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abfrontier/TaKaRa LA PCR Kit Ver. 2.1/TaKaRa LA PCR Kit Ver. 2.1, 50회/RR013B
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제품특징
□ 제품설명
TaKaRa LA PCR Kit Ver.2.1은 LA PCR technology의 효과를 최대한 활용하여 그 위력을 발휘하도록 개발한 새로운 LA PCR Kit이다. LA PCR용으로 최적화한 전용 buffer (LA PCR Buffer II)와 TaKaRa LA Taq 의 조합으로, human genomic DNA를 template으로 긴 단편의 DNA를 증폭하는 등 보다 긴 단편의 PCR을 가능하게 하는 PCR Kit이다. 물론 다양한 template DNA에 응용할 수 있으며 짧은 단편의 DNA 증폭에도 사용할 수 있다. Mg2+ free의 buffer를 첨부하므로써 반응액 조성을 검토할 수 있다.
□ 내용 (50 ㎕ PCR 50 회)
| TaKaRa LA Taq (5 U/㎕) | 125 U |
| dNTP Mixture (각 2.5 mM) | 400 ㎕ |
| 10 × LA PCR Buffer II (Mg2+, plus) (Mg2+ 농도 25 mM) | 250 ㎕ |
| 10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ free) | 250 ㎕ |
| MgCl2 (25 mM) | 500 ㎕ |
| Control Template (100 ng/㎕ HT29 유래 genome DNA) | 10 ㎕ |
| Control Primer LA3 (10 μM) | 10 ㎕ |
| Control Primer LA4 (10 μM) | 10 ㎕ |
| λ-Hind III digested MW Marker (100 ng/㎕) | 20 ㎕ |
| 2×GC Buffer I (Mg2+ plus)* (Mg2+ 농도 5 mM) | 1.25 ㎖ |
| 2×GC Buffer II (Mg2+ plus)* (Mg2+ 농도 5 mM) | 1.25 ㎖ |
| Control Primer GC1 (10 μM) | 10 ㎕ |
| Control Primer GC2 (10 μM) | 10 ㎕ |
* 증폭영역이 GC-rich 또는 견고한 2차 구조를 취하는 것으로 판단되는 경우, 우선 2×GC Buffer I을 사용한다. Buffer I으로 증폭이 어려운 경우에는 2×GC Buffer II를 사용하는 경우 반응이 개선되는 경우가 있다.
□ 보존 -20℃
□ Control Primer 서열
| Control Primer LA3 :5’-ACATGATTAGCAAAAGGGCCTAGCTTGGACTCAGA-3’Control Primer LA4 :5’-TGCACCTGCTCTGTGATTATGACTATCCCACAGTC-3’* Control Template의 17.5 kb를 증폭한다.Control Primer GC1 :5’-GGGAGGGGACCGGGGAACAGAG-3’Control Primer GC2 :5’-GAACAGTCCGTCACTTCACGTG-3’* Control Template의 GC-rich 영역 1,255 bp를 증폭한다. |
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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2021-08-02
多聚酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)是一种模拟天然DNA复制过程，在体外扩增特异性DNA（或RNA）片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性 成单链作模板，然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物，引物分别与待扩增DNA片段的两端互补，经55℃ 低温退火，引物与模板互补结合。在72℃条件下，结合于模板上的引物在DNA聚合酶的催化下，利用反应体系中的4种dNTP为原料，按碱基互补配对的方式 延伸合成两条新的DNA链。所扩增的DNA可作为下一轮扩增反应的模板。重复 查看更多
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酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。大量的研究文献表明，酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作，也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的互作。因此，它在许多的研究领域中有着广泛的应用。 查看更多
