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abfrontier/CycleavePCR Mycoplasma Detection Kit/CycleavePCR Mycoplasma Detection Kit, 50회/CY232
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제품특징
□ 제품설명
본 제품은 Mycoplasma 16S rRNA 유전자를 타겟으로 Real Time PCR 장치를 이용해대부분의 Mycoplasma를 특이적으로 검출하기 위한 kit이다. 적어도 Mycoplasma 속 중의 10종(M. arginini, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. salivarium, M. fermentas, M. bovis, M. arthritidis, M. pirum, M. pneumoniae) 및 Acholeplasma속 중의 1종(A. laidlawii)에 대해 매우 민감하게 검출할 수 있음을 확인하였다. 본 kit의 증폭 반응에는 Hot Start PCR용 효소인 TaKaRa Ex Taq HS를 사용하고 있어 반응액 조제 혹은 반응(본격적인 cycle 반응)전에 miss-priming이나 primer dimer에서 유래하는 비특이적 증폭을 막을 수 있다. 증폭 산물의 검출에는 cycling probe법을 사용하고 있다. 이 방법은 RNA와 DNA로 구성된 키메라probe(chimera probe)와 RNase H와의 조합에 의한 고감도 검출 방법으로, 매우 특이성이 높은 검출이 가능하다. Probe는 한쪽 말단은 형광 물질로, 다른 말단은 그 형광 물질이 발하는 형광을 소광하는 물질(quencher)로 표지되어 있다. 이 cycling probe는 intact한 상태에서는 quenching에 의해 형광을 발할 수 없지만, 상보적인 증폭 산물과 하이브리드를 형성한 후에 RNase H에 의해 RNA 부분에서 절단되면, 강한 형광을 발하게 된다. 이러한 방법으로 형광 강도를 측정하여 증폭 산물량을 모니터 할 수 있다. 본 kit의 probe는 Mycoplasma에 특징적인 염기에 상보적으로 결합 하는 염기 부분을 RNA로 하고 있기 때문에, Mycoplasma만을 특이적으로 고감도에 검출하는 것이 가능하다.
□ 내용
1. 2×CycleavePCR Reaction Mix | 625 μl |
2. Myco. Primer/Probe Mix(5×conc.) | 250 μl *1 |
3. RNase Free dH2O | 1 ml |
4. Myco. Positive Control(1×106 copies/μl) | 20 μl *2 |
5. Proteinase k | 50 μl |
*1 형광 표지 probe를 포함하고 있으므로 차광에 유의한다. *2 Real time PCR component (1~3)에 잘못해 혼입하면 올바른 검출 반응을 실시할 수 없게 된다. 별도의 보관케이스를 마련하여 따로 보존한다.
□ 보존
- 20℃
□ kit 이외에 필요한 기기, 시약
* Real Time PCR용 증폭 장치 및 전용 튜브 Thermal Cycler Dice Real Time System II(TP900/TP960) Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(TP700/TP760)해석에는 Thermal Cycler Dice Real Time System Software Ver.4.0을 사용.Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies) * 200 μl, 20 μl, 10 μl 각 micropipette, tips* 탁상원심기 등
□ Positive Control에 대해
Mycoplasma Positive Control을 주형으로 Mycoplasma Primer로 증폭된 PCR 산물은, FAM 표지 probe 검출 영역과 ROX 표지 probe 검출 영역의 양쪽 모두를 포함하고,FAM 표지 probe와 ROX 표지 probe 모두에서 검출된다. 샘플 중에 저해 물질이 포함되어 있는지 어떤지를 확인하기 위해서는 사용하는 샘플에 Mycoplasma Positive Control를첨가하고 Control 실험을 실시해 ROX 필터로 검출의 유무를 확인한다.蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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及时交付： 限时必达 畅选无忧
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蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2021-09-03
Microtubule Spindowns for Visual Analysis Microtubule spindowns for visual analysis can be performed on single microtubules or microtubules nucleated from axon 查看更多
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2018-12-26
Mouse ImmunizationOrder 6 six week old Balb/C mice and let the ARC know they are coming. Have your antigen ready for when they arrive. Once they get there earm 查看更多
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2021-08-20
一．打开电源，仪器进行自检。约1分钟后自检结束，窗口显示主菜单： Run Enter List Edit Files Setup 二．将装有样品的已经封口的离心管或96孔板放入相应的Block。 三．编制程序： 1．将光标移至主菜单中“Enter”处，按“Proceed”键，输入程序的文件名，用左右箭头键变换英文字母 查看更多
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2018-12-26
