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Gendepot/100bp PCR Ranger DNA Marker, 100bp-To-3Kb,  D1108/250ul/D1108-025
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Gendepot
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Contents100bp PCR Ranger DNA Marker is composed of fourteen chromatography-purified individual DNA fragments in 10mM Tris-HCl (pH7.6 at 25 °C ), 10mM EDTA, 5% Glycerol.1.66% Sucrose, 0.01% Xylene cyanol FF, 0.01% Cresol Red, 0.013% Bromophenolblue, 0.05% Orange G.
The 100bp PCR Ranger DNA Marker is a premixed, ready-to-use molecular weight marker containing 4 dyes which serve as visual aids to monitor the progress of migration during agarose gel electrophoresis.
This product is designed for sizing and approximate quantification of wide range double-stranded DNA fragments on agarose and polyacrylamide gels.
The marker is composed of fourteen chromatography-purified individual DNA fragments (in base pairs) : 3,000, 2,000, 1,500, 1,200, 1,000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200, 100. The 500 and 1000 base pair bands have increased intensity to serve as reference points.
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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DNA-Methyltransferase AssayThis protocol was written by Jean-Pierre Issa, based on Adams et al.* Kam-Wing Jair has made some useful shortcuts that work well if 查看更多>
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下一代基因组测序(NGMS)可能具有发现血液中新的病毒感染的广泛潜力,如人类hepegivirus-1(HHpgV-1),目前无法通过常规方法发现。 HHpgV-1是否导致人类疾病仍有待观察。研究结果发表 查看更多>
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2021-09-07
AJHG:科学家利用全基因测序来鉴别个体的患病风险 查看更多>
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刘芝华 中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室 概念: 基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体;cDNA文库是指含有所有重组cDNA的克隆群体。 基因组 查看更多>
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请教DOP-PCR和ALU-PCR在扩增BAC/PACDNA制备探针文库时的优劣,或者说都可以。
所谓基因表达,就是从DNA到mRNA再到蛋白的一个过程,基因表达水平一般是通过该基因转录的mRNA的多少来衡量的。每个基因转录产生的mRNA的量,是受到时空等多种因素调控的,个体在不同的生长发育阶段,或者不同的组织水平,基因转录出mRNA的量都是不一样的。例如,当某种植物长期生长在高盐的环境里,该植物体内与抗盐相关的基因的表达量就会增加,以适应这种高盐环境,是植物能够生存下来,这时植物抗盐相关的基因表达水平就相对高,希望我的回答能够帮你弄清这个问题,呵呵!
是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作:一、cDNA第二链的合成:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer6ul10mM dNTP(自己配制)xuldd H2O1ulRNase H(2U/ul)10ul DNA Polymerase I(10U/ul)总体系为200ul;2. 混匀后,16℃反应2.5小时;3. 70℃灭活10分钟;4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;5.取2ul二链产物,同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder,确定双链的大小范围。注:一链,二链的电泳图是smear,且二链稍比一链大一些。二、双链cDNA末端补平:1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):6ul 10mM dNTP2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul) 2ul BSA(10mg/ml)2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.注:第3,第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。PCR纯化试剂盒操作流程:1.溶液PE使用前应加入适量体积95%-100%的乙醇,混匀。2.向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB,混匀。3.加入spin column中,13000rpm离心1min。4.加入0.75ml buffer PE,13000rpm离心1min。5.13000rpm,再离心1min。6.将spin column放入一新的离心管中,加入50ul buffer EB,静置10min。7.13000rpm离心2min。8.加入30ul buffer EB,静置10min。9.13000rpm离心2min。10.加入1/10体积3M的NaAc,2.5倍体积无水乙醇,混匀,-20℃沉淀过夜。
哪位专家可以帮我一下,能不能给我一份详细些的关于构建基因组文库的基因组DNA的提取流程及注意事项?谢谢大家了!
另外,我准备买clonetech公司的基因组文库构建试剂盒,大家认为怎么样?有什么好的建议?
试剂盒DNA提取详细操作步骤 123
ballance1﹐k鍃2017-10-03
室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象,请于50℃溶解后,再于室温保存。向左转|向右转
效果好的话当然是promega或者omega的,不过会贵很多 都是美国佬的东西
便宜点的就是国产的tiangen,效果会差一点点 如果是大样本的全血 用这个也凑合
天根的DNA提取试剂盒中,组织样品要求先将组织制备成单细胞悬液,再进行下一步操作。http://www.tiangen.com/?productShow/t1/1/id/26.html请问大家用过这个试剂盒的是怎么操作的?
产品介绍:
普通的手提或者试剂盒提取的土壤基因组DNA由于常常残留有PCR的强烈抑制物如腐殖酸、棕黄酸等杂质造成实验失败,此外,由于采用了剧烈的玻璃珠击打来破裂菌体,常常造成DNA剪切和降解。本公司经过长期研发开发出了具有自主知识产权的土壤基因组DNA,通过专利配方的腐殖酸和棕黄酸去除试剂配合特殊处理的纯化柱,可以最大程度的去除这些杂质,同时加上多次柱漂洗,确保得到的DNA具有极高纯度,此外独特的抽提和裂解体系可以迅速裂解细胞(壁)和灭活细胞内核酸酶,不需要借助玻璃珠破壁,有效保证了基因组DNA的完整性。
产品特点:
1.本公司独有的专利配方和纯化柱能有效去除腐殖酸等杂质。
2.不需要借助玻璃珠破壁,有效保证了基因组DNA的完整性,长度可达30kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
3.兼容性强,适用于各种不同的土壤包括淤泥等提取困难的土壤。
4.多步骤去除各种杂质和抑制物,保证了极高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9。
5.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
6.快速,简捷,单个样品操作一般可在60分钟内完成。
你找下,杭州昊鑫生物
各位战友:

