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abfrontier/CycleavePCR Mycoplasma Detection Kit/CycleavePCR Mycoplasma Detection Kit, 50회/CY232
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제품특징
□ 제품설명
본 제품은 Mycoplasma 16S rRNA 유전자를 타겟으로 Real Time PCR 장치를 이용해대부분의 Mycoplasma를 특이적으로 검출하기 위한 kit이다. 적어도 Mycoplasma 속 중의 10종(M. arginini, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. salivarium, M. fermentas, M. bovis, M. arthritidis, M. pirum, M. pneumoniae) 및 Acholeplasma속 중의 1종(A. laidlawii)에 대해 매우 민감하게 검출할 수 있음을 확인하였다. 본 kit의 증폭 반응에는 Hot Start PCR용 효소인 TaKaRa Ex Taq HS를 사용하고 있어 반응액 조제 혹은 반응(본격적인 cycle 반응)전에 miss-priming이나 primer dimer에서 유래하는 비특이적 증폭을 막을 수 있다. 증폭 산물의 검출에는 cycling probe법을 사용하고 있다. 이 방법은 RNA와 DNA로 구성된 키메라probe(chimera probe)와 RNase H와의 조합에 의한 고감도 검출 방법으로, 매우 특이성이 높은 검출이 가능하다. Probe는 한쪽 말단은 형광 물질로, 다른 말단은 그 형광 물질이 발하는 형광을 소광하는 물질(quencher)로 표지되어 있다. 이 cycling probe는 intact한 상태에서는 quenching에 의해 형광을 발할 수 없지만, 상보적인 증폭 산물과 하이브리드를 형성한 후에 RNase H에 의해 RNA 부분에서 절단되면, 강한 형광을 발하게 된다. 이러한 방법으로 형광 강도를 측정하여 증폭 산물량을 모니터 할 수 있다. 본 kit의 probe는 Mycoplasma에 특징적인 염기에 상보적으로 결합 하는 염기 부분을 RNA로 하고 있기 때문에, Mycoplasma만을 특이적으로 고감도에 검출하는 것이 가능하다.
□ 내용
1. 2×CycleavePCR Reaction Mix | 625 μl |
2. Myco. Primer/Probe Mix(5×conc.) | 250 μl *1 |
3. RNase Free dH2O | 1 ml |
4. Myco. Positive Control(1×106 copies/μl) | 20 μl *2 |
5. Proteinase k | 50 μl |
*1 형광 표지 probe를 포함하고 있으므로 차광에 유의한다. *2 Real time PCR component (1~3)에 잘못해 혼입하면 올바른 검출 반응을 실시할 수 없게 된다. 별도의 보관케이스를 마련하여 따로 보존한다.
□ 보존
- 20℃
□ kit 이외에 필요한 기기, 시약
* Real Time PCR용 증폭 장치 및 전용 튜브 Thermal Cycler Dice Real Time System II(TP900/TP960) Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(TP700/TP760)해석에는 Thermal Cycler Dice Real Time System Software Ver.4.0을 사용.Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies) * 200 μl, 20 μl, 10 μl 각 micropipette, tips* 탁상원심기 등
□ Positive Control에 대해
Mycoplasma Positive Control을 주형으로 Mycoplasma Primer로 증폭된 PCR 산물은, FAM 표지 probe 검출 영역과 ROX 표지 probe 검출 영역의 양쪽 모두를 포함하고,FAM 표지 probe와 ROX 표지 probe 모두에서 검출된다. 샘플 중에 저해 물질이 포함되어 있는지 어떤지를 확인하기 위해서는 사용하는 샘플에 Mycoplasma Positive Control를첨가하고 Control 실험을 실시해 ROX 필터로 검출의 유무를 확인한다.蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
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差异显示法[原理]：该实验方法是针对从特定细胞或组织类型的mRNA池来源的样品用PCR技术对其中许多的cDNA基因一起进行扩增和显示的实验方法。该实验方法倚赖两套不同类型的合成寡核苷酸引物：一套锚定反义引物与一套随机正义引物。锚定反义引物是与mRNA的poly(A)尾及3’-非翻译区的连接处相复性结合 查看更多
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2021-07-22
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2021-08-12
色谱法分类 色谱法有多种类型，也有多种分类方法。 （一）按两相所处的状态分类 液体作为流动相，称为“液相色谱”（liquid chromatograp-hy）；用气体作为流动相，称为“气相色谱”（gas chromatogr-aphy）。固定相也有两种状态，以固体吸附剂作为固定相和以附载在固体上的液体作为固定 查看更多
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2018-12-26
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2018-12-26
一 原理：IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A"特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。 查看更多
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2021-07-29
(this protocol was adapted by Joe DeRisi from one developed at Rosetta Inpharmatics) Resuspend the contents of one pack of the monofunctional NHS-ester Cy3 or 查看更多