一 原理：IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A"特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。 查看更多
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2018-12-26
一、核酸分子杂交技术1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交的双链。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成 查看更多
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2018-12-26
SNP的检测知识：人类基因组中存在着广泛的多态性，最简单的多态形式是发生在基因组中的单个核苷酸的替代，即单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNPs）。SNP通常是一种二等位基因的 查看更多
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Fast and reliable mini-prep RNA extraction from Neurospora crassaV. Sokolovsky+, R. Kaldenhoff, M. Ricci and V.E.A. Russo - Max Planck Institut für molekulare 查看更多
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2018-12-26
很多药都是用国际单位计算的，这里说的国际单位不是广义的那种，而是一种效价单位。而不同的药物是有不同的换算方法的。 您说的脂 查看更多
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2018-12-26
Presentation at the World Veterinary Poultry Association, Cairo, Egypt, January 2002 p.200Introduction: Mycoplasma infection continues to be an important cause 查看更多
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2021-07-22
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2018-12-26
Worm Injectionspads:melt 2% agarose in water, keep molten at 42oCuse 25mm x 25mm or larger microscope slidesspread out microscope slides onto a heat resistant 查看更多
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2018-12-26
Cell Isolation Techniques Methods and MaterialsWorking With EnzymesAll of the enzymes Worthington offers for tissue dissociation applications are available as 查看更多
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为什么RNA干扰后,目的基因mRNA的干扰效率比蛋白干扰效率要高123
灰太狼馗志1662021-08-01
正常 因为mRNA的翻译效率不同啊 而且对mRNA的检测更加灵敏 当然也就是更加不准确 WB也是各种不准 反正肯定效率不同啦
二园艺植物cDNA文库构建.ppt123
cainiaomiao2021-08-19
【求助】质粒cDNA文库容量问题_问答详情_蚂蚁淘,【正品极速】生...123
hjc562021-08-21
转录组测序构建的文库与cDNA表达文库的区别 分子生物 分子...123
红颜17302021-08-11
转录组即某个物种或特定细胞在某一功能状态下产生的所有RNA（包括mRNA，smallRNA及non-coding RNA等）的总和。转录组测序是指利用第二代高通量测序技术进行cDNA测序，全面快速地获取某一物种特定器官或组织在某一状态下的几乎所有转录本。相对于传统芯片而言，转录组测序无需预先设计探针，即可对任意物种的任意细胞类型的转录组进行检测，能够提供更精确的数字化信号，更高的检测通量以及更广泛的检测范围，是目前深入研究转录组复杂性的强大工具。
基因表达谱指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特定细胞或组织在特定状态下的基因表达种类和丰度信息，这样编制成的数据表就称为基因表达谱。
基因表达谱指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特定细胞或组织在特定状态下的基因表达种类和丰度信息，这样编制成的数据表就称为基因表达谱。
为什么cDNA文库没有启动子和终止子cDNA文库是用mRNA逆转录...123
好帅3152017-12-07
他说的对啊
下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中.不正确的是( )A.cDNA...123
hispringapril2017-12-07
目的基因来自真核生物，受体细胞为原核细胞，需要用CDNA文库。
基因组文库是一个比较笼统的概念。这个文库可以指某种真核生物的基因组，也可以指某种原核生物的基因组。实质是将某种生物的全部遗传信息贮存在一个受体菌群体中，做为目的基因的来源。
基因组文库是一个比较笼统的概念。这个文库可以指某种真核生物的基因组，也可以指某种原核生物的基因组。实质是将某种生物的全部遗传信息贮存在一个受体菌群体中，做为目的基因的来源。
【求助】紧急求助各位做过cDNA文库方面实验的大侠,本人是新手123
monking2021-08-25
建立cDNA文库最重要的酶是（ ）。_123
我是涂涂00572017-12-02
反转录酶：以mRNA为模板反转录合成DNA。
限制性内切酶：酶切目的基因和载体，使其产生相同的粘性末端。
DNA连接酶：连接目的基因和载体。
限制性内切酶：酶切目的基因和载体，使其产生相同的粘性末端。
DNA连接酶：连接目的基因和载体。
基因组文库的类型有()_123
风生Ohg32起2017-12-07
cDNA文库
以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA
基因组文库
用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段与载体连接，再转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。这样，一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。展开
