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- mutaFISH™ DNA Accessory Kit 1 for Cells provides reagents and enzymes for in situ restriction digestion, exonucleolysis, mutaFISH™ hybridization, ligation and amplification in cell prior to mutaFISH™.
- Supplied Product:
- Box 1 content:1. H2O2. PBS3. Wash Buffer 14. Digestion Enzyme Buffer5. Wash Buffer 26. Formamide7. Detection BufferBox 2 content:1. Digestion Enzyme2. BSA3. Restriction Enzyme 14. 10X Restriction Enzyme Buffer5. Hybrid Enzyme6. 10X Hybrid Enzyme Buffer7. 1M KCL8. DNA Polymerase9. 10X DNA Pol Buffer10. dNTP Mix11. 50% Glycerol12. DAPI (100uM)
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- mutaFISH™ (mutation-specific Fluorescence In Situ Hybridization)
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- FISH Probes vs mutaFISH™ Probes
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- The figure represents an example workflow of detecting a point mutation on double strand DNA by using mutaFISH™ probes with mutaFISH™ DNA Accessory Kit.
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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2021-09-03
Illumina高通量二代测序系统是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器，产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的Illumina高通量二代测序系统销售服务商之一，在北京等地方销售Illumina高通量二代测序系统已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业Illumina高通量二代测序系统仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的Illumina高通量二代测序系统产品 查看更多
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2021-07-29
广州市锐博生物科技有限公司在发布的siRNA文库—genOFF™ Human Genome siRNA Premix Library供应信息，浏览与siRNA文库—genOFF™ Human Genome siRNA Premix Library相关的产品或在搜索更多与siRNA文库—genOFF™ Human Genome siRNA Premix Library相关的内容。 查看更多
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2021-07-29
伴随对基因测序、精准医学认识的不断加深，从「十三五」规划纲要到有关部门政策部署，近年来，我国加快了促进精准医学发展的步伐，记者对此进行盘点。2014 年 3 月，国家卫计委医政医管局发布通知开展高通量基因测序试点，明确试点的项目包括产前筛查和产前诊断、遗传病诊断、肿瘤诊断与治疗、植入前胚胎遗传学诊断等。2014 年 6 月，国家食品药品监督管理总局经审 查看更多
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2019-01-26
联系我们： 上海智岩科学仪器有限公司 上海.浦东.张江高科技园区.蔡伦路780号.药谷大厦 电 话：021-3386065733860659 Email：ZhiYanLab@163.com 网址：www.Lab51.cn Life Technologies推出新的台式基因测序仪 Ion Proton™。借助该技术产品，只需 1000 美元即可在一天时间内完成个人全基因组测序。 Life Technologies公司研发的 Ion P 查看更多
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VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina®本品为针对Illumina®高通量测序平台定向开发的small RNA文库构建专用试剂盒，适用于模板起始量为0.1-1 μg的动、植物总RNA，以及分离纯化的small RNA。small RNA的3’和5’端分别连上通用接头，再经过逆转录、PCR扩增以及PAGE胶或磁珠纯化等步骤，最终得到适用于I... 查看更多
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2021-08-31
Rather Rapid Genomic PrepHoffman and Winston, Gene, 19871. Grow 5 ml yeast cultures to saturation.2. Collect cells by centrifugation and resuspend in 0.5 ml of 查看更多
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2019-02-12
苏州亚凡生物技术有限公司在发布的MiSeq,现货供应Illumina二代测序仪供应信息，浏览与MiSeq,现货供应Illumina二代测序仪相关的产品或在搜索更多与MiSeq,现货供应Illumina二代测序仪相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
1） Poligo(dT)-纤维素层析法提取poly(A)+RNA装柱与填柱1. 取oligo(dT)-纤维素0.5～1.0 g，用0.1 mol/L NaOH重悬。2. 用oligo(dT)-纤维素（0.5～1.0 ml柱体积）灌注DEPC处理过的一次性柱子（或塞以无菌玻璃毛的巴式滴管，300℃烘烤灭菌4 h）。用 查看更多
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2021-09-22
本次CSCO国际白血病淋巴瘤专场迎来重磅嘉宾，哈佛大学医学院Munshi教授做了关于多发性骨髓瘤的MRD检测的报告，提到了利用免疫组二代测序提高MRD检测灵敏度是极为重要的。以更高的检测深度（如10-5,10-6）来作为MRD阳性的cut off可以有效的延长肿瘤病人的无进展生存期，帮助提高病人生活质量。微小残留病 (Minimal Residual Disease, MRD) 是指白血病/淋巴瘤/骨髓瘤患者经治疗缓解后，体内仍残留少量... 查看更多
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2021-08-15
1.一次制备，-80度保存，多次使用。
2.操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需１０分钟。
3.试剂盒含高效转换液，即开即用。
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2021-09-17
上海研谨生物科技有限公司在发布的AxyPrep 质粒大量制备试剂盒供应信息，浏览与AxyPrep 质粒大量制备试剂盒相关的产品或在搜索更多与AxyPrep 质粒大量制备试剂盒相关的内容。 查看更多
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天根DP441多糖多酚植物总RNA提取试剂盒123
陪着我就好__╰2017-10-12
是否需要纯化，还需进一步检测才能确定
1、测浓度和纯度，是否达标
2、跑电泳看条带是否与测的数据相互印证
如果上述两点满足，就不需要纯化，否则需要进一步纯化。
不过根据经验，一般都不需要，我们实验室用的是GNT系列的试剂盒，提取结果就直接进入下游实验了，效果挺稳定
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器（主要指线粒体和叶绿体）中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌）、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子.