样本:从沸水煮过的中药上清
目的:提取DNA并进行PCR检测

问题:
(1)这样的样本中DNA应该会大部分降解,仅有痕量保留,能否推荐一些痕量DNA提取或检测的试剂盒
(2)Qiagen的法医级别试剂盒有人用过吗?效果如何?
(3)这样的实验战友们有成功的案例吗?

非常感谢!
1、DNA提取问题:现在核算提取试剂盒大部分都是吸附柱法,相信你应该不会操作错误,如果提取之后进行核酸定量结果很低的话,试着再最后一步溶解核算的时候把水稍微加温(37℃就可以了),溶解时间稍微长一些,然后再离心的时候采用分次离心,比如开始你用200ul溶解的话,你可以分两次用100ul水溶解离心,这样可以提高DNA的产率.
2、电泳问题:如果你核酸定量浓度不低的话就考虑电泳问题,电泳的时候加上1kb的marker,如果marker跑不出来说明你凝胶有问题,一般只要marker跑出来了,DNA浓度又比较高,而没有条带这样的现象很少见,DNA提取比较简单而且相当稳定,本人当时做甲基化提取的DNA有一次拿出来电泳忘了放回冰箱了,结果大夏天的在外面放了一天,心怀忐忑的进行了一次电泳,结果条带依然给力,一点都没有降解.
什么是试剂盒,试剂盒有哪些?123
文爷君墨勬勷2021-07-26
装试剂的盒子按方法可以分为普通PCR试剂盒(定性),荧光定量PCR试剂盒(定量).荧光定量PCR试剂盒根据染料又分为SYBEGREEN法,探针法,等.
根据模板的类型分为DNA类PCR试剂盒和RNA类PCR试剂盒
PCR mix厂家:普洛麦格公司,QIAGEN公司,罗氏公司,TAKARA公司.
成品PCR试剂盒厂家:深圳匹基,上海之江,中山达安,上海科华,上海复星.
我用的是华美生物工程公司全血基因组DNA纯化系统试剂盒,说明书上说利用A260光吸测定浓度对该方法制备的基因组DNA是不适用的,产量可达1ug/20ul全血,5-10ul上清液可以直接用于PCR扩增。
我分别用3ul、5ul、8ul都试过了,没有任何条带,用别人别的方法提好的DNA做,却能出现结果,不知道是自己提取的DNA浓度不够,还是根本没有提取出来。
不知道谁用过,或者有更好的全血提取NDA的试剂盒推荐呢?
本人刚刚开始做PCR,谢谢各位高手!
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