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MD Biosciences/Collagen Type I and III, canine/10 mg/8052008
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MD Biosciences/Collagen Type I and III, canine/10 mg/8052008
品牌 / 
MD Biosciences
货号 / 
8052008
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Overview

Overview:

Type I collagen is the most abundant collagen and is found in connective tissues including tendon, ligament, dermis and blood vessel. It is the major component and the primary determinant of tensile strength of the extracelluar matrix (ECM). It is widely used as a thin layer on tissue-culture surfaces to enhance the attachment and proliferation of a variety of cells including endothelial cells, fibroblasts, hepatocytes, epithelial cells etc. In addition, collagen I can self-assemble into a 3-D superamolecular gel in vitro, making it an ideal biological scaffold to promote more in vivo-like cellular morphology and function.

Type III collagen is the second most abundant collagen in tissues and is found most commonly in tissues exhibiting elastic properties such as skin, lungs, intestinal walls and walls of blood vessels. It is a homotrimer comprised of three alpha-1 chains and resembles other fibrillar collagens in structure and function. It is synthesized as procollagen, similary to collagen I, but the N-terminal propeptide remains attached in the mature fibrillar type III form.

Symbols/Related Terms:

  • COL1A1
  • COL1A2
  • COL3A1
  • Collagen type III, alpha 1
  • osteogenesis imperfecta

Data/Specifications

Data/Specifications:

Purity:

Canine collagen type I and III - 98%

Canine Collagen (other types) - <1%

Non-collagen proteins - below 0.5%

Form: 10 mg lyophilized, salt-free

Purification: Partial pepsin digestion in acidic conditions and differential salt precipitation.

Source: Canine tissue. Collagen was extracted from washed dissected tissue into dilute acetic acid after pepsin treatment. Collagen type I and III were purified by using differential salt precipitation.

Reconstitution: Use 0.5 M acetic acid, pH 2.5. Dissolved collagen retains immunologic properties of native collagen. Structure of native collagen confirmed by ability to form microfibrils.

Storage:Collagen dissolved in acetic acid is stable at 4 °C for 1 month. Lyophilized collagen long term storage (2 years) at -20°C or lower.

Literature/Support

Literature/Support/Publications:

Canine Type I and III Collagen Insert (PDF)

Note: inserts are for review only. Please refer to the insert shipped with your product to ensure the most up-to-date revision is being used.

How To Use

How To Use:

Key Applicatons:

  • Coating material for cell culture studies.

Note: May not be suitable for 3-D gel formation.

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我要做载体构建的课题,想用pCDNA3.1TATOPO克隆试剂盒进行连接,不用限制酶切割即能把目的基因连入载体里,我对这个原理不太清楚,有用过的可以详细介绍一下吗?现在哪个公司做这种试剂盒?从哪里可以买得到?先谢谢大家了!
想做EV71的CDNA感染性克隆,在引物的5‘端引入启动子序列,然后利用用T7启动子进行体外转录,转染细胞,拯救活病毒,现在有几个问题不太明白,想请教一下各位:

1.如果在引物的5’引物引入了T7启动子,3‘引物也引入了polyT,PCR扩增出全长片段,回收纯化之后可以用来直接做体外转录么?为什么看到文献里都是先把这个PCR片段连接到载体里面,扩增之后提取出来线性化之后,再进行体外转录。是不是转录对模板的量有要求?

2.如果使用一些带有T7启动子序列的载体比如pBluescriptSK,在启动子序列和酶切位点之间还有多余的一段序列,这段序列也会被启动子转录,这一小段多余的序列是否会对接下来的转染以及病毒拯救带来影响?