小鼠没有叶绿体,你可以直接参照小鼠线粒体的提取方法进行提取.
1、测浓度和纯度，是否达标
2、跑电泳看条带是否与测的数据相互印证
如果上述两点满足，就不需要纯化，否则需要进一步纯化。
不过根据经验，一般都不需要，我们实验室用的是GNT系列的试剂盒，提取结果就直接进入下游实验了，效果挺稳定
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器（主要指线粒体和叶绿体）中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌）、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子.
小鼠没有叶绿体,你可以直接参照小鼠线粒体的提取方法进行提取.
【求助】提RNA做RTPCR是用提RNA试剂盒好还是提mRNA试剂盒好,急求 ...123
zlx08142021-07-23
提RNA做RT-PCR是用提RNA试剂盒好还是提mRNA试剂盒好,急求助!!
微生物16S测序解决方案—样品提取篇123
一男一女丶燲掛2017-11-26
离心都要4度离心。 离心管是否需要灭菌看你样品下游应用和整个实验目的。对于你这个似乎是检测肉储藏时间和其上细菌分布的实验，离心管是要灭菌的。根据塑料材质，离心管有可高压灭菌不可高压灭菌。
2015年基因测序领域产业格局分析123
liuygi2015-09-23
来源：高特佳投资/李新颜2015-09-2310:10
2015年将成为我国精准医疗的元年，基因测序作为精准医疗的前端，行业面临爆发性的增长机遇，同时在实际操作中也面临一定的挑战。
第一部分：基因测序被关注的原因
测序技术和大数据分析能力的发展使得精准医学成为可能。精准医学是以患者的个人基因组信息为基础为病人量身设计出最佳治疗方案，和传统的循证医学相比，精准医学有望成为治疗效果最大化和副作用最小化的一门定制医疗模式。
1.1基因测序的价格以超摩尔定律下降，使得基因测序经济性推广成为可能
现在人类全基因组测序成本已经降到1000美元以下，未来这一数字还将继续下降；
2008年，二代测序技术NGS的出现和推广，让测序成本开始加速下降，并明显超过摩尔定律的预测。
基因测序技术成本迅速下降（每兆碱基）
针对大量基因组数据，大数据处理能力提升也为分析和解读基因数据提供支持，测序技术及大数据分析能力的不断提升将会推动精准医学进入快速增长的轨道。
1.3传统医学需要突破，精准医疗的政策风口助推基因测序发展
政策风口：2015年2月，习近平总书记批示科技部和国家卫生计生委，要求国家成立中国精准医学战略专家组。
2015年3月11日，科技部召开国家首次精准医学战略专家会议，并决定在2030年前在精准医疗领域投入600亿元。2015年1月，国家公布了产前筛查与诊断高通量测序试点单位，4月公布了肿瘤诊断与治疗高通量基因测序试点单位，表明了政府推动精准医疗发展的决心。
5月14日，国务院颁布《关于取消非行政许可审批事项的决定》，再取消49项非行政许可审批事项，不再保留“非行政许可审批”这一审批类别。与医药相关的包括：第31项：第三类医疗技术临床应用准入审批；第52项：国家食品药品监督管理总局负责的药品行政保护证书的核发。取消非行政许可审批，松绑第三类医疗技术临床应用，变事前审批为事中事后监管。预计未来，由省级卫生计生行政部门负责的第二类医疗技术实施准入审批也将逐步取消。轻审批，重监管的趋势明确。
第二部分：基因测序的特点及发展趋势
目前基因测序技术已经发展到第三代（也有把纳米孔外切酶测序成为第四代）。
第一代DNA测序技术用的主要是1975年由桑格（Sanger）和考尔森（Coulson）开创的链终止法。
第二代DNA测序技术（NGS）目前使用最为广泛，以Roche公司的454技术、Illumina公司的Solexa，Hiseq技术和Life公司的Solid技术为标志。
第三代DNA技术（TGS）以PacBio公司的SMRT和OxfordNanoporeTechnologies的纳米孔单分子测序技术为代表，测序过程无需进行PCR扩增。
