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Lucigen/CloneDirect Rapid Ligation Kit/40020-5/96 rxns
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Lucigen/CloneDirect Rapid Ligation Kit/40020-5/96 rxns
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Lucigen
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TheCloneDirectRapidLigationKitisasimple,rapid,highlyefficientalternativetostandardligationandtransformationprotocols.Thiskiteliminatestherequirementforapost-ligationcleanupstepbeforeelectroporation.A15-minuteheatdenaturationat70°Cisallthatisneededpriortocelltransformation.

Gel showing CloneDirect

Figure1.Ligationefficienciesmeasuredbytransformation.Ligationreactionswereheatdenaturedat70°CandusedwithoutadditionalcleanuptotransformelectrocompetentE.cloni®10Gcells.Transformants(inmillions)areshown.

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TheCloneDirectRapidLigationKitcontains:10XCloneDirectBuffer(containsATP),CloneSmart®DNALigase,andcompleteprotocols.
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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本文对传统的PCR产物克隆方法进行简要介绍,然后针对目前市场上的克隆试剂盒类的产品进行介绍,对于选购提供一定的指导。 查看更多>
无缝克隆,助你成功 日期:2014年2月17日 10:24 所属类别: 促销信息 该资讯的关键词为: ... 查看更多>
【正品直销,售后保障】(一步搞定无缝克隆)ClonExpress II One Step Cloning Kit是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂,产品来源于江苏南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销,售后保障】(一步搞定无缝克隆)ClonExpress II One Step Cloning Kit试剂销售服务商之一,在南京等地方销售【正品直销,售后保障】(一步搞定无缝克隆)ClonExpress II One Step Cloning Kit试剂已经多年 查看更多>
小鼠单抗Ig分型试剂盒。本试剂盒利用双抗体夹心法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克隆抗体或特异亲和纯化的单克隆抗体的类和亚类(可区分出IgG1\\IgG2a\\IgG2b\\IgG3\\IgM\\IgA)。... 查看更多>
实验原理重组质粒的构建T质粒载体重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。... 查看更多>
中美泰和生物技术(北京)有限公司在发布的超好用的无缝克隆试剂盒-一步定向克隆多个片段至任何位点-CloneSmarter品牌—中美泰和独家代理供应信息,浏览与超好用的无缝克隆试剂盒-一步定向克隆多个片段至任何位点-CloneSmarter品牌—中美泰和独家代理相关的产品或在搜索更多与超好用的无缝克隆试剂盒-一步定向克隆多个片段至任何位点-CloneSmarter品牌—中美泰和独家代理相关的内容。 查看更多>
2021-08-31
上海研谨生物科技有限公司在发布的BM无缝克隆试剂盒供应信息,浏览与BM无缝克隆试剂盒相关的产品或在搜索更多与BM无缝克隆试剂盒相关的内容。 查看更多>
精准医疗时代,肺腺癌的治疗应首先检测 EGFR、ALK、ROS1 的突变 / 重排,基因异常的患者首选靶向治疗;美国 FDA 已批准克隆 22C3 免疫组化检测 PD-L1 肿瘤比例评分(TPS)≥ 50% 的患者使用帕姆单抗一线治疗,但是还不清楚二者是否可以同时存在。近日,哈佛医学院的 Deepa Rangachari 教授同时检测了肺腺癌患者的基因异常和 PD-L1 表达,结果发表在 JTO 上,让我们一起来看看!研究回 查看更多>
企业介绍: 宜康(杭州)生物技术有限公司是英国Abcam在华全资子公司,总公司座落于英国剑桥,成立于 1998年并于2005年在伦敦上市。Abcam是世界有名的抗体王国,以优质、齐全的产品、完善的网络支持功能和强大的技术支持队伍得到全球客户的认可 和赞誉。至今,Abcam在尤金、旧金山、布里斯托尔、剑桥、香港、杭州和东京均设有分公司。 宜康生物拥有的兔单克隆抗体(RabMA 查看更多>
克隆载体pBR322是由深圳市宝珠生物科技有限公司代理或销售的Promega品牌的试剂,产品来源于美国。深圳市宝珠生物科技有限公司是中国最权威的克隆载体pBR322试剂销售服务商之一,在深圳等地方销售克隆载体pBR322试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业克隆载体pBR322仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的克隆载体pBR322产品 查看更多>
2019-07-23
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。置换型载体(如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 3... 查看更多>
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"克隆人"会引起哪些伦理问题?