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2021-09-12
1. Introduction and BackgroundThere is a great need for general methods to characterize the proteins that contemporary biology makes available. The list of suc 查看更多
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2021-07-21
年初，27 岁女学霸陆盈盈成为浙大博导一度成为热点，让大众开始关注 80 后博导。不理不知道，一理吓一跳。 80 后的博士生导师都开始登上科研舞台，成为中坚力量。让我们阅完兵，一起来看看那些 80 后博导。陆盈盈个人简介陆盈盈博士，女，特聘研究员。2010 年 6 月毕业于浙江大学化学工程与生物工程学院，获得学士学位，2014 年 6 月获得美国康奈尔大学（Cornell University） 查看更多
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2018-03-20
广州好芝生物科技有限公司在发布的人类T315I基因突变检测试剂盒供应信息，浏览与人类T315I基因突变检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与人类T315I基因突变检测试剂盒相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
纯合克隆筛选1．融化杂合突变ES细胞，ES/LIF培养液培养，每2～3天传代，实验开始把细胞接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中，每皿接种1～2×106细胞。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系，因不同细胞系的转化效率不全相同，另外对检测细胞表型也需如此。2．每皿细胞分别加入1.0～2.0mg/ml的G4178（终浓 查看更多
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2021-09-04
上海杏园瑞民生物工程有限公司在发布的Apoptosis PCR Array凋亡基因表达PCR芯片 384孔板供应信息，浏览与Apoptosis PCR Array凋亡基因表达PCR芯片 384孔板相关的产品或在搜索更多与Apoptosis PCR Array凋亡基因表达PCR芯片 384孔板相关的内容。 查看更多
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近岸蛋白质科技有限公司在发布的NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒试用装供应信息，浏览与NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒试用装相关的产品或在搜索更多与NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒试用装相关的内容。 查看更多
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对于高通量的筛选，推荐使用几个热循环仪厂家提供的 96 孔或 384 孔 PCR 板，或者使用单个的管子。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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上海杏园瑞民生物工程有限公司在发布的Inflammasomes PCR Array 炎性小体基因表达PCR芯片供应信息，浏览与Inflammasomes PCR Array 炎性小体基因表达PCR芯片相关的产品或在搜索更多与Inflammasomes PCR Array 炎性小体基因表达PCR芯片相关的内容。 查看更多
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2019-03-20
我要做酵母双杂交，有战友在做吗，交流一下，我的QQ446357706，现在我先把我的资料给大家看看吧，我自己写的程序酵母培养：YPD: 蛋白胨20g ,酵母提取物10g ,琼脂20g葡萄糖20g或灭菌后加入葡萄糖（40% 50ml；过滤除菌/121℃,15min）,使终浓度为2%.YPDA: YPD+adenin hemisulfate(0.2% 15ml;对热不稳定，不能高温高压灭菌)，使终浓度为0.003%.SD /:（SD /完全，SD /-./././.）无氨基酸酵母 ... 查看更多
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2021-08-22
Histologic analysis of murine BM is a necessary complement to flow cytometric or in vitro analysis. Techniques to do this are well established in human hematop 查看更多