二代测序在5-10年内仍然是基因测序的主流方法
二代测序技术凭借其高通量、低成本和高准确度取代第一代测序技术成为测序市场的主流。由于第三代DNA测序技术目前面临测序成本高和测序结果准确度相对较低的市场化瓶颈，因此TGS仪器大规模商业化仍然需要较长的时间。
NGS各环节对测序结果有重要影响：NGS测序流程包括样本收集、基因提取、文库构建、基因测序和数据分析，各环节的准确性对测序结果有重要影响，比对数据库的规模直接影响数据分析结果的准确性。
二代测序技术兼具通量和准确度优势，有望引领分子诊断方法革新
常用的分子诊断技术包括聚合酶链式反应（PCR）、转录介导的扩增（TMA）、荧光原位杂交（FISH）、基因测序、以及基因芯片技术。
基因检测主要技术的细分市场增速概况（全球）
不同发展阶段的分子诊断技术都有其特定的应用场景，随着NGS成本的下降，商业模式的丰富，传统的分子诊断方法将受到挑战。二代测序技术兼具通量和准确度优势，更为快速、低廉，极大地拓宽了基因测序的应用范围，尤其促进了分子诊断方法的革新。
第三部分：基因测序产业格局投资机会及挑战分析
3.1基因测序产业格局概览
基因测序市场的细分领域，包括了仪器、耗材、测序服务、数据处理、终端应用等多个方面，如下图所示。
中游：测序服务（样品制备、检测和分析），信息分析（大数据存储、解读、共享）
下游：终端用户（应用场景）
3.2上游：仪器技术壁垒最高且形成寡头垄断格局，试剂耗材国内企业有一定机会
二代测序市场主流测序平台主要是四大家：Illumina、IonTorrent/LifeTechnologies(2014年被ThermoFisher收购)、454LifeSciences/Roche、PacificBiosciences。
Genomeweb2013度年全球测序仪器市场调查显示：Illumina占据了全球测序仪器市场71%的份额，Lifetechnologies则排名第二分得16%的市场份额，罗氏和PacBio则以10%和3%分列第三和第四位。前两家测序仪公司的全球市场占有率接近90%，基因测序仪行业已经形成寡头垄断的格局。
国内的三大家华大基因、达安基因、贝瑞和康和仪器供应商合作，已经在仪器和试剂层面均获得注册证。从盈利模式角度看，仪器未来不排除出现免费赠送，主要赢利点从试剂耗材及服务端获得，因此国内企业在试剂和服务端突破的可能性最大。
测序试剂、耗材、检测项目的开发，国内企业已经开始有所布局。
2014年7月，华大基因的新一代测序产品也获得了CFDA的批准，包括BGISEQ-100、BGISEQ-1000，以及胎儿染色体非整倍体（T21、T18和T13）检测试剂盒。
2014年11月5日，国家食品药品监督管理总局批准了达安基因的基因测序仪和胎儿染色体非整倍体21三体、18三体和13三体检测试剂盒（半导体测序法）医疗器械注册。
2015年4月，贝瑞和康的基因测序仪（NextSeqCN500），以及胎儿染色体非整倍体（T13/T18/T21）检测试剂盒已通过国家食品药品监督管理总局（CFDA）的批准。NextSeqCN500基因测序仪是贝瑞和康与Illumina公司合作，为满足中国临床需求而设计制造的一款新型高通量的基因测序仪。
3.3中游：第三方测序服务机构和生物信息分析（数据分析），数据分析是目前行业发展的瓶颈环节
Illumina推出HiSeq系列高通量测序仪后，终端的数据分析成为行业发展的瓶颈。由于数据库是决定检测比对结果准确度和精确度的重要因素之一，因此是数据分析软件提供商主要的竞争壁垒之一。
测序服务——中国成为全球“测序工厂”
测序服务技术壁垒较低，主要面向科研市场，国家缺乏准入标准和质量控制规范，众多碎片化的小企业呈现疯狂生长的状态，仅提供一代测序服务的企业就有上百家。
在二代测序方面，2010年高通量测序平台中国拥有量仅次于美国，如今二者的差距很可能已经非常小。
全世界规模最大的基因组研究中心有多个在中国，其中华大基因（BGI）拥有世界上最多的新一代测序仪，产能约占全球的10%-20%（按illumina，Life等销总量计算）。
国内主要第三方基因测序机构覆盖的基因检测相关服务