3.有人在做反向遗传么,哪些载体可以用来进行体外转录?插入片段为7.5K。
基因转录1123
2021-07-21
我想知道什么是转录基因?
酵母双杂交系统析蛋白-蛋白间相互作用效快速 面应用 仍存些局限性⑴双杂交系统析蛋白间相互作用定位于细胞核内 许蛋白间相互作用依赖于翻译加工糖基化、二硫键形等 些反应核内进行另外些蛋白确折叠功能赖于其非酵母蛋白辅助 限制某些细胞外蛋白细胞膜受体蛋白等研究⑵酵母双杂交系统重要问题假阳性由于某些蛋白本身具激转录功能或酵母表达发挥转录激作用 使DNA结合结构域杂交蛋白特异激结构域情况激转录另外某些蛋白表面含种蛋白质低亲力区域 能与其蛋白形稳定复合物 引起报告基表达 产假阳性结
结提示:病毒复制跃(属于108)体内病毒量102000000于检测限100传染性强
建议:做肝功能检查再结合肝功能情况遵医嘱进行抗病毒治疗
计划以RNA为模板,设计引物进行全长CDNA片段的扩增,cDNA全长有7kb,不知道谁有没有做过类似的?我们老板说有人构建成功过,但不知道采用什么技术手段?我们之前是先以RNA为模板反转录合成第一条cDNA片段,再设计引物扩增2条片段,最后将2条片段连起来,但是构建的克隆也不成功。所以求助能否直接PCR得到全长cDNA片段,各位高人看看能否指点一二,谢谢啦!
请问,有人做DNA拓扑异构酶Ⅰ的吗?不知哪个实验室可以提供一些,谢谢。
1) 克隆减少遗传变异,通克隆产体具同遗传基,同疾病敏性,种疾病毁灭整由克隆产群体. 设想,家牛群都同克隆产物,种并严重病毒能毁灭全畜牧业.
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体,按自规律促进整种群优胜劣汰.意义说,克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术,需要量金钱物专业士参与,失败率非高.莉277实验唯.虽现发展更先进技术,功率能达2-3%.
4) 转基物提高疾病传染风险.例,产药物牛奶牛染病毒,种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制.克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作.伦理家所能接受.
6) 克隆技术用创造超,或拥健壮体格却智力低.且,克隆技术能够类效运用,男性失遗传意义.
7) 克隆技术家庭关系带影响巨.由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟,延迟几十已.难设想,发现自另外完全复制品,(或)受
末端扩增技术包括5端扩增3端扩增般需要用含已知序列接通巢式PCR目产物克隆测序目基片段组装全通5端难度较3端
酵母双杂交系统应用遇问题假阳性较二转化效率偏低所谓假阳性:待研究两蛋白间没发相互作用情况报告基激主要原由于BD融合诱饵蛋白单独激作用或者种融合蛋白激作用外蛋白激另外AD融合靶蛋白DNA特异性结合则单独激报告基表达排除假阳性需要作严格照试验应诱饵靶蛋白别作单独激报告基鉴定目前几公司推酵母双杂系统都采用报告基且每报告基游调控区各相同减少量假阳性另外报告基通整合染色体使基表达水平稳定消除由于质粒拷贝数变化引起基表达水平波造假阳性即使根据严格照实验证明确实发蛋白间相互作用应面进行析:
(1)种相互作用否细胞内自发即蛋白细胞命否同间表达且定位同区域
(2)某些蛋白依赖于遍蛋白蛋白酶解途径员具普遍蛋白间相互作用能力
(3)些实际没任何相互作用相同模体(motif)两亲a-螺旋蛋白质间发相互作用十酵母双杂交技术直消除假阳性面断改进并且已取较效〔23〕
酵母双杂交应用遇假阴性现象所谓假阴性即两蛋白本应发相互作用报告基表达或表达程度甚低至于检测〔4〕造假阴性原主要两 面:融合蛋白表达细胞毒性应该选择敏性低菌株或拷贝数低载体二蛋白间相互作用较弱应选择高敏菌株及拷贝载体目前假阴性现象虽实验主要问题应予重视
本实乃菜鸟若问题问清楚请指点
最近有一些战友对荧光原位杂交技术比较感兴趣,我整理了相关资料和自己的心得,和大家交流一下。不妥之处,请大家指出,共同讨论学习。

内容发布在蚂蚁淘和螺旋网上,有兴趣的战友也可以去那里看一下。

内容分三部分:

一、概述

1、克隆性染色体异常是肿瘤的特征

2、染色体异常常见的类型

3、染色体异常的检测方法

二、荧光原位杂交及其探针

1、荧光原位杂交的原理

2、荧光原位杂交的探针

三、荧光原位杂交探针的制备和荧光原位杂交(按试验流程介绍)

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FISH.pdf(1237.91k)