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2021-09-09
Lysosome Isolation in Isotonic SucroseLEVEL I MATERIALS Rat liverPhysiological saline (0.85% w/v NaCl)0.25 M sucrose in 10 mM Tris-HCL, pH 7.4Brendler teflon h 查看更多
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2021-07-14
DNA文库严格来讲应称作cDNA文库，中文名称是基因文库，是指某生物基因组中所有可表达的基因片段，经mRNA反转录后获得相应的cDNA的集合，将这些cDNA的集合经转入和克隆后贮存于受体细胞群落中，这个受体细胞群落即构成该生物的cDNA文库。... 查看更多
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2018-12-26
Growth hormone plays a major role in regulating growth during childhood and adolescence and also regulates metabolism. Defects in growth hormone signaling can 查看更多
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DescriptionAllows one to test the capability of adherent cells to survive and replicate following insult with chemicals or radiation. Procedure1. Grow the cell 查看更多
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2021-08-02
1. 做实验要按规程，减压一定要用园底瓶，不可用锥形瓶，容易内吸爆炸，如果仅仅是回收溶剂，尚无大碍，如果是旋去溶剂得样品，萃取 查看更多
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2018-12-26
Purpose: To break up high molecular weight human placental DNA into fragment sizes of 500 bp or less which can be used as competitor DNA in Southern and in sit 查看更多
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常见问题
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教你使用NCBI查找DNAmRNAcDNA123
monking2021-08-10
我们建立了一个CDNA文库，有8000多条有效的EST序列，希望用条已知序列对这个文库进行blast比对，以找出所有的相似序列。请问有什么现成的工具可以实现这个功能呢？
多谢了！
文库数据可以用excel表格打开，具体格式如下：
>zsbca0_007230.z1.scf
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
>zsbca0_001638.z1.scf
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
>zsbca0_010217.z1.scf
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX
………………
多谢了！
文库数据可以用excel表格打开，具体格式如下：
>zsbca0_007230.z1.scf
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【求助】质粒cDNA文库容量问题_问答详情_蚂蚁淘,【正品极速】生...123
hjc562021-08-21
全长cDNA文库构建的须知及难点 cDNA文库构建 实验心得123
taizifeihong2021-08-14
如何根据真核蛋白的氨基酸序列获得其cDNA_问答详情_文库_其他分...123
ni林BA872021-08-15
真核物基组DNA十庞,其复杂程度蛋白质mRNA100倍左右,且含量重复序列采用电泳离杂交都难直接离目基其含内含等用序列染色体DNA发材料直接克隆目基主要困难.
高等物般具105种左右同基,定间阶段单细胞或体,都尽15%左右基表达,产约15000种同mRNAcDNA文库通RNA反转录由mRNA发cDNA克隆,其复杂程度要比直接基组克隆简单.
高等物般具105种左右同基,定间阶段单细胞或体,都尽15%左右基表达,产约15000种同mRNAcDNA文库通RNA反转录由mRNA发cDNA克隆,其复杂程度要比直接基组克隆简单.
建立cDNA文库最重要的酶是（ ）。_123
我是涂涂00572017-12-02
反转录酶：以mRNA为模板反转录合成DNA。
限制性内切酶：酶切目的基因和载体，使其产生相同的粘性末端。
DNA连接酶：连接目的基因和载体。
限制性内切酶：酶切目的基因和载体，使其产生相同的粘性末端。
DNA连接酶：连接目的基因和载体。
申请三队的子模块 公告发布及建议指南区 骑马与砍杀中文站论坛123
raimi2021-07-30
cDNA文库是什么?123
小言微笑8612017-12-07
百度文库中的经验好像没有什么用处。但是百度文库中的财富值和你下载东西有关系！如果没有财富不能够下载你需要的文档
基因组文库和cDNA文库的构建及筛选123
Cy_诅咒你哦2017-12-07
基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体；cDNA文库是指含有所有重组cDNA的克隆群体。
cDNA文库的用途 123
sjg百合2021-08-07
cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板，逆转录形成的互补DNA(cDNA)与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。
cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。
真核生物基因组DNA十分庞大,其复杂程度是蛋白质和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重复序列. 采用电泳分离和杂交的方法,都难以直接分离到目的基因.这是从染色体DNA为出发材料直接克隆目的基因的一个主要困难。
高等生物一般具有10^5种左右不同的基因,但在一定时间阶段的单个细胞或个体中,都仅有15%左右的基因得以表达,产生约15000种不同的mRNA分子.可见,由mRNA出发的cDNA克隆,其复杂程度要比直接从基因组克隆简单得多。
cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势，从而使它在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值，是研究工作中最常使用到的基因文库。
cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。
真核生物基因组DNA十分庞大,其复杂程度是蛋白质和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重复序列. 采用电泳分离和杂交的方法,都难以直接分离到目的基因.这是从染色体DNA为出发材料直接克隆目的基因的一个主要困难。
高等生物一般具有10^5种左右不同的基因,但在一定时间阶段的单个细胞或个体中,都仅有15%左右的基因得以表达,产生约15000种不同的mRNA分子.可见,由mRNA出发的cDNA克隆,其复杂程度要比直接从基因组克隆简单得多。
cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势，从而使它在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值，是研究工作中最常使用到的基因文库。
关于酵母单杂交自激活的问题 分子生物 EMSA/ChIP 论坛...123
隔霂龉苜焢垭痉2021-08-09
酵母单杂交pabai可以不用线性化载体
酵母单杂交技术最早是1993年由Li等从酵母双杂交技术发展而来，通过对报告基因的表型检测，分析DNA与蛋白之间的相互作用，以研究真核细胞内的基因表达调控。由于酵母单杂交方法检测特定转录因子与顺式作用元件专一性相互作用的敏感性和可靠性，现已被广泛用于克隆细胞中含量微弱的、用生化手段难以纯化的特定转录因子。
酵母单杂交(Yeast one-hybrid)是根据DNA结合蛋白(即转录因子)与DNA顺式作用元件结合调控报道基因表达的原理，克隆与靶元件特异结合的转录因子基因(cDNA)的有效方法。其理论基础是：许多真核生物的转录激活子由物理和功能上独立的DNA结合区(DNA-binding domain BD)和转录激活区(Activation domain AD)组成，因此可构建各种基因与AD的融合表达载体，在酵母中表达为融合蛋白时，根据报道基因的表达情况，便能筛选出与靶元件有特异结合区域的蛋白。理论上，在单杂交检测中，任何靶元件都可被用于筛选一种与之有特异结合区域的蛋白。
酵母单杂交技术最早是1993年由Li等从酵母双杂交技术发展而来，通过对报告基因的表型检测，分析DNA与蛋白之间的相互作用，以研究真核细胞内的基因表达调控。由于酵母单杂交方法检测特定转录因子与顺式作用元件专一性相互作用的敏感性和可靠性，现已被广泛用于克隆细胞中含量微弱的、用生化手段难以纯化的特定转录因子。
酵母单杂交(Yeast one-hybrid)是根据DNA结合蛋白(即转录因子)与DNA顺式作用元件结合调控报道基因表达的原理，克隆与靶元件特异结合的转录因子基因(cDNA)的有效方法。其理论基础是：许多真核生物的转录激活子由物理和功能上独立的DNA结合区(DNA-binding domain BD)和转录激活区(Activation domain AD)组成，因此可构建各种基因与AD的融合表达载体，在酵母中表达为融合蛋白时，根据报道基因的表达情况，便能筛选出与靶元件有特异结合区域的蛋白。理论上，在单杂交检测中，任何靶元件都可被用于筛选一种与之有特异结合区域的蛋白。
【求助】紧急求助各位做过cDNA文库方面实验的大侠,本人是新手123
monking2021-08-25
【编译】《 N Engl J Med》RNA干扰的潜在治疗作用_问答详情_文库_...123
martin47202004-12-31
正如科学家们想象的那样，通过基因调控的主要机制，可以使得基因沉默，也就是CaenorhaBDitiselegans提出的可行的RNA干扰技术，通过促进RNA降解来实现基因沉默。科学家们在不同生物系统中业已发现了控制干扰RNA的途径，以对基因进行调控。同时，科学家们也在努力实现通过利用干扰RAN技术来阻断疾病（比如HIV-1，肝炎病毒，流感病毒的感染）的发展。
TherapeuticPotentialofRNAInterference
MarioStevenson,Ph.D.
nengljmed351;17www.nejm.orgoctober21,2004
Justwhenscientiststhoughttheyhadfiguredoutthefundamentalmechanismsthroughwhichgeneexpressionisregulated,studiesofthenematodeCaenorhabditiselegansrevealedtheexistenceofapathway,nowknownasRNAinterference(RNAi),thatsilencesgeneexpressionbypromotingdegra-dationofRNA.ScientistshavediscoveredwaystocontrolRNAiinordertoregulategeneexpressioninavarietyofBIOLOGicsystems,andtheyareresearchingwaystohar-nessRNAitointerruptdiseaseprocessessuchasthosecausedbyhumanimmunodefi-ciencyvirustype1(HIV-1),hepatitisviruses,andinfluenzavirus.
中英双语微生物学术语对照.pdf(676.0k)
TherapeuticPotentialofRNAInterference
MarioStevenson,Ph.D.
nengljmed351;17www.nejm.orgoctober21,2004
Justwhenscientiststhoughttheyhadfiguredoutthefundamentalmechanismsthroughwhichgeneexpressionisregulated,studiesofthenematodeCaenorhabditiselegansrevealedtheexistenceofapathway,nowknownasRNAinterference(RNAi),thatsilencesgeneexpressionbypromotingdegra-dationofRNA.ScientistshavediscoveredwaystocontrolRNAiinordertoregulategeneexpressioninavarietyofBIOLOGicsystems,andtheyareresearchingwaystohar-nessRNAitointerruptdiseaseprocessessuchasthosecausedbyhumanimmunodefi-ciencyvirustype1(HIV-1),hepatitisviruses,andinfluenzavirus.
中英双语微生物学术语对照.pdf(676.0k)
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