科技服务仅约10亿元的外包市场，企业未来转型的出口是健康管理、医院、独立体检中心。因此有越来越多的科技服务测序公司在转向做第三方医学检验所。
临床测序有三个主体，第三方医学检验所、医院和体检中心，前者更加市场化，未来发展空间较大。
生物信息分析——挑战与机遇并存
基因测序所生成的原始数据并不能反映任何有价值的信息，必须通过专业人员进行分析和解读。现今的生物信息分析涉及的数据存储、解读、及共享是整个基因测序行业目前面临的最大难题，主要原因一是来自于数据量的庞大，二是源于数据的复杂性。
目前这一市场份额基数较小，蕴含着巨大的市场潜力。关注国内企业在这方面的的机会。
数据解读已被全球公认为是比测序还要重要的环节，分析和解读可能会成为中国企业的优势。但短期只能烧钱看不到回报，门槛是数据库，这是限制企业数量和规模的主要原因。
生物信息的所有权和应用领域，目前仍以科研为主，商业化应用瓶颈在于伦理和政策，但随着市场培育的加快，政府和保险的参与，基因组信息未来将归个人所有，政府负责建立数据中心和安全中心，授权个人对数据的使用权。
数据解读服务的市场格局将分为两大阵营：（1）、自行解读，有仪器研发和实力较强的大企业或科研机构会自己解读；（2）外包解读，中小企业、科研人员、医生个人则会交由第三方公司进行数据分析，因此市场对差异化的个性化的服务需求会增加，此类公司会越来越多。外包解读将催化产业不断涌现出各种创新服务模式。
至于数据库的建设，更看好通过市场化的竞争，由企业投资整合资源来积累数据的途径。
解读服务发展的催化剂在需求，落脚点在市场教育。数据库如果不用那就只是个数据库而已，没有附加价值。而医生和患者认识的基因越多，到更大平台去解读和挖掘数据的需求就越大，想要发现已知或未知疾病机理的欲望就越强烈，未来买单的将是保险公司。
3.4下游：二代基因测序的应用领域及其挑战
3.4.1未来市场容量
其中，肿瘤学120亿美元、生命科学50亿美元（包括生命科学工具、复杂病症，农业基因以及影响因子和宏基因组）、生育和基因健康20亿美元（孕妇和新生儿童的检测，以及基因健康）、其他应用10亿美元。
目前，我国基因测序市场中，产前基因检测较为著名，如以国家规定的3500元/次的费用计，按照我国每年2000万左右的新生儿计算，产前基因检测市场能达到七百亿元人民币。
具体来看：
生育健康领域（应用相对成熟）
新生儿出生缺陷不仅给家庭带来了沉重的复单，而且已经成为严重影响我国经济发展和人口素质的重要问题。一些特定的遗传性疾病往往在出生一定时间后才会表现出明显症状，因此初生儿早期的基因筛查能够帮助尽快在医学上进行早期干预，达到及早发现、及早治疗的效果。目前新一代测序技术在生育健康领域主要应用在以下方面。
●无创产前检测（NIPT）
无创产前检测即胎儿染色体非整倍体无创基因检测，是一种基于大规模平行基因组测序技术的高科技检测手段。这种检测只需抽取孕妇少量静脉血，分离其中的胎儿游离DNA，通过高通量二代测序技术平台测序，并对测序结果进行生物信息学分析，即可判断胎儿是否换染色体非整倍体疾病。该技术是国际人类基因组学研究成果被成功孵化的应用技术之一，在欧美等发达国家普遍开展。该法操作简单，易行，安全，准确，孕妇早期就可进行，更具有无创的特点，不会导至流产、胎儿宫内感染等不良后果。
无创产前检查不仅可以筛查唐氏综合症（21三体），还可以筛查爱德华氏综合症(18三体)、帕特氏综合症（13三体）以及提示其他非整倍体型遗传病。
●胚胎植入前遗传学诊断（PGD）
也就是第三代“试管婴儿”，主要用于检查胚胎是否携带具有遗传缺陷的基因。它是在试管婴儿技术基础上出现的，精子卵子在体外结合形成受精卵并发育成胚胎后，在其植入子宫前进行基因检测，以便使试管婴儿避免一些遗传疾病。通过DNA检测技术对胚胎的染色体异常或者遗传性疾病进行诊断，选择无异常的胚胎植入母体，从根本上提高“试管婴儿”的妊娠成功率，降低自然流产率，提高妊娠质量，并且可大大提高出生后婴儿的质量。
●新生儿单基因遗传病检测