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常见问题
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【求助】有人用过pcDNA3.1 TA TOPO克隆试剂盒吗? 核酸基因...123
xiaotian09032021-09-12
(2015专业论文)肠道病毒71型（ev71）感染性克隆的构建123
yukingboy2021-08-30
想做EV71的CDNA感染性克隆，在引物的5‘端引入启动子序列，然后利用用T7启动子进行体外转录，转染细胞，拯救活病毒，现在有几个问题不太明白，想请教一下各位：
1.如果在引物的5’引物引入了T7启动子，3‘引物也引入了polyT,PCR扩增出全长片段，回收纯化之后可以用来直接做体外转录么？为什么看到文献里都是先把这个PCR片段连接到载体里面，扩增之后提取出来线性化之后，再进行体外转录。是不是转录对模板的量有要求？
2.如果使用一些带有T7启动子序列的载体比如pBluescriptSK，在启动子序列和酶切位点之间还有多余的一段序列，这段序列也会被启动子转录，这一小段多余的序列是否会对接下来的转染以及病毒拯救带来影响？
3.有人在做反向遗传么，哪些载体可以用来进行体外转录？插入片段为7.5K。
1.如果在引物的5’引物引入了T7启动子，3‘引物也引入了polyT,PCR扩增出全长片段，回收纯化之后可以用来直接做体外转录么？为什么看到文献里都是先把这个PCR片段连接到载体里面，扩增之后提取出来线性化之后，再进行体外转录。是不是转录对模板的量有要求？
2.如果使用一些带有T7启动子序列的载体比如pBluescriptSK，在启动子序列和酶切位点之间还有多余的一段序列，这段序列也会被启动子转录，这一小段多余的序列是否会对接下来的转染以及病毒拯救带来影响？
3.有人在做反向遗传么，哪些载体可以用来进行体外转录？插入片段为7.5K。
基因转录1123
2021-07-21
我想知道什么是转录基因？
酵母单杂交跟双杂交的区别在哪里?最简单最通俗易懂的说话是什么?123
梓纤矫882017-10-02
酵母双杂交系统析蛋白-蛋白间相互作用效快速 面应用 仍存些局限性⑴双杂交系统析蛋白间相互作用定位于细胞核内 许蛋白间相互作用依赖于翻译加工糖基化、二硫键形等 些反应核内进行另外些蛋白确折叠功能赖于其非酵母蛋白辅助 限制某些细胞外蛋白细胞膜受体蛋白等研究⑵酵母双杂交系统重要问题假阳性由于某些蛋白本身具激转录功能或酵母表达发挥转录激作用 使DNA结合结构域杂交蛋白特异激结构域情况激转录另外某些蛋白表面含种蛋白质低亲力区域 能与其蛋白形稳定复合物 引起报告基表达 产假阳性结
乙型肝炎病毒dna荧光定量结果:乘以10的8次方检 123
yiguojun1232017-12-02
结提示：病毒复制跃（属于108）体内病毒量102000000于检测限100传染性强
建议：做肝功能检查再结合肝功能情况遵医嘱进行抗病毒治疗
建议：做肝功能检查再结合肝功能情况遵医嘱进行抗病毒治疗
【求助】如何P全长cDNA123
jingjae2021-07-28
【求助】有人做DNA拓扑异构酶Ⅰ的吗 PCR技术讨论版论坛123
zhangbo71172021-08-13
请问，有人做DNA拓扑异构酶Ⅰ的吗？不知哪个实验室可以提供一些，谢谢。
克隆对现代社会的影响及意义123
啊陌02182021-08-19
1) 克隆减少遗传变异,通克隆产体具同遗传基,同疾病敏性,种疾病毁灭整由克隆产群体. 设想,家牛群都同克隆产物,种并严重病毒能毁灭全畜牧业.
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体,按自规律促进整种群优胜劣汰.意义说,克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术,需要量金钱物专业士参与,失败率非高.莉277实验唯.虽现发展更先进技术,功率能达2-3%.
4) 转基物提高疾病传染风险.例,产药物牛奶牛染病毒,种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制.克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作.伦理家所能接受.
6) 克隆技术用创造超,或拥健壮体格却智力低.且,克隆技术能够类效运用,男性失遗传意义.
7) 克隆技术家庭关系带影响巨.由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟,延迟几十已.难设想,发现自另外完全复制品,（或）受
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体,按自规律促进整种群优胜劣汰.意义说,克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术,需要量金钱物专业士参与,失败率非高.莉277实验唯.虽现发展更先进技术,功率能达2-3%.
4) 转基物提高疾病传染风险.例,产药物牛奶牛染病毒,种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制.克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作.伦理家所能接受.
6) 克隆技术用创造超,或拥健壮体格却智力低.且,克隆技术能够类效运用,男性失遗传意义.