相关疾病:先天性卵巢发育不全综合征我们用美国海伦娜的试剂盒,等电聚焦法测CSF-OCB,跑出的胶总是不平整,导致转膜不好.700V,电...
求教:网找逆转录病毒哪些病毒含逆转录酶呢举几种类病毒名称
我要做载体构建的课题,想用pCDNA3.1TATOPO克隆试剂盒进行连接,不用限制酶切割即能把目的基因连入载体里,我对这个原理不太清楚,有用过的可以详细介绍一下吗?现在哪个公司做这种试剂盒?从哪里可以买得到?先谢谢大家了!
斐林试剂工作原理醛基与氢氧化铜发氧化原反应氧化亚铜所斐林试剂氢氧化钠氢氧化铜反应物提供碱性条件
双缩脲试剂工作原理铜离强碱性条件与肽键发反应紫色络合物
(我做实验候斐林试剂先试管制加原糖溶液双缩脲试剂先往蛋白质加碱再加铜离所原双缩脲试剂硫酸铜浓度比氢氧化钠稀斐林试剂二者浓度相近原)
单克隆抗体亚型分类鉴定试剂盒有哪些?武汉的
胱抑素C检测试剂盒(干式免疫荧光定量)内含10条、25条、50条或100条单份检测卡每份试剂由检测卡干燥剂构检测卡由试纸条外壳试纸条构其试纸条由品垫、层析膜(检测区包CysC单克隆抗体I作捕获抗体质控区包兔抗鼠IgG抗体NC膜缘与品垫交界处包荧光标记CysC单克隆抗体II)、吸水纸、衬垫构检测缓冲液10管/盒25管/盒50管/盒100管/盒四种规格含吐温20、叠氮钠防腐剂等磷酸盐缓冲液pH=7.2±0.2基本参数:线性范围:0.50mg/L~10.00mg/L范围内线性相关系数r≥0.990准确度:相关系数r≥0.975相偏差≤20%批内重复性:应≤10%批间差:应≤15%
我实验当中要用到荧光探针来定位某条中期染色体,这个探针是这个染色体上的特定单拷贝序列,如果我自己要设计探针找公司合成的话,请问下大家这个探针的长度至少要多长?(采用间接标记的方法)望大家不吝赐教,谢谢!
mRNA模板经反转录酶催化体外反转录cDNA步骤应该与DNA复制程类似需要原料mRNA模板四脱氧核糖核苷酸逆转录酶能量注意:获DNA片段含非编码区序列专业答).构建cDNA文库:物细胞总mRNA模板用反转录酶合互补双链cDNA接载体转入宿主建立基文库cDNA文库1、mRNA提取及其完整性确定1)总RNA提取RNA提取:APGC或NP-40或应用试剂盒提取总RNA2)mRNA离高等真核物mRNA3'端均poly(A)尾总RNA通寡聚(DT)纤维柱离mRNA或利用磁珠制备纯mRNA某些情况裂解细胞用蔗糖梯度制备mRNA-核糖体复合物作提取mRNA替换途径3)mRNA纯化①按照总mRNA进行级主要用琼脂糖凝胶电泳蔗糖密度梯度离进行级;②聚核糖体免疫纯化利用抗体纯化合目肽4)mRNA完整性确定确定mRNA完整性三种:①直接检测mRNA;②测定mRNA转译能力;③检测总mRNA指导合cDNA第链能力2、cDNA合克隆1)cDNA第链合用亲层析mRNA根据mRNA3'端poly(A)尾结构原理用12~20核苷酸oligo(dT)与纯化mRNA混合oligo(dT)与poly(A)结合作反转录酶引物反转录反应产物条RNA-DNA杂交链oligo(dT)结合mRNA3'端合全cDNA需要反转录酶mRNA端移另端种全合难达尤其mRNA链建立种随机引物合cDNA随机引物种度6~10核苷酸由4种碱基随机组DNA片段与oligo(dT)仅与mRNA3'端结合同mRNA同位点结合随机引物合产物RNA-DNA杂交体cDNA克隆载体前必须种杂交体RNA转变DNA链即形双链DNA2).双链cDNA合合cDNA第二条链两种种利用cDNA第链3'末端现发夹环特征种发夹结构反转录酶第链末端返折并且进行复制第链结合cDNA第二链提供用引物用种合双链cDNA端发夹环用单链特异S1核酸酶切S1核酸酶处理修剪cDNA顺序使cDNA丢失mRNA5'端部顺序另种用肠杆菌RNaseH进行修饰RNaseH能识别RNA-DNA杂交并其RNA切割短片段些RNA短片段仍与cDNA第链结合新合DNA所取代新合DNA存切口用DNA连接酶些切口连接起形条完整DNA链RNaseH优于S1核酸酶能获包括mRNA5'端全部或绝部更顺序cDNA3)cDNA重组载体合cDNA与载体DNA进行连接般3种:①借助于末端转移酶3'-OH端合均聚物能力双链cDNA线性化载体DNA3'-OH端别加均聚核苷酸链;②双链cDNA线性化载体DNA别用Klenow片段进行末端补平用T4DNA连接酶进行齐连接形重组体;③通粘性末端连接4).