单基因病是指由一对等位基因控制的疾病或病理性状。常见的单基因病有短指症、地中海贫血症、白化病、苯丙酮尿症、色盲、血友病、C6PD（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶）缺乏症等。已知的单基因病的致病基因及遗传方式大部分已经明确，早起单基因遗传病大部分通过染色体核型分析进行检测，染色体和性分析不可避免的缺点是分辨率低，对技术人员的经验依赖度高，对于微小缺失或者基因突变导至的遗传病不能进行检测。现在通过先进的二代高通量测序技术可以对上千种由于基因变异（基因突变、平衡异位、微缺失等）导至的遗传病进行检测，并且可以在早期通过胎儿的脱落细胞或者绒毛膜进行检测，在产前确认胎儿是否患有遗传病，为遗传病携带者或者已经生育遗传儿的家庭提供明确的遗传咨询和产前检测，从而做到优生，提高人口素质。
肿瘤的个体化治疗
肿瘤的发生发展中，基因的改变在其中居于中心地位，致癌基因的异常表达和抑癌基因失活，是肿瘤细胞无限制生长的分子基础。肿瘤临床表现多种多样，且发病率逐年升高，迄今尚无简单的治疗方法或使用单一药物能治愈所有的肿瘤。询证医学、诊疗规范化和个体化已经成为肿瘤治疗的公认趋向。
基因测序技术对于肿瘤个体化治疗主要有两方面应用：一是检测患者携带的肿瘤基因，二是检测肿瘤靶向药的靶点。
药物研发领域应用（CRO及医药公司）
新一代测序技术早期主要应用在肿瘤和传染病治疗领域，现在越来越多的使用在新兴生物药的开发和疫苗生产。目前药物研发部门使用的各种高通量技术，例如基因芯片、代谢组学建模、酵母双杂、蛋白质组学、高通量化学筛选、电子杂交定位，有望被新一代测序技术替代或作为补充。
个人DNA信息咨询
近几年兴起的直接面向用户（directtoconsumer）的个人DNA信息咨询产业其实是基因检测市场化产物，基本模式是利用互联网和快递寄送，将检测试剂盒送至用户手中，再由其将采集的唾液及送回公司，并从中提取用户的DNA，检测结果也可直接从网上查询获取。
3.4.2在应用领域主要趋势及挑战
业界认为，基因测序技术应用市场的先后顺序：无创产前筛查（NIPT）、癌症的个体化用药、癌症早筛、人人基因组、检测与筛查。
其中，植入前胚胎遗传学诊断（PGS/PGD）30亿市场、产前筛查与诊断（NIPT）160亿市场、肿瘤诊断与治疗千亿市场。此外，目前已经试点的方向，并不能说明技术已经很成熟，相反有些还很不成熟，需要通过很长时间的试点来积累样本和数据。未来可能的试点方向包括，免疫系统疾病、移植类疾病配型检测、传染病检测、公共卫生领域等都有可能。
生育健康领域
NIPT作为公认的第一个产业化项目，市场格局基本形成华大和贝瑞占90%的市场份额，包括108家试点单位及其他中小医院。
NIPT进入壁垒目前只是渠道
1、测序成本和客户体验，如果成本降到目前的1/10，或客户体验有颠覆性改变，都能形成替代，但短期还看不到；
2、测序服务上，主要是产科医院的渠道壁垒。
肿瘤诊断领域
目前的第二大应用，未来有可能成为第一大应用领域，个性化用药、靶向治疗、早诊是必然的发展方向，空间很大，但短期内还达不到无创的市场高度。
（1）肿瘤是多基因病，没有标准的用药方案，需要个性化治疗，并且机理尚未厘清，医院更倾向于自己做，不容易商业化。
（2）从基于组织到基于血液的肿瘤诊断，对医生而言需要有至少五年的市场培育过程，病种的增加则受制于样本量的积累。
（3）肿瘤的早诊，技术上，血液循环肿瘤细胞DNA(ctDNA)和循环肿瘤细胞（CTC）目前通过测序的检出率还很低，需求取决于人们保健意识的发展程度，未来可能成为健康保险的一个重要产品。
其他
其他应用领域主要的挑战：耳聋基因的筛查（检出率低，假阴性高）、罕见病筛查（无有效干预手段）、地中海贫血、靶向药物伴随诊断（尚无标准）。
2C端的应用的挑战，需要有一个较长的市场教育和科普过程，并且受限于伦理和法律。（生物谷Bioon.com）
RNA制备怎样才能万无一失仪器谱123
xq07121050252021-07-29
众所周知，RNA是一种相当不稳定的分子，它在这一方面可比DNA差远了。我们大家在实验室里基本上都耳闻目睹过，处理这种核酸时发生的悲惨故事。幸运的是，随着RNA研究逐渐成为主流，可供选择的商业化工具也越来越丰富越来越成熟。
RNA制备过程中究竟有哪些问题需要注意，又有哪些工具可以助我们一臂之力呢，且听下文分解。