7) 克隆技术家庭关系带影响巨.由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟,延迟几十已.难设想,发现自另外完全复制品,（或）受
什么是RACE技术?采用RACE技术如何克隆得到基因的cDNA全长...123
浪人TA421002021-09-02
末端扩增技术包括5端扩增3端扩增般需要用含已知序列接通巢式PCR目产物克隆测序目基片段组装全通5端难度较3端
真核生物膜蛋白的互作蛋白用酵母双杂交合适吗？_答魔科研123
东城大爷N72021-08-19
酵母双杂交系统应用遇问题假阳性较二转化效率偏低所谓假阳性：待研究两蛋白间没发相互作用情况报告基激主要原由于BD融合诱饵蛋白单独激作用或者种融合蛋白激作用外蛋白激另外AD融合靶蛋白DNA特异性结合则单独激报告基表达排除假阳性需要作严格照试验应诱饵靶蛋白别作单独激报告基鉴定目前几公司推酵母双杂系统都采用报告基且每报告基游调控区各相同减少量假阳性另外报告基通整合染色体使基表达水平稳定消除由于质粒拷贝数变化引起基表达水平波造假阳性即使根据严格照实验证明确实发蛋白间相互作用应面进行析：
（1）种相互作用否细胞内自发即蛋白细胞命否同间表达且定位同区域
（2）某些蛋白依赖于遍蛋白蛋白酶解途径员具普遍蛋白间相互作用能力
（3）些实际没任何相互作用相同模体（motif）两亲a-螺旋蛋白质间发相互作用十酵母双杂交技术直消除假阳性面断改进并且已取较效〔23〕
酵母双杂交应用遇假阴性现象所谓假阴性即两蛋白本应发相互作用报告基表达或表达程度甚低至于检测〔4〕造假阴性原主要两 面：融合蛋白表达细胞毒性应该选择敏性低菌株或拷贝数低载体二蛋白间相互作用较弱应选择高敏菌株及拷贝载体目前假阴性现象虽实验主要问题应予重视
（1）种相互作用否细胞内自发即蛋白细胞命否同间表达且定位同区域
（2）某些蛋白依赖于遍蛋白蛋白酶解途径员具普遍蛋白间相互作用能力
（3）些实际没任何相互作用相同模体（motif）两亲a-螺旋蛋白质间发相互作用十酵母双杂交技术直消除假阳性面断改进并且已取较效〔23〕
酵母双杂交应用遇假阴性现象所谓假阴性即两蛋白本应发相互作用报告基表达或表达程度甚低至于检测〔4〕造假阴性原主要两 面：融合蛋白表达细胞毒性应该选择敏性低菌株或拷贝数低载体二蛋白间相互作用较弱应选择高敏菌株及拷贝载体目前假阴性现象虽实验主要问题应予重视
知道一个基因的cDNA序列如何获得这个基因的基因组序列呢 分子...123
人生漫漫路遥长2021-08-03
本实乃菜鸟若问题问清楚请指点
【原创】荧光原位杂交(FISH)探针的制备及其应用 核酸基因技术 丁香 ...123
issacfish2021-08-22
最近有一些战友对荧光原位杂交技术比较感兴趣，我整理了相关资料和自己的心得，和大家交流一下。不妥之处，请大家指出，共同讨论学习。
内容发布在蚂蚁淘和螺旋网上，有兴趣的战友也可以去那里看一下。
内容分三部分：
一、概述
1、克隆性染色体异常是肿瘤的特征
2、染色体异常常见的类型
3、染色体异常的检测方法
二、荧光原位杂交及其探针
1、荧光原位杂交的原理
2、荧光原位杂交的探针
三、荧光原位杂交探针的制备和荧光原位杂交（按试验流程介绍）
:D
FISH.pdf(1237.91k)
内容发布在蚂蚁淘和螺旋网上，有兴趣的战友也可以去那里看一下。
内容分三部分：
一、概述
1、克隆性染色体异常是肿瘤的特征
2、染色体异常常见的类型
3、染色体异常的检测方法
二、荧光原位杂交及其探针
1、荧光原位杂交的原理
2、荧光原位杂交的探针
三、荧光原位杂交探针的制备和荧光原位杂交（按试验流程介绍）
:D
FISH.pdf(1237.91k)
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