以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA
基因组文库
用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段与载体连接，再转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。这样，一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。展开
【求助】请教个基因组文库构建的问题 核酸基因技术讨论版...123
zyism_2021-07-23
基因组酶切后，切胶回收浓度大概为多少才可以进行下一步实验？为什么二十几的浓度和载体连不上呢？载体也明明去磷酸化了，单连载体的时候也不会自连。那为什么把载体和酶切后的基因组连起来转化后挑菌做PCR验证却有很多空载呢？我的基因组酶切大小为2kb~4kb。上面那排7kb~10kb的带是什么东西呢？
【求助】关于cDNA文库构建测序问题 核酸基因技术讨论版...123
yudandan_19802021-08-26
白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒说明书和原理_123
liuzeyi20022018-01-22
RNA干扰（RNAi）：近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptionalgenesilencing,PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。
MicroRNA（miRNA,微RNA）：即为长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RNA家族。
小的干涉RNA（siRNA）：是在RNA干涉过程中人工体外合成的小片段RNA，由约20个碱基对组成，包括5个磷酸盐，2个核苷和3个悬臂。
miRNA与siRNA之间有许多相同之处：1.二者的长度都约在22nt左右。2.二者都依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer产物的特点。3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。4.二者都是RISC组分，所以其功能界限变得不清晰，如二者在介导沉默机制上有重叠。5.miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的。
miRNA与siRNA的不同点：1.根本区别是miRNA是内源的，是生物体的固有因素；而siRNA是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物。2.结构上，miRNA是单链RNA，而siRNA是双链RNA。3.Dicer酶对二者的加工过程不同，miRNA是不对称加工，miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂，其他部分降解；而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。4.在作用位置上，miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区，而siRNA可作用于mRNA的任何部位。5.在作用方式上，miRNA可抑制靶标基因的翻译，也可以导致靶标基因降解，即在转录水平后和翻译水平起作用，而siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控。6.miRNA主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达，而siRNA不参与生物生长，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。
miRNA分离纯化测序
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miRNA功能分析
miRNAPPT（我下载了一下很不错）
miRNA的加工
miRNA作用机理图（实验方法）
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回复：【交流】关于miRNA的RT-PCR-蚂蚁淘论坛
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供参阅，大家可以多多参与交流！
MicroRNA（miRNA,微RNA）：即为长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RNA家族。
小的干涉RNA（siRNA）：是在RNA干涉过程中人工体外合成的小片段RNA，由约20个碱基对组成，包括5个磷酸盐，2个核苷和3个悬臂。
miRNA与siRNA之间有许多相同之处：1.二者的长度都约在22nt左右。2.二者都依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer产物的特点。3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。4.二者都是RISC组分，所以其功能界限变得不清晰，如二者在介导沉默机制上有重叠。5.miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的。
miRNA与siRNA的不同点：1.根本区别是miRNA是内源的，是生物体的固有因素；而siRNA是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物。2.结构上，miRNA是单链RNA，而siRNA是双链RNA。3.Dicer酶对二者的加工过程不同，miRNA是不对称加工，miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂，其他部分降解；而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。4.在作用位置上，miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区，而siRNA可作用于mRNA的任何部位。5.在作用方式上，miRNA可抑制靶标基因的翻译，也可以导致靶标基因降解，即在转录水平后和翻译水平起作用，而siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控。6.miRNA主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达，而siRNA不参与生物生长，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。
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