RNA制备的四大祸害碱性条件、金属离子和高温都会促使RNA分子水解。因此，RNA操作一般在0°C-4°C的中性或微酸性缓冲液中进行，人们也常常在其中添加螯合剂，比如0.1mMEDTA。有些应用不允许EDTA的存在，这时可以通过离子交换树脂来去除阳离子。
在制备RNA时，RNase一直是个令人头疼的大问题，因为这种酶基本上无处不在。生物样品本来就含有RNase，它们存在于细胞的小隔间里，当细胞被裂解时这些RNase就释放出来。另外，实验室操作也很容易引入RNase。“这种酶到处都是，我们皮肤细胞上就有。如果你戴着手套接触了脸或者手臂，也会沾到一些RNase，”Promega公司的产品经理EricVincent提醒道。
在收获组织或细胞时，“提取RNA要越快越好，或者就想办法令RNase失活，”NEB公司的RNA研究带头人BretRobb指出。
如果不能立刻提取RNA，就应当通过速冻来稳定样本，或者将样本储存在特殊的RNA保存液中，比如AllProtectTissueReagent、RNAlater。此外，PreAnalytiX公司的PAXgeneBloodRNATube也很适合保存这样的样本，“不仅能确保RNA的安全，而且让细胞不会因为温度或缓冲液条件的改变表达任何转录本，”Qiagen公司的MartinSchlumpberger介绍道。PreAnalytiX是BD和QIAGEN的一个合资公司。
绝大多数RNA分离试剂盒中的裂解缓冲液（例如Qiagen公司的RNAEasy），“可以失活任何样本所带的RNAse，”Schlumpberger解释道。“这些产品对于RNA来说是相当安全的。”如果你更喜欢自己DIY，那么异硫氰酸胍、酚/氯仿和SDS都能帮你保护样本中的RNA。
据介绍，RNA纯化之后对环境中的RNAse最为敏感，这个时候需要特别注意预防RNAse的污染。
可不可以做到万无一失如何才能保证RNA实验的成功，这已经是一个老生常谈的问题了。RNA操作时应该戴上一次性手套，并且在专门的空间里进行，尤其要与质粒制备和细菌操作分开。操作者尽量不要接触洁净度不能令人百分百放心的物品。
我们来看看NEB公司是如何做到万无一失的。NEB公司的RNA实验室统一使用RNA专用的一次性耗材。他们认为高压灭菌会使溶液中的微生物释放出RNase，而这些RNase会在灭菌之后复性。因此NEB公司只信任经过认证的无RNAse器皿，抛弃了高压灭菌过程。Robb介绍道，目前市面上有许多经过认证的RNA专用产品（试剂盒、试剂和耗材），进行RNA实验已经比十几年前容易得多了。
“过去人们在配制溶液的时候总是胆战心惊，恨不得屏住呼吸进行称量和搅拌，以免把RNase带到样本中去，”他解释道。而现在，你可以很方面的买到各种无RNAse的试剂，从水、1MTris到5MNaCl。“使用这些试剂可以为RNA实验提供额外的保障。”
许多无核酶的塑料产品都经过了第三方的检测和认证，MoBioLaboratories就提供这样的服务。“我们可以帮助制造商建立始终如一的无污染生产线，”培训操作者如何识别和消除污染源，MoBio公司的CarlTsang介绍道。
我国大多数实验室还是使用玻璃器皿，这些器皿至少需要在180°C的条件下烘烤几个小时，才能确保将RNAse永久性地摧毁。之后，研究者们可以通过商业化的试剂盒进行RNAse检测，比如NEB公司的RNAse污染分析试剂盒。
添加剂的使用DEPC（Diethylpyrocarbonate）一直被用于处理水和溶液，失活其中的RNAse。“多余的DEPC可以在高压锅中去除，因为DEPC在高温下很不稳定，会释放出CO2然后消失，”Schlumpberger说。不过许多人并不爱和这种可能致癌的化合物打交道，Schlumpberger强调，如果没有正确处理，残余的DEPC也会使RNA失活。
对于那些不能高压灭菌的器物，我们可以用RNaseAway试剂处理，然而将其浸泡在无RNAse的水里。
Vincent指出，RNAse抑制剂的使用应当成为常规。以Promega公司的RNAsin为例，RNAse抑制剂能够特异性结合并抑制实验室中常见的RNAse，包括RNAseA、B、C和人胎盘RNAse。“等你发现引入了RNAse时往往已经太迟了，多加一层保险是很有必要的，”他说。
