮试结果判断和脱敏治疗[J]．中华临床医学研究杂志，2007，13(7)：882[18]冯玉娟，冯晓文．小儿应用破伤风抗毒素需注意的问题[J]．中华护理杂志，2001，36(3)：234(20o8—1O一06收稿，2009一O1—23修回)