转化重组载体DNA定条件转化入肠杆菌形携带质粒菌株同重组DNA含同cDNA基整转化含自mRNA群体各种cDNA基转化群体构该mRNA全部遗传信息cDNA基文库5).目cDNA克隆鉴定用于cDNA文库筛选鉴定目cDNA主要3种:①核酸杂交②免疫杂交检测③cDNA同胞选择

采用6孔板接毒后,铺上低溶解度琼脂糖,第二天就出来了这些病变,正常细胞没有出现这种现象。
按说空斑应该出现多个,但我的六孔板中一个空最多也就出现了2个空斑,也不像文献报道的那样规则,而且很大!
由于没有做梯度稀释,会不会是接毒量过大造成的啊?请大侠指点,万分感谢!
基因敲除小鼠 实验方法 123
王木木1272017-12-02
重组载体电转胚胎干细胞基敲除鼠已经现代命科基础研究药物研发领域或缺实验物模型基于胚胎干细胞基打靶技术制备基敲除鼠目前止唯满足几乎所基组修饰要求打靶技术. 课题设计. 获F1代鼠. 利用百奥赛图自主发UCA试剂盒sgRNA/Cas9进行性检测; 7、EGE技术(基于Crispr cas9技术)比较火热基敲除鼠制备技术; 4;Cas9 mRNA; 5; 2利用PCRsouthern blot杂交技术(基敲除鼠检测金标准)F1代鼠进行基型鉴定. 嵌合鼠. 鼠受精卵原核注射sgRNA/. 按照课题设计完打靶载体设计构建; 2基敲除/用G418筛选转染胚胎干细胞. 体外转录sgRNA/利用两种技术制备基敲除鼠流程阳性克隆;敲入效率高速度快;敲入实现基快2月即F0代阳性鼠. 进步通PCRsouthern blot杂交技术(基敲除鼠检测金标准)步阳性克隆进行筛选目前应用鼠基敲除命科; 6. 设计构建打靶载体; 3. 获Fo代鼠利用PCRFo代鼠进行基型鉴定; 3. 设计构建识别靶序列sgRNA其实; 4、 利用EGE技术(基于Crispr cas9技术)制备基敲除鼠流程 15月F1F1代杂合鼠、类医药健康研究领域发挥着重要作用、 基于胚胎干细胞基打靶技术制备基敲除鼠流程. 胚胎干细胞阳性克隆注射鼠囊胚基于胚胎干细胞基打靶技术并获F1阳性杂合鼠稳定整合外源基胚胎干细胞阳性克隆EGE技术(基于Crispr cas9技术)系统构建简单: 1; 5虽EGE技术(基于Crispr cas9技术)制备基敲除鼠看似比基于胚胎干细胞基打靶技术制备基敲除鼠流程繁琐且其周期工作量订购课题BAC菌. 设计构建致靶基切割EGE系统载体质粒; 8;Cas9 mRNA打靶载体并植入假孕鼠宫内; 6二、物种基敲除/
1) 克隆减少遗传变异,通克隆产体具同遗传基,同疾病敏性,种疾病毁灭整由克隆产群体. 设想,家牛群都同克隆产物,种并严重病毒能毁灭全畜牧业.
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体,按自规律促进整种群优胜劣汰.意义说,克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术,需要量金钱物专业士参与,失败率非高.莉277实验唯.虽现发展更先进技术,功率能达2-3%.
4) 转基物提高疾病传染风险.例,产药物牛奶牛染病毒,种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制.克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作.伦理家所能接受.
6) 克隆技术用创造超,或拥健壮体格却智力低.且,克隆技术能够类效运用,男性失遗传意义.
7) 克隆技术家庭关系带影响巨.由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟,延迟几十已.难设想,发现自另外完全复制品,(或)受