只要我们了解威胁RNA的主要因素（高pH、高温、金属离子和内切酶），就能够想办法一一化解。这时你会发现，RNA制备其实并没有那么难。
http://seq.cn/article-10584-1.html
RNA制备过程中究竟有哪些问题需要注意，又有哪些工具可以助我们一臂之力呢，且听下文分解。
RNA制备的四大祸害碱性条件、金属离子和高温都会促使RNA分子水解。因此，RNA操作一般在0°C-4°C的中性或微酸性缓冲液中进行，人们也常常在其中添加螯合剂，比如0.1mMEDTA。有些应用不允许EDTA的存在，这时可以通过离子交换树脂来去除阳离子。
在制备RNA时，RNase一直是个令人头疼的大问题，因为这种酶基本上无处不在。生物样品本来就含有RNase，它们存在于细胞的小隔间里，当细胞被裂解时这些RNase就释放出来。另外，实验室操作也很容易引入RNase。“这种酶到处都是，我们皮肤细胞上就有。如果你戴着手套接触了脸或者手臂，也会沾到一些RNase，”Promega公司的产品经理EricVincent提醒道。
在收获组织或细胞时，“提取RNA要越快越好，或者就想办法令RNase失活，”NEB公司的RNA研究带头人BretRobb指出。
如果不能立刻提取RNA，就应当通过速冻来稳定样本，或者将样本储存在特殊的RNA保存液中，比如AllProtectTissueReagent、RNAlater。此外，PreAnalytiX公司的PAXgeneBloodRNATube也很适合保存这样的样本，“不仅能确保RNA的安全，而且让细胞不会因为温度或缓冲液条件的改变表达任何转录本，”Qiagen公司的MartinSchlumpberger介绍道。PreAnalytiX是BD和QIAGEN的一个合资公司。
绝大多数RNA分离试剂盒中的裂解缓冲液（例如Qiagen公司的RNAEasy），“可以失活任何样本所带的RNAse，”Schlumpberger解释道。“这些产品对于RNA来说是相当安全的。”如果你更喜欢自己DIY，那么异硫氰酸胍、酚/氯仿和SDS都能帮你保护样本中的RNA。
据介绍，RNA纯化之后对环境中的RNAse最为敏感，这个时候需要特别注意预防RNAse的污染。
可不可以做到万无一失如何才能保证RNA实验的成功，这已经是一个老生常谈的问题了。RNA操作时应该戴上一次性手套，并且在专门的空间里进行，尤其要与质粒制备和细菌操作分开。操作者尽量不要接触洁净度不能令人百分百放心的物品。
我们来看看NEB公司是如何做到万无一失的。NEB公司的RNA实验室统一使用RNA专用的一次性耗材。他们认为高压灭菌会使溶液中的微生物释放出RNase，而这些RNase会在灭菌之后复性。因此NEB公司只信任经过认证的无RNAse器皿，抛弃了高压灭菌过程。Robb介绍道，目前市面上有许多经过认证的RNA专用产品（试剂盒、试剂和耗材），进行RNA实验已经比十几年前容易得多了。
“过去人们在配制溶液的时候总是胆战心惊，恨不得屏住呼吸进行称量和搅拌，以免把RNase带到样本中去，”他解释道。而现在，你可以很方面的买到各种无RNAse的试剂，从水、1MTris到5MNaCl。“使用这些试剂可以为RNA实验提供额外的保障。”
许多无核酶的塑料产品都经过了第三方的检测和认证，MoBioLaboratories就提供这样的服务。“我们可以帮助制造商建立始终如一的无污染生产线，”培训操作者如何识别和消除污染源，MoBio公司的CarlTsang介绍道。
我国大多数实验室还是使用玻璃器皿，这些器皿至少需要在180°C的条件下烘烤几个小时，才能确保将RNAse永久性地摧毁。之后，研究者们可以通过商业化的试剂盒进行RNAse检测，比如NEB公司的RNAse污染分析试剂盒。
添加剂的使用DEPC（Diethylpyrocarbonate）一直被用于处理水和溶液，失活其中的RNAse。“多余的DEPC可以在高压锅中去除，因为DEPC在高温下很不稳定，会释放出CO2然后消失，”Schlumpberger说。不过许多人并不爱和这种可能致癌的化合物打交道，Schlumpberger强调，如果没有正确处理，残余的DEPC也会使RNA失活。
对于那些不能高压灭菌的器物，我们可以用RNaseAway试剂处理，然而将其浸泡在无RNAse的水里。
Vincent指出，RNAse抑制剂的使用应当成为常规。以Promega公司的RNAsin为例，RNAse抑制剂能够特异性结合并抑制实验室中常见的RNAse，包括RNAseA、B、C和人胎盘RNAse。“等你发现引入了RNAse时往往已经太迟了，多加一层保险是很有必要的，”他说。
只要我们了解威胁RNA的主要因素（高pH、高温、金属离子和内切酶），就能够想办法一一化解。这时你会发现，RNA制备其实并没有那么难。
http://seq.cn/article-10584-1.html
cdna 合成（逆转录）试剂盒使用说明书123
amberjtl2021-07-20
在做实验的时候，需要用到~~~麻烦好心人给我一份~~~~谢谢
【容量瓶能否贮存溶液】123
鳄鱼妹2021-07-27
构建重组质粒，在pSET4S质粒上插入一段基因的上下游同源臂，双酶切验证正确，同时以重组质粒为模板PCR扩增插入的片段，均与阳性对照一致，但测序结果进行NCBI比对，发现插入的一段序列不正确。而且这个重组质粒曾经构建出来过，因其中一个碱基突变所以重新构建，使用了primestar重新构建却总是测序不正确或者酶切不正确
针对白血病靶向治疗的25种分子_123
killer-dong2021-08-06
相关疾病：急性淋巴细胞白血病白血病癌症肿瘤由圣犹达儿童研究医院领导的一个国际研究小组发现了一种新的高风险急性淋巴细胞白血病（ALL）亚型的细节...
请教:TRNA保存于20度(未加DEPCH2o),安全吗、? PCR技术讨论版...123
smilingfish2021-07-28
TRNA保存于－20度（未加DEPC－H2o），安全吗、？可以保存多长时间？
哪家公司的DNA提取试剂盒质量比较好?123
djls42017-11-09
效果好的话当然是promega或者omega的，不过会贵很多 都是美国佬的东西
便宜点的就是国产的tiangen，效果会差一点点 如果是大样本的全血 用这个也凑合
便宜点的就是国产的tiangen，效果会差一点点 如果是大样本的全血 用这个也凑合
多糖多酚植物RNA提取试剂盒失败原因和解决方案_实验技术_实验...123
张小太03652021-08-23
天跟试剂盒提取多糖多酚植物总rna浓度一直很低是什么原因
用醌指纹法描述微生物群落的参数[7]有：(1)醌的类型和不同类型的醌的数目；(2)占优势的醌及其摩尔分数含量；(3)总的泛醌和总的甲基萘醌的摩尔分数之比；(4)醌的多样性和均匀性；(5)醌的总量等。对两个不同的群落，由上述分析所得数据可以计算出另一个参数____非相似性指数(D)，用于定量比较两个群落结构的差异。
醌指纹法具有简单快速的特点，近几年来广泛用于各种环境微生物样品(如土壤，活性污泥和其它水生环境群落)的分析。
用醌指纹法描述微生物群落的参数[7]有：(1)醌的类型和不同类型的醌的数目；(2)占优势的醌及其摩尔分数含量；(3)总的泛醌和总的甲基萘醌的摩尔分数之比；(4)醌的多样性和均匀性；(5)醌的总量等。对两个不同的群落，由上述分析所得数据可以计算出另一个参数____非相似性指数(D)，用于定量比较两个群落结构的差异。
醌指纹法具有简单快速的特点，近几年来广泛用于各种环境微生物样品(如土壤，活性污泥和其它水生环境群落)的分析。
HSP60缺失线粒体(mitochondria)控制干细胞命运:HSP60抗体、线粒...123
安乐风流_02021-07-21
Sanger 测序试剂盒和试剂支持感兴趣区的 PCR 扩增、循环测序和反应纯化。 下一代测序试剂盒和试剂可用于靶选择、文库构建和模板制备。 请浏览下面的章节，了解我们每个测序平台进行样本制备的测序所需要的试剂盒及试剂的更多信息。
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